全自动微柱凝胶技术在ABO、RhD血型鉴定中的应用分析

张 茜，陈黎辉

全自动微柱凝胶技术在ABO、RhD血型鉴定中的应用分析

张 茜，陈黎辉

全自动微柱凝胶技术；ABO；RhD；血型鉴定

血型鉴定工作是临床医疗工作的重要组成部分，是保障输血安全的基础。目前，血型鉴定的方法很多，例如玻片法、纸板法和试管法等［1］。随着医疗科技的不断进步，全自动微柱凝胶技术开始广泛应用于ABO、RhD的血型鉴定中，具有较强的特异性，安全可靠，消除了人为因素对鉴定结果的影响［2］。为了探讨全自动微柱凝胶技术在ABO、RhD血型鉴定中的临床应用价值，笔者所在医院选取了6820例ABO和RhD血型抗原标本进行了如下研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料 于2016年1月—3月笔者所在医院采集6820例首患者的首次血样标本。

1.2 试剂与方法

1.2.1 检测准备 （1）血样采集。空腹状态下采集5 ml外周静脉血，置入EDTA－K2抗凝真空无菌采血管，3 h内完成检测。（2）仪器准备。血型血清学多用离心机（日本久保田，KA－2200型），自动加样系统 （Swing Twin Sampler）和瑞士达亚美生产的SaxoID－Reader系统［3］。（3）试剂准备。实验室自制的人源抗A、抗B血清，长春博德生物技术有限责任公司生产的单克隆抗A、抗B标准血清以及凹形ABO/RhD血型鉴定纸板，上海血液生物医药有限公司生产的3%A、B、O红细胞试剂和IgM单克隆抗D血清，瑞士达亚美生产的ABO/RhD血型鉴定卡［4］。

1.2.2 检测方法 A组采用纸板法鉴定，参照玻片法操作，在抗A、抗B和抗D的纸板凹形检测孔内，分别滴入1滴对应的标准血清和1滴3～5%的红细胞悬液，搅拌均匀后，在Ac和Bc检测孔内，滴1滴受检者血浆，然后分别滴1滴3%A、B型红细胞试剂，搅拌均匀。

B组采用全自动微柱凝胶技术鉴定，使用自动加样系统，严格按照操作要求执行，然后使用SaxoID－Reader系统对血型离心、鉴定结果等信息进行保存。

若A组和B组的血型鉴定结果不一致，则采用经典试管法，同时配合吸收放射实验、唾液型物质抑制实验以及检测H抗原强度来确定最终血型［5］。

1.3 观察指标 对两组ABO和RhD血型鉴定的一次性准确率进行统计和比较。A组的ABO鉴定结果参照正反定型结果，RhD血型则以反应系统是否出现凝集作为判定标准；B组则为自动判定结果［6］。

1.4 统计学分析 采用SPSS17.0软件对研究数据进行分析，计数资料用%表示，进行χ2检验，当P＜0.05时，差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血型鉴定一次性准确率比较 经比较，A组ABO血型的一次性准确率为99.69%，低于B组的99.90%，组间差异有统计学意义 （P＜0.05）；A组RhD血型的一次性准确率为99.96%，和B组的100%比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 两种鉴定方法的一次性准确率比较

2.2 最终定型结果 经试管法配合吸收放射实验、唾液型物质抑制实验以及检测H抗原强度，上述未定型标本均正确定型。

3 讨论

试管法、玻片法和纸板法是血型鉴定的传统方法，不同的鉴定方法均有显著优势，但也存在一定的局限性。其中试管法是ABO和RhD血型鉴定的金标准，鉴定结果可靠，但是由于其操作很难进行规范化管理，所以不适合大量标本的批量处理。玻片法的操作比较简单，而且不需要进行离心处理，在血液普查中具有显著优势，但是反应速度较慢，耗时较长，很容易因为忽略反应较弱的凝集，导致定型错误。纸板法则是在玻片法基础上的一种改良，能够同时完成ABO正反和RhD鉴定，但是周围环境和观察时间等都会对鉴定结果造成干扰。

