前列腺癌骨转移患者血清白细胞介素-6、-10、转铁蛋白及转移灶中骨形成蛋白的表达变化及意义

郭津津　李英杰　辛璐璐

(沧州市中心医院泌尿外一科,河北　沧州　061000)



前列腺癌骨转移患者血清白细胞介素-6、-10、转铁蛋白及转移灶中骨形成蛋白的表达变化及意义

郭津津李英杰辛璐璐

(沧州市中心医院泌尿外一科,河北沧州061000)

摘要〔〕目的探讨前列腺癌骨转移患者血清中白细胞介素(IL)-6、IL-10、转铁蛋白(sTfR)、骨形成蛋白(BMP)等指标的表达变化及其临床意义。方法选择86例前列腺癌患者作为研究对象，其中发生前列腺癌骨转移的患者有36例(骨转移组)、未发生转移的50例(前列腺癌组)，选取前列腺良性增生患者50例(前列腺增生组)，比较三组患者血清中IL-6、IL-10、sTfR的水平差异，同时分析前列腺癌组织中、转移病灶中BMP6、BMP4及BMP7的表达强度差异。结果骨转移组患者的IL-6、IL-10、sTfR、PSA水平显著高于前列腺癌组和前列腺增生组(P<0.05)；前列腺癌组患者的PSA水平显著高于前列腺良性增生组(P<0.05)。前列腺癌骨转移患者的血清IL-6、IL-10、sTfr值与PSA水平具有显著的相关性，相关系数分别为0.296、0.410、-0.337，P均<0.005。免疫组化染色结果显示：骨转移组患者的BMP6、BMP4、BMP7评分〔(5.13±1.08)、(4.47±0.96)、(4.73±0.92)分〕均显著高于前列腺癌组〔(3.14±0.82)、(2.01±0.57)、(1.89±0.38)分〕(P<0.05)。结论前列腺癌骨转移患者血清IL-6、IL-10、PSA水平显著增高，sTfR值显著降低，并与PSA呈相关性；前列腺癌骨转移患者的转移病灶组织中BMP6、BMP4及BMP7表达显著高于前列腺癌组织中的表达。

关键词〔〕前列腺癌骨转移；白细胞介素-6；转铁蛋白；骨形成蛋白

第一作者：郭津津(1982-)，男，硕士，主治医师，主要从事泌尿系肿瘤的临床治疗研究。

骨转移是影响前列腺癌患者病情进展以及生存率的重要因素，其体内白细胞介素(IL)-6含量与前列腺肿瘤的发生关系密切，通过对肿瘤特异性抗原及肿瘤细胞的增殖水平进行干预，进而影响肿瘤的进展，且与远处转移及分期有关〔1〕。前列腺癌骨转移患者体内IL-10、转铁蛋白(sTfR)以及骨形成蛋白(BMP)等指标也有不同程度改变。本研究探讨IL-6、IL-10、sTfR以及BMP6等指标在前列腺癌骨转移患者中的表达变化及其临床意义。

1材料与方法

1.1一般材料以本院泌尿外科收集的86例前列腺癌患者及50例前列腺良性增生患者作为研究对象，分为骨转移组36例，年龄59～78〔平均(67.24±6.18)〕岁；前列腺癌组(未发生转移)50例，年龄56～79〔平均(66.82±6.47)〕岁；前列腺增生组50例，年龄54～75〔平均(65.18±7.44)〕岁。三组患者的年龄构成无统计学差异(P>0.05)，具有较好的均衡性。

纳入标准：以前列腺穿刺活检结果作为前列腺癌患者的诊断标准，以全身核素骨扫描检查结果作为前列腺癌骨转移诊断依据，以经尿道前列腺切除术(TURP)术后病理结果作为前列腺良性增生的诊断依据。所有患者在标本采集前均未接受放疗或化疗治疗。

