中药制剂中含量悬殊成分的分析方法探讨

高晓筝

中药制剂中含量悬殊成分的分析方法探讨

高晓筝

【摘要】目的分析研究中药制剂中含量悬殊成分的分析方法。方法将柱切换结合程序进样技术成功应用在黄芪注射液含量悬殊成分定量分析，对其定量结果给予分析研究。结果切换时间从0.3～5.0 min时，黄芪甲苷峰面积基本没有变化，然而切换时间≥1.5 min时，杂质峰干扰已经大致消除，考虑缩短分析时间，选择首次切换时间为1.5 min。结论柱切换程序进样技术不但可应用在中药中极性差异较大和含量相差悬殊的不同类成分同时定量分析，而且还适用于中药中性质相近含量悬殊的同类成分的定量分析。

【关键词】中药制剂；含量；悬殊成分；分析方法

Objective To analyze and study the methods for the analysis of the content of the great disparity in traditional Chinese medicine preparations.Methods The column switching technique was successfully applied to the quantitative analysis of the content of Astragalus injection.The quantitative results were analyzed and studied.Results For the switching time from 0.3 to 5 minutes，there was almost no change in peak area of astragaloside.However，switching time was more than or equal to 1.5 min，interference of impurity peak had been largely eliminated，consider shortening analysis time，first switching time for 1.5 minutes.Conclusion Column switching procedure into the technology not only can be application in traditional Chinese medicine in different polarity and content of great disparity of different kinds of components and quantitative analysis，but also can be used in traditional Chinese medicine in similar nature there is a big gap between the content of congener composition for quantitative analysis.

【Key words】Chinese medicine，Content，Disparity component，Analysis methods

现如今，中药制剂的质控手段大部分测定药方中的主药某种或者几种高含量的有效成分或者指标性成分，然而不能客观的反映中药制剂的内在质量。故要在发展悬殊成分的同时还可以定量分析新的技术，需要建立一个可以反映多种含量悬殊有效成分的中药制剂质量标准［1］。

1　实验部分

1.1仪器与试剂

Agilent1100型高效液相色谱仪以及METTLERAE240型电子天平。另外，黄芪甲苷对照品、黄芪皂苷Ⅱ、异黄芪皂苷Ⅱ对照品；黄芪注射液；乙腈；甲酸以及超纯水。

1.2色谱条件

预处理柱：AgilentSB-C18预柱；预处理流动相；分析流动相；进样程序以及进样量［2］。

1.3样品制备

1.3.1对照品储备液的制备选取黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅱ、异黄芪皂苷Ⅱ对照品分别适量，精密称定，加入甲醇溶解，同时稀释成为每1 ml含黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅱ、异黄芪皂苷Ⅱ分别为1.97、0.119、0.102 mg的储备液［3］。

1.3.2供试品溶液制备选取黄芪注射液直接进样分析。

1.4实验方法

本文采取程序进样，首次进样时柱切换装置处在与预处理柱连接的一个状态，吸取“供试品溶液”进样10μl，样品进入预处理柱，黄酮类等大极性化合物被三分之一乙腈洗脱流入到废液中，黄芪皂苷类成分保留在预处理柱上，1.5 min后，柱切换装置切换成为与分析柱连接的一个状态，分析流动相将保留在预处理柱上的黄芪皂苷类组分反冲一直到分析柱中给予分离。进入第二次进样程序，吸取“供试品溶液”100μl循环进样三次，样品达到预处理柱，黄酮类等大极性物质以及黄芪甲苷被三分之一乙腈洗脱流入废液系统中，19.4 min后，分析流动相把富集在预处理柱上的某些成分反冲至分析柱中，在分析柱上被分析流动相分离检测，27.4 min后柱切换装置切换成某一状态，预处理柱以乙睛进行冲洗活化［4］。

