外周血维生素D,IL-6水平评价结直肠癌转移预后的应用

刘义华，李　轲，曾　莎，徐　飞，陈双峰，丁　洁

(聊城市人民医院中心实验室，山东聊城 252000)



·论著·

外周血维生素D,IL-6水平评价结直肠癌转移预后的应用

刘义华，李轲，曾莎，徐飞，陈双峰，丁洁△

(聊城市人民医院中心实验室，山东聊城 252000)

摘要:目的研究外周血VD、IL-6评价结直肠癌转移预后的应用。方法病理学证实结直肠癌患者91例，检测外周血VD、IL-6和CEA水平；采用logistic拟合分析其对结直肠癌转移预后评估。结果结直肠癌患者转移组VD(6.63±3.90)低于非转移组(10.05±3.98)，P<0.001；转移组IL-6水平为16.13(10.15～43.80)高于非转移组为8.25(4.66～12.15)，P<0.001；转移组CEA为9.49(2.38～117.34)高于非转移组为2.31(1.42～5.91)，P<0.001。CEA与转移ROC曲线AUC=0.693，P=0.002，灵敏度为71.05，特异度为64.15；VD、IL-6及CEA拟合ROC曲线AUC=0.824，P<0.001，灵敏度为73.68%，特异度为83.25%。结论结直肠癌患者血清VD、IL-6水平与转移预后有关，结合肿瘤抗原检测可作为判断结直肠癌预后的新的、有效的生物学指标。

关键词:维生素D；白介素-6；结直肠癌

全球每年至少有120万人被诊断为结直肠癌，约60万人因此丧生[1]。造成结直肠癌患者死亡的主要原因包括局部复发和远处转移。尽管临床治疗措施不断改进，结直肠癌患者的5年生存率并未得到改观，Ⅳ期病患的5年生存率仅略大于10%[1]。并且约有一半的结直肠癌病患在根治术前已经存在转移[2-3]。因此，监测结直肠癌患者复发转移对于降低死亡率，延长生存期具有重要意义。

维生素D(VD)是结直肠癌发病的影响因素之一。循环中VD水平降低可增加肿瘤侵袭风险[4]，其代谢产物能够参与肿瘤微环境的炎性调控。炎性细胞因子IL-6是调控结直肠癌进展的重要指标，对肿瘤细胞增值有促进作用。本研究旨在通过检测结直肠癌患者VD3、IL-6和癌胚抗原(CEA)水平，探讨其在评价结直肠癌转移预后的应用价值，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料收集本院被确诊为结直肠癌患者连续病例91例，其中男44例，女46例，年龄26～82岁。纳入标准：经病理学确诊的结直肠癌患者，具有完整临床和病理资料；无免疫相关疾病或其他原发肿瘤病史。以本院健康查体人群50例作为对照组，排除自身免疫相关疾病及长期服用激素者。

1.2方法

1.2.1采集健康志愿者及患者空腹静脉血3 mL,3 000 r/min(相对离心力1 600 g)离心5 min，分离血清至-70 ℃贮存。

1.2.2实验室检测血清VD采用25-羟基总维生素D定量测定试剂盒(LIAISON 25-OH Vitamin D TOTAL Assay,DiaSorin Inc,USA)，利用LIAISON化学发光分析仪检测，试剂盒检测范围为4.0～150 ng/mL。Roche Cobas e 601电化学发光仪检测血清IL-6(Roche Diagnostics GmbH，Germany)与CEA(BeckmanCoulter，USA)水平。IL-6检测范围1.5～5 000 pg/mL。CEA检测范围为0.1～1 000.0 ng/mL。

2结果

2.1各组VD、IL-6和CEA检测结果结直肠癌组患者血清VD水平(8.70±4.24)ng/mL低于对照组(23.41±4.11)ng/mL，P<0.001差异具有显著性；结直肠癌组血清IL-6为 9.95 (5.96～22.13)ng/mL高于对照组2.11(1.66～2.52)，P<0.001(图1、表1)；两组年龄、性别均差异均无统计学意义(P>0.05)。其中，转移组患者VD(6.63±3.90)ng/mL低于非转移组(10.05±3.98)ng/mL，P<0.001；转移组患者IL-6水平为16.13(10.15～43.80)ng/mL高于非转移组为8.25(4.66～12.15)ng/mL，P<0.001；转移组CEA水平为9.49(2.38～117.34)ng/mL高于非转移组为2.31(1.42～5.91)，P<0.001(图2、表2)。

