方 丽,王连平,王汉荣(浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所,浙江杭州 310021)
一种为害温郁金的新病害温郁金枯萎病
方丽,王连平,王汉荣*
(浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所,浙江杭州 310021)
近年来,在温州瑞安的温郁金基地中发生了一种严重的枯萎病害——温郁金枯萎病。该病害引起温郁金叶片枯黄,植株大量枯死,块茎腐烂,造成约20%~50%的产量损失,严重的致使温郁金整株死亡。经研究发现,该病害是由茄科劳尔氏菌侵染引起的。
温郁金;新病害;温郁金枯萎病;劳尔氏菌
文献著录格式:方丽,王连平,王汉荣.一种为害温郁金的新病害温郁金枯萎病[J].浙江农业科学,2016,57(7):985-986.
温郁金为姜科植物,是一种经济价值较高的中药材,主产区在温州瑞安一带。《中国药典》记载,温郁金性寒,味苦,辛,归肝、胆、心经。具有活血止痛,行气化瘀,清心解郁,利胆退黄等功效,为著名的中药“浙八味之一”,在中医临床治疗中有较广泛的应用。现代临床研究发现,温郁金块茎富含倍半萜烯醇类、生物碱和姜黄素类物质,对多种肿瘤细胞具有抑制及促进凋亡的作用[1-3]。2013年7月,在温州瑞安的温郁金产地出现了一种枯萎病。该病最初引起植株叶片失水状萎蔫,叶脉黄化,最后整个植株黄化枯萎,地下块茎腐烂。该病不仅严重挫伤农户发展温郁金的积极性,阻碍浙江温郁金产业的持续快速发展,而且也严重影响农民增收和农业增效。因此,必须尽快探寻温郁金枯萎病的防治药剂及其综合治理技术,遏制温郁金枯萎病的扩展蔓延,保障温郁金产业的持续稳定发展。
1.1病害标样采集
温郁金枯萎病病样采集于温州瑞安的温郁金基地;采样后将标样置于保鲜袋带回实验室分离,待用。
1.2病害症状观察
在田间系统地对自然病株和人工接种病株的症状进行观察记录。
1.3病原菌的分离和培养
分别对十几个温郁金的叶片、茎部和块茎病样用PSA、Richard、Czapek、NA等培养基进行常规组织分离和划线分离、纯化。获得分离自温郁金的茎部单胞菌株,编号为W-J-025,在TZC上28℃培养2 d,记录菌落形态、颜色。
1.4病原菌的生理小种鉴定
盆栽的茄子、番茄、烟草、温郁金和马铃薯等小苗,于温室内(20~28℃)种植2周后,用温郁金枯萎病病原分离物对小苗进行伤口接种,在XT5401-CD275TJH智能生物人工气候箱内,温度25℃、相对湿度98%以上、光照12 h黑暗12 h情况下,保湿培养,以健康的植株为对照,重复3次,每天定时观察记录发病情况,分析分离物的生理小种类型。
2.1田间症状
4月中下旬温郁金出土后就逐渐开始出现病症,初发病植株叶片呈轻微缺水状萎蔫,失去光泽,叶尖、叶缘或叶脉间微微发黄;随着叶片的不断抽生,发病叶片不断增多,症状也不断加重,上部叶片缺水状萎蔫明显,下部叶片的着生角度变大,叶片向叶背反卷,中脉渐渐黄化,叶缘、叶尖,或叶面随机出现不规则黄斑;随着病情加重,叶片黄化加重加深,叶面、叶缘,或叶尖出现枯死斑,有时病斑枯死前呈水渍状,直至整叶枯黄,整个植株叶片自下而上地枯黄,最后整株黄化枯死;死后茎基部、块茎常常腐烂。有时发病叶片呈现水浸状、青褐色的急性枯死。
2.2病原菌的分离及培养性状
对十几个温郁金的叶片、茎部和块茎病样进行画线分离和组织分离,叶片病样上获得3个真菌分离物和8个细菌分离物,茎部获得1个真菌分离物和4个细菌分离物,块茎病样上获得12个细菌分离物。经柯赫法则证明真菌为非致病菌;在获得的24个细菌分离物中,茎部和块茎部分分离获得的8个菌株为致病菌。选择编号为W-J-025的病原菌作为典型菌株,置于25℃NA培养基上培养,保存备用。该菌株的革兰氏染色反应阴性,菌体杆状,具1~3根极鞭毛,能游动,好气性,不产生芽孢。在NA培养基上于28℃生长3 d,菌落灰白至暗褐色,平滑有光泽,湿润而呈黏液状,直径2~3 mm。在KMB培养基上不产生荧光色素。在TZC培养基上菌落初为白色,以后中央出现红色小点,菌落红色小点外的白边大小因菌株不同而不同。
2.3病原菌的生理小种
将分离自温郁金的3个代表菌株W-J-004、WJ-025、W-K-006和对照菌株S-1接种于茄子、番茄、烟草、温郁金、马铃薯等幼苗,15 d后调查发现:分离自温郁金的3个代表菌株均可侵染温郁金;W-J-025、W-K-006对茄子的致病力较强,对马铃薯有微弱的致病力;W-J-004能够侵染番茄,而对茄子的致病力弱;3个菌株均不能侵染烟草。对照菌株S-1能侵染除温郁金以外的其他4种植物,其中,对茄科植物茄子、番茄、烟草具有较强的致病力,对马铃薯的致病力较弱。根据邹阳等[4]的青枯劳尔氏菌生理小种划分标准,3个代表菌株W-J-004、W-J-025、W-K-006应属于茄科劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)4号生理小种。
茄科劳尔氏菌引起的温郁金枯萎病害,是近年来温郁金产区最严重的病害,对瑞安地区温郁金产业造成了严重的影响。研究并鉴定温郁金枯萎病的病原,是提供安全有效的病害防治措施的基础,同时也可防止农户盲目过量的用药,促进中药材产业的健康发展。
[1] 何必立,吕宾,徐毅,等.温郁金对胃癌细胞的抑制作用及其对血管内皮生长因子表达的影响[J].中医药学刊,2006,24(9):1741-1743.
[2] 王佳林,吕宾,倪桂宝,等.温郁金对VEGF和MVD在人胃癌裸小鼠移植瘤中表达的研究[J].肿瘤,2005,25(1):55-57.
[3] 王佳林,吕宾,倪桂宝,等.温郁金对人胃癌裸鼠移植瘤生长和环氧合酶-2表达的影响[J].胃肠病学,2006,11(5):277-280.
[4] 邹阳,肖崇刚.重庆地区烟草青枯病菌生理小种的初步鉴定[J].烟草科技,2008(5):60-64.
(责任编辑:张才德)
S435
A
0528-9017(2016)07-0985-02
10.16178/j.issn.0528-9017.20160702
2016-05-16
温郁金枯萎成因及关键防控技术研究
方 丽(1978—),女,浙江新昌人,从事经济作物病害研究工作,E-mai1:fl0155@163.com。
王汉荣,研究员,E-mai1:wanghrg@yahoo.com.cn。