排除标准：既往有泌尿系统肿瘤病史及手术史的患者；急性炎症反应期的患者；肝功能异常的患者；具有心、肺、肝、肾功能疾病的患者。

1.2样本采集患者入院后，取清晨空腹肘静脉5 ml，注入到不抗凝试管凝固后，3 000 r/min离心15 min，提取血清放置-70℃保存待测。

1.3检测方法血清IL-6、IL-10、sTfR含量的检测采用ELISA法，按照ELISA试剂盒的操作说明对相应样本进行检测。

采用免疫组化EnVision法对前列腺癌组组织、转移病灶标本中BMP6、BMP4及BMP7的表达强度进行检测：样本用10%甲醛进行固定，并用石蜡进行包埋后切片，平均片厚约2 μm，脱蜡后采用3%双氧水室温下孵育5～10 min，清除内源性的过氧化氢酶活性。蒸馏水清洗3次后置入磷酸盐缓冲液进行浸泡，5 min后置于95℃的环境下，15 min后降至室温进行冷却。将新配制的二氨基联苯胺溶液滴于切片上，显色3 min后置于显微镜下进行观察，蒸馏水充分冲洗后使用苏木紫进行再次染色，脱水后封片。

结果判定标准：细胞质或细胞核着色为棕黄色为阳性，按照着色强度进行分级，无色为0分；淡黄色为1分；棕黄色为2分，褐色为3分；显微镜下着色阳性细胞计数：1%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分；两个得分项目相加为总分。总分：<3分为阴性，3分为弱阳性、4分为阳性，>5分为强阳性。

1.4统计学方法应用SPSS17.0软件。计量资料比较采用单因素方差分析及SNK-q检验、t检验；相关性分析采用Pearson相关分析法。

2结果

2.1三组患者血清IL-6、IL-10、sTfR、PAS水平比较三组的IL-6、IL-10、sTfR、PSA水平比较具有统计学差异(P<0.05)；骨转移组的IL-6、IL-10、sTfR、PSA水平显著高于前列腺癌组和前列腺增生组(P<0.05)；前列腺癌组患者的PSA水平显著高于前列腺良性增生组(P<0.05)。见表1。

2.2骨转移组患者的血清PSA水平与IL-6、IL-10、sTfR检测值的相关性分析前列腺癌骨转移患者的血清IL-6、IL-10、sTfR值与PSA水平具有显著的相关性，相关系数分别为0.296、0.410、-0.337，P均<0.005。

2.3前列腺癌组癌组织中、骨转移组患者转移病灶的BMP6、BMP4、BMP7免疫组化染色结果免疫组化染色结果显示：骨转移组患者的BMP6、BMP4、BMP7评分〔(5.13±1.08)、(4.47±0.96)、(4.73±0.92)分〕均显著高于前列腺癌组〔(3.14±0.82)、(2.01±0.57)、(1.89±0.38)分〕(P<0.05)。见图1。

表1　三组患者IL-6、IL-10、sTfR、PSA检测值比较

与前列腺增生组比较:1)P<0.05，与前列腺癌组比较:2)P<0.05

图1　前列腺癌组、骨转移组患者标本中BMP4、BMP6、BMP7免疫组化检测结果

3讨论

骨转移是影响前列腺癌患者病情进展以及生存率的重要因素，其主要病理学特征为前列腺癌组织同时伴有骨母细胞的活跃增生以及大量溶骨性或混合性的新骨形成〔2〕。普通型前列腺癌在光镜下表现为正常的大腺泡结构消失，变为圆形或卵圆形的小腺体，增生的小腺体可呈瘤样、乳头状的大腺泡结构。腺腔内可见淀粉样小体消失，基底层消失〔3〕。