图1　　结直肠癌组与对照组VD、IL-6的表达

2.2结直肠癌组CEA、VD及IL-6与发生转移ROC曲线分析：结直肠癌患者CEA与转移的ROC曲线分析，AUC=0.693，P=0.002，灵敏度为71.05%，特异度为64.15%；拟合CEA、VD及IL-6的ROC曲线AUC=0.824，P<0.001(图3)，灵敏度为73.68%，特异度为83.25%。

表1　　结直肠癌组与对照组参数比较分析

图2　　转移组与非转移组VD、IL-6、CEA的表达

项目VDIL6CEA转移组6.63±3.9016.13(10.15～43.80)9.49(2.38～117.34)非转移组10.05±3.988.25(4.66～12.15)2.31(1.42～5.91)P<0.001*<0.001△<0.001△

﹡：t检验,△：Mann-WhitneyU检验。

图3　　VD、IL-6与CEA ROC曲线分析

3讨 论

VD被认为是结直肠癌发病影响因素之一。美国内分泌协会和国家科学院医学研究所(IOM)将25(OH)D3<20 ng/mL和小于10 ng/mL 分别定义为VD不足与缺乏。有报道指出循环血VD水平存在种族差异，并且在亚洲人中表达偏低[5]。我国上海地区调查研究推荐VD正常范围为20～30 ng/mL[6]。流行病学资料显示，与健康人群相比，结直肠癌患者VD水平降低[1]。在本研究中，结直肠癌患者血清VD水平显著低于健康对照组，与既往报道相符，支持低水平VD是结直肠癌的发病因素。

VD还可以影响肠内疾病的预后。Charalampopoulos等[7]对140例结直肠癌病例研究结果表明晚期患者VD水平低于其他期患者。且有研究支持VD较高的结直肠癌患者有较好的预后[8]。本研究结果显示，转移结直肠癌患者血清VD水平显著低于非转移癌患者，支持VD缺乏提示结直肠癌预后不良。VD补充或可作为结直肠癌一级预防重要的一环，同时作为检测指标，评估结直肠癌转移预后具有一定的临床意义。

已有研究证明VD代谢产物在体内可发挥抗增值、促凋亡、抑制肿瘤侵袭与转移等多种生物学作用，并且与炎症关系密切。动物试验发现VD缺乏能够明显加速炎症进展[9]，补充VD与钙剂则可减轻炎症[10]。IL-6是被认为与结直肠癌发生、发展有关的炎性细胞因子。IL-6可以通过STAT3、NF-κB等信号通路发挥抗凋亡作用，还可以通过影响免疫细胞功能，调控炎性相关的结肠癌进展。IL-6 能促进早期癌变细胞增殖与肿瘤生长[11]。并且，肠癌进展期与晚期转移患者外周血IL-6水平升高[12]，提示IL-6 与患者的临床分期、病情进展密切相关。本结果示结直肠癌患者IL-6水平高于健康人，并且在转移结直肠癌患者中IL-6水平更高，支持高水平IL-6与结直肠癌转移有关。

CEA作为广谱的肿瘤标志物被美国国立综合癌症网络(NCCN)指南推荐用于结直肠癌患者诊疗及随访各环节。既往研究报道肠癌的CEA阳性率低于50%[13]。术后结直肠癌患者随访中，出现CEA增高意味着较为严重的复发转移已经存在。单一指标的检测与评估已难以满足临床的需要，寻找高灵敏度、高特异度的评估方法对于监测结直肠癌复发转移非常重要。本研究对以上检测指标进行了拟合分析，CEA、VD、IL-6联合检测对转移的评估优于CEA，提示综合考虑CEA、VD、IL-6对结直肠癌转移预后有较好的评估作用，结直肠癌患者血清VD与IL-6结合CEA抗原检测可作为判断结直肠癌预后的新的、有效的生物学指标。

近年来，早期诊断在某些发达国家的开展使结直肠癌病死率下降[1]。目前我国尚缺乏对结直肠癌病患随访监测的早期、敏感、综合检测指标。在结直肠癌乃至慢性炎性肠病患者诊疗及随访过程中，开展综合多指标的相关检测，对评估结直肠癌复发转移风险，选择适当临床干预，降低结直肠癌病死率具有非常重要的意义。

参考文献

[1]Brenner H,Kloor M,Pox CP,et al.Colorectal cancer[J].Lancet,2014,383(14):1490-1502.

[2]Siegel R,Ward E,Brawley O,et al.Cancer statistics,2011:the impact of eliminating socioeconomic and racial disparities on premature cancer deaths[J].CA Cancer J Clin,2011,61(2):212-236.