2　结果

2.1第一次进样柱切换时间优化

切换时间≥1.5 min时，杂质峰干扰已经大致消除，考虑缩短分析时间，选择首次切换时间为1.5 min。

2.2第二次进样预处理流动相中乙腈比例

当乙腈比例为25%时，样品中的强极性成分以及黄芪甲苷残留在预处理柱中，流入分析柱中形成相对比较大的平头干扰峰。当乙腈比例在30%时，黄芪皂苷Ⅱ、异黄芪皂苷Ⅱ峰面积与25%的乙腈洗脱条件之下的峰面积没有任何变化，可是当乙腈比例≥35%时，黄芪皂苷Ⅱ、异黄芪皂苷Ⅱ将没有办法保留在预处理柱中，进而达不到富集的目的。

2.3第二次进样预处理流动相中乙腈洗脱时间

黄芪甲苷峰面积当洗脱时间在7 min时，黄芪皂苷Ⅱ开始从预处理柱中被洗脱，峰面积逐渐开始变小，因此，选择乙腈冲洗时间为6 min。

3　讨论

虽然中药独到的防病治病效果得到大家的一致认可，可是中药材种类相对较为繁多、加工炮制以及产地等相关因素的影响，对中药的有效性以及安全性带来较大影响［5］。

根据相关实践研究表明［6］，柱切换高效液相色谱技术在初期就已经开展应用，属于一种在线固相分离技术，经常选择使用3～5 cm的预处理柱，采取低溶剂强度的预处理流动相，使生物样品净化以及富集。另外，分析流动相将组分带入到分析柱分离进行测定，测定完毕以后仪器会自动恢复开始状态，准备下一次进样［7］。本文笔者针对黄芪注射液给予柱切换程序进样技术在含量悬殊成分中药制剂定量分析中的应用研究，其验证了这种技术应用于中药复杂体系中浓度相差悬殊成分含量联合测定的可行性，进而为成分含量悬殊的中药制剂提供一个全新的途径［8］。

本文结果显示，切换时间从0.3～5 min时，黄芪甲苷峰面积基本没有变化，然而切换时间≥1.5 min时，杂质峰干扰已经大致消除，考虑缩短分析时间，选择首次切换时间为1.5 min，与上述相关实践研究结果基本相同。

综上所述，柱切换程序进样技术不但可应用在中药中极性差异较大和含量相差悬殊的不同类成分同时定量分析，还适用于中药中性质相近含量悬殊的同类成分的定量分析。

参考文献

［1］赵新锋，祝忠民，刘爱芳，等.柱切换法在复方丹参滴丸中丹参素药代动力学研究中的应用［J］.中成药，2004，26（6）：490-492.

［2］彭建梅，王世祥，谢巧娥.柱切换色谱法测定丹参注射液中隐丹参酮的含量［J］.中国医院药学杂志，2006，26（1）：47-48.

［3］裴渭静，赵新锋，胡震，等.采用柱切换色谱离子阱质谱联用法研究复方丹参滴丸中丹参素及其代谢产物［J］.分析化学，2005，33（4）：505-508.

［4］张曾子，姚平经，邹汉法，等.双柱切换色谱制备系统设计和实现［J］.分析化学，2001，29（11）：1353-1356.

［5］叶利民，李章万，陈聪.高效液相色谱柱切换系统中系统峰受色谱条件的影响及其干扰的避免［J］.色谱，2004，22（2）：182.

［6］代彩芹，袁杰.高效液相色谱法测定复方丹参注射液中丹参素的含量［J］.解放军药学学报，2000，16（5）：277-278.

［7］蔡梅，季一兵，骆雪芳，等.高效液相色谱法测定香丹注射液中丹参素和原儿茶醛的含量［J］.海峡药学，2004，16（3）：54-55.

［8］偶志红，徐丹丹，郭薇.薄层层析一紫外分光光度法测定香丹注射液中原儿茶醛的含量［J］.中华医学研究杂志，2005，5（10）：974-976.

【中图分类号】R286

【文献标识码】A

【文章编号】1674-9316（2016）11-0155-02

doi：10.3969/j.issn.1674-9316.2016.11.105

作者单位：福建省漳州市皮肤病防治院制剂室，福建漳州363000

Discussion on the Analysis Methods of Content Disparity in Chinese Medicinal Preparation

GAO Xiaozheng Drug Manufacturing Room，Zhangzhou Skin Disease Prevention and Treatment Hospital，Zhangzhou Fujian 363000，China

【Abstract】