机体内IL-6含量与前列腺肿瘤的发生关系密切，通过对肿瘤特异性抗原及肿瘤细胞的增殖水平进行干预，进而影响肿瘤的进展，且与远处转移及分期有关，是一种在细胞生成、免疫调节、肿瘤发生和炎症反应中均起到重要作用的细胞因子，其受体异常表达还和多种自身免疫性疾病、多发性骨髓瘤及多种实体肿瘤密切相关〔4〕。肿瘤细胞分泌的IL-6通过两种途径对肿瘤的发生、发展进行调节，一是通过自分泌途径与自身靶细胞的IL-6受体(IL-6R)结合，进而产生作用；二是通过旁分泌途径作用于其他细胞表面的IL-6R而发生生物学效应〔5〕。一旦IL-6 与IL-6R之间的相互协调作用异常，会导致内环境紊乱，进而导致造血、免疫以及内分泌系统功能的紊乱，甚至诱发恶性肿瘤〔6〕。Kobayashi等〔7〕研究显示，在前列腺癌的癌变过程中，IL-10水平和肿瘤分化程度与肿瘤淋巴结、局部与远处转移有关，认为这可能与IL-10通过抑制IL-12和γ-干扰素(IFN-γ)来抑制免疫反应，进而产生免疫抑制、促进肿瘤发生和进展，同时在放疗中导致炎症反应加剧。PSA是目前前列腺癌诊断的主要指标，其敏感度可达93.82%，但由于前列腺癌的早期临床症状并不明显，因此当检测到PSA升高时，已经预示着癌症的发生〔8〕。BMP6作为BMPs家族中的成员，通过BMP6或SMAD途径信号转导并刺激铁调素，进而调节机体内铁的平衡〔9〕。sTfR则可以对前列腺癌骨转移患者的贫血程度进行判断。本研究结果显示，对前列腺癌患者进行IL-6、IL-10、sTfR以及PSA检测可以提高前列腺癌骨转移的早期检出率，进而提高患者的治愈率以及生存率，提高患者的生存质量〔10〕。BMP结合IL-6、IL-10、sTfR值与PSA水平对前列腺病变诊断及预测其发生骨转移的潜能比单个指标更有效。

参考文献4

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2王一惟,郭剑明,王国民.前列腺癌患者骨转移的血清学证据研究进展〔J〕.肿瘤防治研究,2014；41(2):102-6.

3陈巧聪,楼慧玲.前列腺特异性抗原与骨标志物对前列腺癌骨转移患者治疗效果的评价〔J〕.中华老年医学杂志,2014；33(1):62-5.

4李霖,韩晨东.戈舍瑞林联合比卡鲁胺间歇治疗对前列腺癌患者血清VEGF和miR-34a的影响〔J〕.现代仪器与医疗,2014；20(2):45-7,21.

5Nishimori H,Ehata S,Suzuki HI,etal.Prostate cancer cells and bone stromal cells mutually interact with each other through bone morphogenetic protein-mediated signals〔J〕.J Biol Chem,2012；287(24):20037-46.

6朱同华.前列腺癌患者的血清IL-6、性激素和PSA水平的临床评价〔J〕.放射免疫学杂志,2013；26(5):601-3.

7Kobayashi A,Okuda H,Xing F,etal.Bone morphogenetic protein 7 in dormancy and metastasis of prostate cancer stem-like cells in bone〔J〕.J Exp Med,2011；208(13):2641-55.

8朱正.经直肠实时组织超声弹性成像在前列腺癌筛查中的应用〔J〕.现代仪器与医疗,2013；19(6):24-6.

9洪钟亮,毛云锋,徐倩.前列腺癌发生骨转移的研究概况〔J〕.中国临床药理学杂志,2014；30(1):58-60.

10郑润泉,栾兆辉,秦云龙,等.Wnt信号通路在前列腺癌中的研究进展〔J〕.中国老年学杂志,2012；32(16):3579-82.

〔2014-12-17修回〕

(编辑袁左鸣)

通讯作者：李英杰(1964-)，男，主任医师，主要从事泌尿系肿瘤的临床治疗研究。

中图分类号〔〕R739〔

文献标识码〕A〔

文章编号〕1005-9202(2016)01-0109-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.01.049