阿托伐他汀对自身免疫性脑脊髓膜炎大鼠白细胞介素-27和炎性趋化因子5的影响

殷旭华　徐　明　于慧玲　马文娟

(内蒙古医科大学附属医院神经内科，内蒙古　呼和浩特　010050)



阿托伐他汀对自身免疫性脑脊髓膜炎大鼠白细胞介素-27和炎性趋化因子5的影响

殷旭华徐明1于慧玲2马文娟

(内蒙古医科大学附属医院神经内科，内蒙古呼和浩特010050)

摘要〔〕目的探讨阿托伐他汀对自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)大鼠白细胞介素(IL)-27和炎性趋化因子(CCL)5蛋白表达的影响。方法取80只Wistar雄性大鼠(>18 w)随机分为4组(n=20)：对照组、模型组、阿托伐他汀大剂量组(8 mg/kg组)和阿托伐他汀小剂量组(2 mg/kg组)。除对照组，其他3组均采用新鲜豚鼠全脊髓和完全弗氏佐剂(CFA)免疫制备EAE模型，免疫后第2天开始，模型组给予生理盐水灌胃，阿托伐他汀组给予阿托伐他汀不同剂量灌胃，持续治疗21 d，于第22天处死，取脑干和脊髓待测。采用酶联免疫法检测各组脑干、脊髓中IL-27和CCL5蛋白的表达水平。结果与对照组比较，模型组IL-27蛋白水平明显降低、CCL5蛋白水平明显升高(P<0.01)；阿托伐他汀小剂量组IL-27蛋白水平降低、CCL5蛋白水平升高(P<0.01)；阿托伐他汀大剂量组IL-27蛋白水平略降低、CCL5蛋白水平略升高无显著差异(P>0.05)，模型组、阿托伐他汀大、小剂量组间差异显著(P<0.01)。结论阿托伐他汀能够通过上调IL-27蛋白水平、下调CCL5蛋白水平，减轻EAE大鼠发病程度及神经功能损伤，且大剂量作用优于小剂量。

关键词〔〕阿托伐他汀；自身免疫性脑脊髓膜炎；白细胞介素-27；炎性趋化因子

1长春大学特教学院2内蒙古医科大学病理教研室

第一作者：殷旭华(1966-)，女，硕士，主任医师，主要从事神经免疫学研究。

自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)发病机制中炎性反应对其发生、发展有重要意义〔1〕。白细胞介素(IL)-27和炎性趋化因子(CCL)5在自身免疫性疾病和宿主抗感染过程中起着重要作用〔2〕。本实验旨在炎性水平探究阿托伐他汀对EAE大鼠的神经保护作用。

1资料与方法

1.1实验动物及分组从吉林大学白求恩医学部实验动物中心购买80只Wistar雄性大鼠，鼠龄>18 w，体重(500±30)g，豚鼠10只，雌雄不限，平均体重(410±20)g，随机分为4组(n=20)：对照组、模型组、阿托伐他汀大剂量组(8 mg/kg组)和阿托伐他汀小剂量组(2 mg/kg组)。

1.2模型制备〔3〕及实验试剂除对照组，其他3组均采用新鲜豚鼠全脊髓和完全弗氏佐剂(CFA)免疫制备EAE模型，即新鲜豚鼠全脊髓与生理盐水制成50%匀浆液，加上等体积的CFA，按0.5 ml/只注射于大鼠四肢足垫皮下。阿托伐他汀(大连辉瑞制药有限公司, 生产批号为55837001)；CFA购于Sigma公司；IL-27和CCL5蛋白ELISA试剂盒购于南京建成生物有限公司。

1.3给药剂量及给药方式免疫后第2天开始，模型组给予生理盐水灌胃，阿托伐他汀组给予阿托伐他汀不同剂量灌胃(8 mg/kg组和2 mg/kg组)，持续治疗21 d，于第22天处死，取脑干和脊髓待测。

