血清制备的影响因素

文│王荣华（河南省博爱县动物疫病预防控制中心）

血清制备的影响因素

文│王荣华（河南省博爱县动物疫病预防控制中心）

一、血清异常情况

1.种类。血清样品异常有多种情况：血清有析出，但呈胶冻样；血清有析出，但伴随溶血现象；无血清析出；血清中有沉淀。

2.原因。

（1）血清呈胶冻样的原因。畜禽在刚采食后不久进行采血；采血后静置时间太短即进行离心；采血动物营养过剩，形成脂血。

（2）出现溶血的原因。采血部位消毒液未干即开始采血；采血用注射器未干燥，内壁湿润；采血后未经静置即运送，送检时样品发生剧烈震动；采血后由注射器转入离心管时，未取下针头即快速转移血液。

（3）无血清析出的原因。全血量过少；采血时注射器活塞没有往后拉留出空间致血清无法析出。

（4）血清中有沉淀的原因。血清置37℃下时间太长；血清由室温转入-20℃或由-20℃转入室温时，未经过冷藏并摇匀处理；血清在高于60℃环境下时，球蛋白和白蛋白出现凝结。

二、影响因素

1.采血环节的影响。

在股市中做投资，无需清楚每只股票的走势表现，只要能看清小部分个股的走势就足够了。选出自己能看清的目标盯着这些品种，从中寻找机会就足够了。

（1）采血部位。猪采血部位可选择前腔静脉和耳静脉。但大批量采血时宜选择前腔静脉。

禽采血部位可选择翅膀内侧腋下静脉和心脏。一般选择翅膀内侧腋下静脉采血。在对淘汰禽检测或技能竞赛时多选择心脏采血法。

牛采血部位可选择颈静脉和尾根静脉。奶牛等宜选用尾根静脉采血。

羊采血部位在颈侧静脉。

（2）采血针头。猪前腔静脉采血时因猪大小不同选用不同的针头，体重≤10千克的乳猪宜用9×20毫米针头，10千克＜体重≤30千克的保育猪宜用9×25毫米针头，体重>30千克的育肥猪宜用12×38毫米针头，对种公母猪采血宜用16×50毫米针头。猪耳静脉采血宜用7号针头。其他家畜家禽宜用7号针头。

（3）采血时间。畜禽禁食8小时（空腹）后进行采血，日常多选择在早上或午后采血。

（4）采血编号。对血样进行编号时，多用阿拉伯数字编写。为了避免不同环节实验人员误读，可在编号下统一划横线，如16，若反过来读作91，加横线后为16，则不易混淆。

（5）采血程序。采血后用一次性注射器保存和运送血液样品，先在一次性注射器上给样品编号，采血后把注射器活塞往后拉，预留长度至少为采血量的2倍，再加针头帽，最后针头朝上与地面成30～45度斜放，在室温下静置2～4小时（避免暴晒），待血清自然析出。

采血后也可转注离心管送样，先在离心管上给样品编号，然后把注射器针头取下，沿离心管壁将全血缓慢注入，最后盖紧离心管管帽。

（6）采血量。全血不少于5毫升。析出血清量，畜不少于1毫升，禽不少于0.5～1毫升。

2.送样环节的影响。

（1）全血运输。运送全血样品时一定要轻拿轻放，不要剧烈震动。使用血液样品专用运输箱运送更好。

（2）运输时间。能在6小时内送达实验室的，只需冷藏后运输；不能在6小时内送达的，则要做冷冻处理后，再冷藏运输。

3.实验室环节的影响。

（1）血清析出良好。接收的样品若血清析出良好，可直接将血清转入离心管，按实验室规定程序编号检测。

（2）血清析出较差。接收的样品若血清析出较差或室外气温过低，可放入37℃恒温箱中1小时或25～37℃水浴锅中1小时作预处理，再用离心机1500～2000转/分钟作5分钟离心。

（3）实验室适宜环境。实验室温度应在23℃±2℃，相对湿度40%～70%。

（4）不同材质容器影响。玻璃试管血清析出效果优于塑料离心管。

（5）血清在实验室的保存。若短时间保存， 4℃冷藏即可，时间最多不能超过1个月。若长时间保存, 可在-20℃冷冻保存，忌反复冻融。

点评：首先制定完整的可操作性强的血样采集计划，其次根据检测项目确定采集对象、部位及器械等内容，严格按照计划组织实施血样采集，最后及时运送血样，规范处理，科学保存。按此方法进行实验前采血，能制备出高质量、合规格的血清样品，值得学习借鉴。