[3]Washington MK,Powell AE,Sullivan R,et al.Pathology of rodent models of intestinal cancer:progress report and recommendations[J].Gastroenterology,2013,144(7):705-717.

[4]Perkins GL,Slater ED,Sanders GK,et al.Serum tumor markers[J].Am Fam Physician,2003,68(10):1075-1082.

[5]Fu YT,Chatur N,Cheong-Lee C,et al.Hypovitaminosis D in adults with inflammatory bowel disease:potential role of ethnicity[J].Dig Dis Sci,2012,57(20):2144-2148.

[6]朱汉民,程群,甘洁民,等.上海地区人群维生素D状态研究[J].中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志,2010,31(3):321-323.

[7]Charalampopoulos A,Charalabopoulos A,Batistatou A,et al.Parathormone and 1,25(OH)2D3 but not 25(OH)D3 serum levels,in an inverse correlation,reveal an association with advanced stages of colorectal cancer[J].Clin Exp Med,2010,10(1):69-72.

[8]Tuohimaa P,Pukkala E,Scelo G,et al.Does solar exposure,as indicated by the non-melanoma skin cancers,protect from solid cancers:vitamin D as a possible explanation[J].Eur J Cancer,2007,43(16):1701-1712.

[9]Cantorna MT,Munsick C,Bemiss C,et al.1,25-Dihydroxycholecalciferol prevents and ameliorates symptoms of experimental murine inflammatory bowel disease[J].J Nutr,2000,130(11):2648-2652.

[10]Zhu Y,Mahon BD,Froicu M,et al.Calcium and 1 alpha,25-dihydroxyvitamin D3 target the TNF-alpha pathway to suppress experimental inflammatory bowel disease[J].Eur J Immunol,2005,35(1):217-224.

[11]Tian Y,Ye Y,Gao W,Chen H,et al.Aspirin promotes apoptosis in a murine model of colorectal cancer by mechanisms involving downregulation of IL-6-STAT3 signaling pathway[J].Int J Colorectal Dis,2011,26(1):13-22.

[12]Gamero AM,Young MR,Mentor-Marcel R,et al.STAT2 contributes to promotion of colorectal and skin carcinogenesis[J].Cancer Prev Res (Phila),2010,31(3):495-504.

[13]谢跃文,王强,夏杰,等.肿瘤标志物检测在恶性肿瘤诊断中的应用[J].国际检验医学杂志,2011,32(1):107-109.

Application of peripheral blood vitamin D and IL-6 levels in evaluating metastasis prognosis of colorectal cancer

LiuYihua,LiKe,ZengSha,XuFei,ChenShuangfeng,DingJie△

(DepartmentCentralLaboratory,LiaochengMunicipalPeople′sHospital,Liaocheng,Shandong252000,China)

Abstract:ObjectiveTo study the application of peripheral blood vitamin D(VD) and interleukin-6 (IL-6) levels in the evaluation the metastasis prognosis of colorectal cancer.Methods91 patients with pathologically confirmed colorectal cancer were detected peripheral blood VD,IL-6 and CEA levels.The Logistic fitting analysis was used to evaluate metastasis prognosis of colorectal cancer.ResultsThe VD level in the colorectal cancer metastases group was lower than that in the non-metastasis group[ (6.63 ± 3.90) vs.(10.05±3.98),P<0.001];the IL-6 level in the colorectal cancer metastases group was 16.13 (10.15-43.80),which was higher than 8.25(4.66-12.15) in the non-metastasis group(P<0.001),the CEA level in the metastasis group was 9.49 (2.38-117.34),which was higher than 2.31(1.42-5.91) in the non-metastasis group(P<0.001).CEA and transfer ROC curve AUC=0.693,P=0.002,with the sensitivity of 71.05 and the specificity of 64.15;VD,IL-6 and CEA fitting ROC curve AUC=0.824,P<0.001,with the sensitivity of 73.68 and the specificity of 83.25.ConclusionThe peripheral blood VD and IL-6 levels in the patients with colorectal cancer are associated with metastasis prognosis,which combined with tumor antigen detection can be used as the novel and effective biological indicators for evaluating the prognosis of colorectal cancer.

Key words:vitamin D;interleukin 6;colorectal cancer

(收稿日期：2015-08-10)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.01.030

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)01-0069-03

作者简介：刘义华，男，主管检验师，主要从事肿瘤分子诊断研究。△通讯作者，Email：dingjie0635@163.com。