乙二胺四乙酸依赖性假性血小板减少的分析

崔俊林，曹　娟

(1.钟祥市人民医院检验科，湖北钟祥 431900；2.台州恩泽医疗集团(中心)路桥医院检验科，浙江台州 318050)



·临床研究·

乙二胺四乙酸依赖性假性血小板减少的分析

崔俊林1，曹娟2

(1.钟祥市人民医院检验科，湖北钟祥 431900；2.台州恩泽医疗集团(中心)路桥医院检验科，浙江台州 318050)

摘要:目的探讨乙二胺四乙酸依赖性假性血小板减少(EDTA-PTCP)的原因及鉴别要点和防范措施，减少或防止误诊误治。方法对2013年1～12月钟祥市人民医院检验科发现的3例EDTA-PTCP患者分别用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管、肝素抗凝管和枸橼酸钠抗凝管采集静脉血，而后用全自动血液分析仪分别测定血小板数量，并用毛细血管血进行血小板手工计数，且制作EDTA-K2抗凝血涂片和毛细血管血涂片，并用瑞氏染色镜检。结果EDTA-K2抗凝血的机测血小板结果均很低(<50×109/L)，血小板直方图存在曲皱、尾部上翘、拖尾、无拟合曲线等异常；枸橼酸钠抗凝血和肝素抗凝血机测结果正常，血小板直方图也正常；手工计数血小板数量正常，且涂片可见分布正常。3例均明确为EDTA-PTCP。结论EDTA-K2抗凝剂可引起血小板聚集，造成血小板假性减少。用全自动血细胞分析仪检测EDTA-K2抗凝血时，若出现血小板减低而患者无出血倾向、血栓形成等相关血小板减少症时，应进一步进行人工计数、血涂片复查和更换抗凝剂等方法复检，以减少或避免误诊误治。

关键词:血小板；乙二胺四乙酸；假性血小板减少

目前，全自动血液分析仪在临床检验工作中广泛应用，乙二胺四乙酸(EDTA)是国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐的血细胞分析仪计数的抗凝剂。它的原理是能与血液中的钙离子结合成螯合物，而使钙离子失去凝血作用，从而阻止血液凝固。但其偶可诱导血小板发生体外聚集，血细胞自动分析仪又不能加以识别，导致血小板计数低于实际值，而出现假性血小板减少现象，即EDTA依赖性假性血小板减少症(EDTA-PTCP)，易造成误诊误治，甚至引发医疗纠纷[1-2]。钟祥市人民医院2013年1～12月共发生3例EDTA-PTCP，现结合相关文献分析报道如下。

1资料和方法

1.1一般资料本组3例，男2例，女1例，其中2例男性为接受健康体检者，1例女性为择期剖宫产手术的住院患者。3例患者均无皮肤黏膜出血、紫癜等明显出血倾向。乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝的静脉血用全自动血细胞分析仪计数均发现PLT<50×109/L，但末梢血涂片染色后镜检发现血小板分布正常，而且用肝素抗凝真空采血管、枸橼酸钠抗凝真空采血管重抽后血液分析仪计数和末梢血手工计数的血小板数量均在正常范围。

1.2仪器和试剂Sysmex XE-2100 全自动血细胞分析仪及其配套试剂，德国赛力斯BE-XRM血凝仪及配套试剂，EDTA-K2真空采血管、枸橼酸钠抗凝真空采血管及肝素抗凝真空采血管(均由浙江康是医疗器械有限公司生产)，SP-1000i 推片机，OLYMPUS-BX41显微镜，Neubauer 计数盘，载玻片(由天津玻璃厂生产)，手工计数血小板稀释液及瑞氏染液均参照《全国临床检验操做规程》[3]由本实验室配制。

1.3临床排查 仔细查体观察患者有无皮肤、黏膜出血，排除血小板减少的相关性疾病，检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)。

1.4血小板复查

1.4.1仪器法 分别用EDTA-K2抗凝管、肝素抗凝管和枸橼酸钠抗凝管采患者静脉血2 mL，充分混匀，严格按照操作规程，在30 min内应用Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪分别测定血小板。血小板的参考范围是(100～300)×109/L。