随着医学技术的不断进步和相关设备的更新，全自动微柱凝胶技术应运而生，并开始在血型鉴定中广泛使用。微柱凝胶技术属于免疫学检测技术的范畴，在常规红细胞血型血清学检测中，已被欧美发达国家接受。其中的凝胶会产生分子筛效应，所以红细胞为主凝胶中，可以和相对应的抗体结合。经过低速的离心处理后，凝集的红细胞就会在凝胶中悬浮，但是假若红细胞没有和抗体结合，则会沉淀在凝胶的底部［7］。

正因为微柱凝胶技术具备上述特点，所以在ABO血型及其亚型的鉴定中具有显著的优势。由于很多亚型的红细胞在和标准的血清发生反应后，会呈现出混合视野，就是在同一个反应体系中，既存在凝集的细胞群，也存在游离的细胞群。在这种情况下，若采用传统的试管法或者纸板法就很难发现，极容易忽略，导致定型错误。但是采用全自动微柱凝胶技术，则可以清晰地呈现双视野。在本次血型的鉴定中，B组只有1例在后来的检验中，被证实为A3亚型的标本，该结果充分证实，在ABO血型的亚型鉴定中，全自动微柱凝胶技术具有显著优势。

纸板法是在玻片法的基础上加以改良形成的，因为能够同时进行ABO和RhD的血型鉴定，所以在广大的基层医院中，是血型鉴定的主要方法。由于纸板法的鉴定结果会受到多种外界因素的影响，所以很容易产生假阳性结果。该研究中，A组ABO血型的一次性准确率为99.69%，低于B组的99.90%，组间差异存在统计学意义（P＜0.05）。其中有10例出现了正反定型不一致，很有可能是受到血浆蛋白的干扰。即使改用试管法后仍然无法定型，经过对患者红细胞洗涤在反定体系中滴加盐水等处理后方可正确定型。但是这10例标本使用全自动微柱凝胶技术则一次正确定型，表示该鉴定技术不受血浆蛋白等因素的影响。

同时，本组的研究结果还显示，A组RhD血型的一次性准确率为99.96%，和B组的100%比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。该结果表示，柱凝胶技术的敏感度较高，具有较强的抗干扰能力，结果可靠。

综合上述分析可知，全自动微柱凝胶技术在ABO、RhD血型鉴定中具有较高的准确率，安全可靠，灵敏度较高，亚型发现率较高，有助于实现标准化和规范化的实验操作，减少人为因素的差错率，而且能永久保存，为医疗工作提供服务，具有较高的临床应用价值。

［1］孟庆宝，单万水，张 平.一种国产全自动血库系统的临床应用效果评估［J］.中国输血杂志，2015，28（2）：143－145.

［2］王 玲，骆 宏，姬艳丽.探讨RhD阴性确认试验预测胎母输血综合征的临床应用［J］.临床输血与检验，2015，17（2）：150－152.

［3］梅方超，黄 飞，吴丽娜，等.HSI全自动微柱凝胶免疫检测分析仪在血型鉴定中的应用评价［J］.临床血液学杂志：输血与检验，2015，28（4）：320－321，325.

［4］袁宏香，于艳华，张瑞金，等.戴安娜全自动血型仪在血型鉴定及交叉配血中的应用［J］.国际检验医学杂志，2014，35（11）：1480－1481.

［5］田 宁.手工微柱凝胶免疫检验法在ABO、RhD血型抗原鉴定中的应用［J］.大家健康：学术版，2014，8（8）：81－82.

［6］刘桂晔.卡式微柱凝胶法在ABO、RhD血型鉴定中的应用价值［J］.生物技术世界，2013（8）：70.

［7］吴 涛，张长虹，周 俊，等.全自动血型及配血系统在新生儿输血安全中的应用［J］.临床血液学杂志：输血与检验版，2012，25（6）：337－340.

［2016－03－12收稿，2016－04－10修回］ ［本文编辑：吴 蓉］

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10.14172/j.issn1671－4008.2016.09.021

450007河南郑州，解放军153医院输血科（张茜，陈黎辉）