肾透明细胞癌中Smad3、4和磷酸酶及张力蛋白同源蛋白的表达及意义

姜拥军

(临沂市第三人民医院泌尿外科，山东　临沂　276023)



肾透明细胞癌中Smad3、4和磷酸酶及张力蛋白同源蛋白的表达及意义

姜拥军

(临沂市第三人民医院泌尿外科，山东临沂276023)

摘要〔〕目的检测肾透明细胞癌中Smad蛋白(Smad)3、4和磷酸酶及张力蛋白同源蛋白(PTEN)的表达，观察其临床意义。方法56例肾透明细胞癌患者临床资料及术后标本作为观察组，40例距肿瘤边缘>3 cm的正常肾皮质作为对照组。应用免疫组化方法检测两组中Smad3、4和PTEN的表达。结果两组Smad3、4和PTEN表达阳性率差别均显著。观察组Smad3、4和PTEN表达阳性率与肿瘤最大径、Fuhrman分级密切相关，而与性别、年龄因素无关。相关性分析显示观察组中Smad3和PTEN、Smad4和PTEN间表达均呈正相关性。结论肾透明细胞癌术后组织中Smad3、4和PTEN低表达是促进肿瘤的发生和进展的重要因素。

关键词〔〕肾透明细胞癌；Smad3；Smad4；磷酸酶及张力蛋白同源蛋白(PTEN)

第一作者：姜拥军(1972-)，男，副主任医师，主要从事泌尿系统疾病研究。

肾透明细胞癌病变形成过程中涉及癌基因和抑癌基因的表达失调〔1，2〕。Smad蛋白家族是转化生长因子β信号转导途径中与细胞内信号转导或调节密切相关的重要分子，Smad3和4是家族的重要成员，不仅参与Smad成员形成复合物的功能，还可以进入细胞核内调节目的基因，对肿瘤细胞来说，其减少可以引起细胞的过度增生〔3，4〕。磷酸酶及张力蛋白同源蛋白(PTEN)是一种经典的抑癌基因，其可以通过脱磷酸化作用调节细胞内信号传导的通路，并调节细胞的生长和发育〔5〕。本研究针对肾透明细胞癌中Smad3、4和PTEN的表达进行分析，关注其临床意义。

1资料与方法

1.1一般资料2011年1月至2013年12月我院行肾透明细胞癌手术治疗的患者56例作为观察组，留取临床资料及术后蜡块组织，纳入均经病理医师再次阅片复诊，并符合WHO中的标准。男29例，女27例，年龄45～85岁，平均(61.4±8.9)岁。选择上述患者中距肿瘤边缘>3 cm的正常肾皮质40例作为对照组，男21例，女19例；年龄49～81岁，平均(60.8±8.3)岁。两组一般资料无明显差异。

1.2 Smad3、4和PTEN的检测Smad3、4和PTEN蛋白的检测均应用免疫组化SP法、二氨基联苯胺(DAB)显色，操作均由同一主管技师进行，做好质量控制。

1.3Smad3、4和PTEN结果判读Smad3、4和PTEN均以细胞质中染成棕黄色定为阳性细胞(染色强度为中-重度染色，弱阳性不计为阳性)，选择5个(400倍高倍视野)上皮细胞密集且染色较为明显的区域进行计数，取平均值，以阳性率<10%为阴性，以≥10%为阳性。

1.4统计学方法应用SPSS13.0软件进行χ2检验及线性相关性分析。

2结果

2.1两组Smad3、4和PTEN表达的比较观察组Smad3、4和PTEN阳性率明显低于对照组(P<0.000 1)。见表1。

表1　两组Smad3、4和PTEN阳性表达的比较〔n(%)〕

2.2观察组不同临床特征中Smad3、4和PTEN阳性率的比较观察组中Smad3、4和PTEN表达的阳性率与肿瘤最大径、Fuhrman分级密切相关，而与性别、年龄因素无关。见表2。