1.4.2手工法取毛细血管血20 μL按《全国临床检验操作规程》(3版)的操作方法进行血小板手工计数。

1.4.3瑞氏染色分别用患者毛细血管血涂片1 张，EDTA-K2抗凝静脉血涂片1 张，用瑞氏染液染色，在显微镜下观察血小板分布情况。

2结果

本组均排除采血不当、抗凝剂与血液混匀不均导致的血小板减少。查体发现3例均无皮肤、黏膜出血，且凝血功能检测正常。EDTA-K2抗凝静脉血用仪器法检测的血小板数量仍很低(<50×109/L)，且血小板直方图存在曲皱、尾部上翘、拖尾、无拟合曲线等异常，散点图也有异常情况，血涂片显示血小板聚集、巨大血小板、血小板卫星现象等。枸橼酸钠抗凝静脉血和肝素锂抗凝静脉血用仪器法检测的血小板数量都处于正常范围，且血小板直方图图形正常。用手工法计数的毛细血管血小板数量也处于正常范围，并且毛细血管血涂片显示血小板分布正常，血小板2～4个聚集或散在分布，未见明显片状聚集现象。EDTA-K2抗凝血涂片显示，血小板大量聚集，成簇甚至成片，偶见散在在分布。根据上述结果，明确3例均为EDTA-PTCP，详见表1。

表1　　3例患者的血小板检测结果(×109/L)

3讨论

3.1EDTA-PTCP的病理机制EDTA-PTCP的病理机制并不是很明确，目前认为EDTA-PTCP的发生可能与血小板表面存在某种隐匿性抗原有关[4-5]。由于EDTA盐可导致血小板活化，血小板形态发生改变，致使血小板表面某种隐匿性抗原表位构象改变，这些活化的血小板与存在于血浆中的自身抗体结合后，激活了细胞膜中某些能活化血小板纤维蛋白原受体的活性物质，促使血小板与纤维蛋白原聚集成团;也有研究资料表明，EDTA-PTCP是由于EDTA盐抗凝时可诱导血小板互相聚集，堆积发生卫星现象(血小板围绕在单核细胞或淋巴细胞周围呈现卫星现象)[6]，致使全自动血细胞分析仪不能确认血小板而计数偏低[7]。

3.2防范EDTA-PTCP的措施在日常检验工作中，对EDTA 抗凝的标本进行血细胞分析仪计数时出现血小板减少的现象，必须认真查看并分析其血小板直方图，看有无拟合曲线或血小板聚集警告提示，并制作血涂片染色镜检，观察有无血小板聚集成堆或成簇的现象。对于PLT<50×109/L的患者，应及时和临床医生沟通，在了解患者无紫癜且无出血症状与体征，凝血功能正常的情况下，要重新采样复查，并进行不同的方法比对，如末梢血手工稀释计数、枸橼酸钠和肝素抗凝血计数，同时制作血涂片瑞氏染色，显微镜下观察血小板是否有聚集现象，获得准确的实验数据，避免因为EDTA盐作为抗凝剂造成的血小板假性减少的情况。当然，这种情况发生率极低。一旦发生，会给临床医生带来错误指导，就会给患者增加一些临床不必要的检查，甚至出现误诊、误治现象。因此，检验人员一定要有高度的责任心，提高检验质量，避免上述情况的发生。

参考文献

[1]蒋乃，曹改娟．乙二胺四乙酸盐抗凝剂致假性血小板减少1例[J]．解放军医药杂志，2011，23(1):37-39．

[2]张茹，张涛．如何减少乙二胺四乙酸抗凝剂依赖性假性血小板减低[J]．临床误诊误治，2010，23(2):134-135．

[3] 叶英嫒，王毓三，申子瑜．全国临床检验操做规程[M].3 版.南京：东南大学出版社，2006：11.

[4] 周小棉，邹晓． 假性血小板减少症研究进展[J]． 中华检验医学杂志，2007，30(9):1065-1067．

[5] 乐家新，丛玉隆，王海，等． Sysmex XE-2100 血细胞分析仪血涂片复检规则的应用研究[J]． 现代检验医学杂志，2010，25(1):30-36．

[6] Zandecki M,Genevieve F,Gerard J,et al.Spurious counts and spuriousresults on haematoloy analysers:Areview.Part I platelets[J].Int J LabHematol,2007,29(1):14-20.

[7] 宓庆梅,施巍宇,郝婉莹,等.EDTA依赖性血小板减少症1例[J].中华检验杂志,2004,27(7):719-720.

(收稿日期：2015-07-25)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.01.049

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)01-0105-02