1.4各组脑干、脊髓中IL-27和CCL5蛋白表达水平的检测10%的水合氯醛腹腔麻醉大鼠，取大鼠脑干、脊髓各0.1 g制备成10%的匀浆悬液，采用ELISA检测，操作严格按照试剂盒步骤。

1.5统计学方法采用SPSS16.0统计学软件进行t检验。

2结果

与对照组比较，模型组脑干和脊髓IL-27蛋白水平明显降低、CCL5明显升高(P<0.01)；阿托伐他汀小剂量组脑干和脊髓IL-27蛋白水平降低、CCL5升高(P<0.01)；阿托伐他汀大剂量组脑干和脊髓IL-27蛋白水平略降低、CCL5略升高无显著差异(P>0.05)，模型组、阿托伐他汀大、小剂量组差异显著(P<0.01)，见表1。

表1　各组脑干和脊髓中IL-27及CCL5蛋白

与对照组比较：1)P<0.01；与模型组比较：2)P<0.01；与阿托伐他汀小剂量组比较：3)P<0.01

3讨论

EAE确切病因及发病机制迄今不明，亦无有效治疗药物，它亦是由T细胞介导的发生于中枢神经系统的自身免疫性病〔4〕。IL-27是由T淋巴细胞分泌的炎性因子，在Th1型免疫应答中发挥重要作用，具有促进Th1型反应和减轻炎症的双重作用，在机体抗感染、抗肿瘤及自身免疫性疾病的病理过程中发挥着关键性作用〔5〕。CCL5是Th1介导分化的炎性趋化因子，它能诱导炎性细胞侵入中枢神经系统，从而诱发炎性反应〔6〕。以往研究〔7〕发现，他汀类药物除降脂作用外，还具有免疫调节和抗炎效应，能够调节Th1/Th2细胞的平衡，抑制Th1细胞的增殖。本研究提示阿托伐他汀可以上调IL-27蛋白和下调CCL5蛋白水平的表达，在炎性水平干预EAE病变进程，对中枢神经系统起到保护作用。

参考文献4

1檀国军,徐玉,王秀丽,等.IL-12 和IL-10 与实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠发病的相关性〔J〕.细胞与分子免疫学杂志, 2008;24(10)：1024-6.

2Mascanfroni ID, Yeste A, Vieira SM,etal.IL-27 acts on DCs to suppress the T cell response and autoimmunity by inducing expression of the immunoregulatory molecule CD39〔J〕.Nat Immunol, 2013;14(10)：1054-63.

3徐玉, 刘瑞春, 王颖, 等.Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的建立〔J〕.脑与神经疾病杂志, 2007;15(6)：415-7.

4金世杰,徐俊,黄榕,等.口服耐受防治大鼠实验性自身免疫性脑脊髓膜炎的实验研究〔J〕.岭南急诊医学杂志,2009;14(2)：84-6.

5Moraes AS, Paula RF, Pradella F,etal.The suppressive effect of IL-27 on encephalitogenic Th17 cells induced by multiwalled Carbon nanotubes reduces the severity of experimental autoimmune encephalomyelitis〔J〕.CNS Neurosci Ther,2013;19(9)：682-7.

6Van-Veen T，Nielsen J，Berkhof J，etal.CCL5 and CCR5 genotypes modify clinical，radiological and pathological features of multiple sclerosis〔J〕.J Neuroimmunol,2007;190(1/2)：157-64.

7田广平,石秋艳,张春阳,等.阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠血清TNF-α和IL-10的影响〔J〕.海南医学,2014;25(6)：790-2.

〔2015-03-08修回〕

(编辑苑云杰)

通讯作者：马文娟(1962-)，女，主任医师，主要从事神经免疫学研究。

基金项目：内蒙古自治区自然科学基金(No.2011MS1154)

中图分类号〔〕R392.11〔

文献标识码〕A〔

文章编号〕1005-9202(2016)01-0038-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.01.015