表2　观察组不同临床特征中Smad3、4和

2.3观察组中Smad3、4和PTEN的相关性Smad3和PTEN(r=0.45，P=0.043 2)、Smad4和PTEN(r=0.49，P=0.040 7)表达均呈正相关性。

3讨论

引起肾透明细胞癌的发生因素较多，如吸烟、工业生产中接触砷或饮用水中含砷、石棉、镉、有机溶剂等。肿瘤常呈实性，多位于肾皮质，肿瘤与周围肾组织界线较清楚，形成推压式边界和假包膜，弥漫浸润于肾脏者少见。肿瘤含有脂质，呈金黄色或多彩状，部分肿瘤可见囊腔、坏死、出血和钙化。肿瘤细胞形成泡巢状和腺泡状结构，肿瘤由小的薄壁血管构成的网状间隔，泡巢状结构中无腔，内充以淡染的嗜酸性浆液，肿瘤细胞质内有脂质和糖原，使其细胞质变得透明，胞膜清楚。近年来学者关注基因和蛋白表达失调对肾肿瘤的促进作用〔2〕。Smad蛋白家族是近几年发现的蛋白，至少有8种，按结构和功能分为三类：通路限制型、共同介导型和抑制型〔6，7〕。Smad3是通路限制型，是转化生长因子(TGF)β的下游信号转导分子，TGF-β与胞膜上的受体结合后，Smad3蛋白被磷酸化活化，随即与Smad4结合成杂聚体转导入细胞核内，激活靶基因的转录〔8，9〕。PTEN是磷酸酶家族中发现的第一个肿瘤抑制基因，可以对第二信使PIP3有脱磷酸作用〔10，11〕。PTEN能抑制细胞的生长、浸润、迁移和聚集黏附，PTEN与张力蛋白tensin和辅助蛋白auxilin高度同源，而张力蛋白能与肌动蛋白结合形成复合体，与细胞聚集黏附明显关联〔12，13〕。PTEN基因的突变，失去了对细胞生长的负调控，引起肿瘤的生长〔14〕。梁增文等〔15〕通过对肝细胞癌组织中检测Smad3的表达，发现Smad3在肝细胞癌中表达下降，认为其可能是一种抑癌基因，其表达水平的下调可能与肝细胞癌发生的早期事件有关。樊勇等〔16〕通过对肝外胆管癌中Smad4和PTEN的表达进行研究，发现肝外胆管癌中Smad4和PTEN的表达明显低于对照组，且二者具有正相关性，认为Smad4和PTEN在肿瘤中的表达有助于反映肝外胆管癌生物学特性，为预后判断提供参考指标。

本研究提示Smad3、4和PTEN低表达可以促进肾透明细胞癌的发生。Smad3、4的表达下降，在某种程度上失去了TGF-β抑制肿瘤细胞增殖及诱导凋亡的功能，使肿瘤的生长加速〔17〕。PTEN表达下降时，失去对PI3K信号途径的下调作用，有利于三磷酸盐质膜的形成，导致丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)的活性增强，同时增强了对缺氧诱导因子的生成，使血管生成能力增强，也增加了肿瘤的侵袭能力〔18〕。本文提示Smad3、4和PTEN低表达时可以引起肿瘤的生长，肿瘤体积增大。Smad3、4和PTEN低表达是肿瘤进展的重要因素，由于Fuhrman分级被认为与肿瘤的预后有关，因此Smad3、4和PTEN的表达可能与肿瘤的预后有一定的关系。本实验提示Smad3、4和PTEN之间可能有协同作用。三者的协同作用与肿瘤抑制基因对肿瘤细胞的作用有关，也可能与对增殖的影响有关。

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〔2014-12-19修回〕

(编辑苑云杰)

中图分类号〔〕R73〔

文献标识码〕A〔

文章编号〕1005-9202(2016)01-0115-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.01.052