苦参生物碱的提取、分离和鉴定教学实验的改进

刘迪依，何煜楠，俞超英，胡雅楠，洪越月，金纯纯，白亚萍（.绍兴文理学院，浙江绍兴3000；.浙江医药股份有限公司新昌制药厂，浙江新昌3500）



苦参生物碱的提取、分离和鉴定教学实验的改进

刘迪依1，何煜楠1，俞超英2，胡雅楠1，洪越月1，金纯纯1，白亚萍1
（1.绍兴文理学院，浙江绍兴312000；2.浙江医药股份有限公司新昌制药厂，浙江新昌312500）

摘要：通过对原有教学实验中对苦参碱进行索式提取的溶剂以及蒸馏方式的改进提高苦参碱的提取产量。

关键词：苦参；生物碱；提取工艺；纯化技术；改进

苦参生物碱是苦参的主要生理活性物质[1]，它能溶于水、苯、氯仿、醇类[2]，具有利尿、抗病原微生物、抗炎、抗变态反应、抗肿瘤、免疫调节等药理作用[3-5]。目前常见的苦参碱制备方法有[6-10]：①溶剂提取法，即利用水、酸及乙醇等作为提取溶媒，用浸渍、渗漉、煎煮、回流等方法对苦参碱进行提取；②离子交换法，即利用离子交换树脂柱，使生物碱离子交换在树脂上，使非生物碱化合物流出柱外，最后再用氨水等将生物碱由树脂上置换下来的方法；③其它如树脂吸附法和超临界流体萃取技术等。

由于苦参碱的提取技术涉及到几种重要的天然药物的提取、分离方法，本校多年来即采用其作为主要的教学实验。但原有方法存在很多不足之处，需要改进。

1　原教学实验方法

1.1提取

取1.3mL盐酸加入约400mL水，配制成0.1％左右浓度的稀盐酸，取50g苦参片泡入其中，并在20℃～25℃室温浸泡半天以上，测pH值接近中性。

1.2树脂交换

已经预处理（酸泡过）的阳离子交换树脂60g，装入柱子中，去离子水洗到接近中性，慢慢加入提取液，控制流速为每秒2～4滴，滴完后，去离子水洗到接近中性。

1.3索式提取

取出树脂，倾倒去水，抽干，加2～3mL氨水拌匀后放置10～20min以强化中和反应，晾干，装入索式提取器纸袋中，开始用氯仿提取，虹吸三次后结束。

1.4浓缩、薄层分析

上述提取液冷却后，快速改为蒸馏装置，蒸出溶剂至只剩余少量溶剂。使用展开剂：氯仿∶甲醇∶氨水=15∶4∶0.5进行薄层分析，显色剂为改良碘化铋钾水溶液。

2　对原实验方案的分析

总体说来，原教学实验内容丰富，安排比较合理，。但存在的主要缺点是：制备得到的产物过少，一般蒸干后只有不到0.1g粗品；另外，使用了有毒溶剂氯仿。针对以上缺点，我们仔细考查了实验细节，进行了改进。

3　改进后的实验方法

苦参碱提取、树脂交换等都与原实验相同，待交换结束，去离子水洗到中性后，将树脂过滤抽干，包好放入索式提取器中，用3mL三乙胺和100mL左右的无水乙醇提取。提取结束后，冷却，用减压蒸馏装置蒸干，薄层分析。

4　结果与讨论

4.1改进前后的实验结果对比（表1）

4.2讨论

（1）在提取时要严格控制盐酸浓度、酸量等。酸过少，则提取不充分；酸过多，则多余的盐酸对下一步交换不利，最好提取后水相接近中性，提取时间至少3～4h。原有实验方案在提取、交换时的操作基本正确，没有明显问题。

（2）原有方案在中和时使用氨水，可能是造成最终粗品收率低的主要原因，由于是静态中和，氨水对树脂的浸透、扩散等都非常缓慢，而且氨水的浓度只有25％，更加限制了其扩散及交换；而三乙胺浓度高，与水相及有机相皆可混溶，易于扩散、中和，特别是其不需要单独的碱中和过程，而是在乙醇提取时与乙醇一起汽化，更加有利于树脂内部的扩散和中和，因此效果远远好于氨水。

（3）原有方案提取剂采用氯仿有一定道理，氯仿对产物的溶解度很好，但缺点是氯仿毒性大，在工业生产中已很少使用，也不适合作为教学实验使用，因此，用无毒的乙醇替代氯仿是较大进步，而且效果很好，实现了较高的收率。

参考文献

[1]雷孝章，王金锡，彭沛好，等.中国生态林业工程效益评价指标体系[J].自然资源学报，1999（4）：175- 182 .

[2]蒋珍藕.苦参碱的提取工艺及测定方法的研究进展[J].中医药导报，2005，11（8）：96- 100.

[3]郭琦，徐万国，刘志屹，等.苦参碱治疗单纯疱疹性角膜炎的药效学研究[J].中国药理学报，2007，23（4）：116- 119．

[4]尚智，丁涛，温富春，等.苦参碱对小鼠免疫功能的影响[J].长春中医药大学学报，2007，23（2）：21- 22．

[5]薛贵平，庞学书，薄爱华，等.苦参碱对免疫性肝损伤保护作用的研究[J].时珍国医国药，2007，18（6）：30- 31．

[6]高拴平，原春兰，官晓成，等.从苦参中提取苦冬碱的研究[J].化学工业与工程，2001，18（6）：108- 110.

[7]张存莉，马惠玲，张宏利，等.苦参生物碱工业生产新方法的探究[J].西北林学院学报，2004，19（1）：113- 114.

[8]秦学功.天津大学博士学位论文·苦豆子生物碱分离纯化与生物活性研究[D].天津：天津大学出版社，2002：1.

[9]田成旺，秦学功，高瑞昶，等. DF01大孔树脂吸附苦参碱过程的研究[J].离子交换与吸附，2002，18（5）：24- 29.

[10]葛发欢，黄星，谭晓华，等.非离子表面活性剂对超临界CO2从苦参中萃取苦参碱类的影响[J].中药材，2003，26（6）：38- 39.

[11]张保献.不同精制方法对苦参水提取液中苦参生物碱含量的影响[J].中国中药杂志，2000，25（10）：31- 33.□

The Improvement on Teaching Experiment of the Extraction，Isolation and Identification of Matrine

LIU Di-yi1，HE Yu-nan1，YU Chao-ying2，HU Ya-nan1，HONG Yue-yue1，JIN Chun-chun1，BAI Ya-ping1
（1.Shaoxing University，Shaoxing 312000，China；2. Xinchang Pharmaceutical Factory，Zhejiang Medicine Co.，Ltd.，Xinchang312500，China）

Abstract:In this experiment，the extraction yield of Matrine was improved bythe method ofsolvent extraction and distillation in the original teachingexperiment.

Key words:Kuh- seng；Alkaloid；extraction process；purification technology；improvement

作者简介：刘迪依（1996-），女，本科在读，药学专业，17858503629，17858503629@163.com。

收稿日期：2015- 12- 14

中图分类号：O622.4

文献标识码：A

文章编号：1008- 553X（2016）02- 0040- 02

doi：10.3969/j.issn.1008- 553X.2016.02.012