中国西南地区200例不孕不育患者支原体感染及药敏分析

周小芳，黄秀英，冯 林，钟白玉，张 恋，沈 柱，翟志芳

中国西南地区200例不孕不育患者支原体感染及药敏分析

周小芳，黄秀英，冯 林，钟白玉，张 恋，沈 柱，翟志芳

[摘要]目的 了解中国西南地区不孕不育患者支原体感染及药敏试验情况，以指导临床进行合理治疗。方法 回顾性分析西南地区200例不孕不育患者的支原体培养鉴定及药敏试验结果。结果 200例患者中支原体阳性168例，阳性率为84%，其中单独解脲支原体感染者114例，阳性率为57%，解脲与人型支原体混合感染54例，阳性率为27%。药敏试验显示支原体对交沙霉素、米诺环素、多烯环素、四环素等抗生素较敏感，敏感率分别为94.6%、89.9%、86.9%、80.9%；而对环丙沙星、红霉素、司帕沙星等耐药率较高。结论 对于不孕不育患者应进行支原体培养及药敏试验，并根据其药敏试验结果进行针对性治疗，这样有利于疾病的治疗和防止耐药菌株的产生。

[关键词]不孕不育；支原体感染；药敏分析

[中图分类号]R711.6；R518.9

[文献标识码]A

[文章编号]1674-1293(2015)05-0324-03

DOI：10.11786/sypfbxzz.1674-1293.20150502

作者简介：周小芳，技师，主要从事皮肤性病学临床检验工作， 翟志芳，E-mail: zhaizf1004@163.com

[Abstract]Objective To investigate Mycoplasma infection and drug sensitivity in infertile patients, so as to guide rational clinical treatment. Methods A retrospective analysis of Mycoplasma infection in 200 cases of infertility from the southwestern region of China was executed, which include culture and identification of Mycoplasma, as well as antimicrobial susceptibility test results. Results Among the total 200 patients, 168 cases confirmed to be Mycoplasma positive, the positive rate was 84%, including simple Uu infection 114 cases(the positive rate was 57%), Ureaplasma and Mycoplasma hominis mixed infection 54 cases(the positive rate was 27%). Drug susceptibility results showed that Mycoplasma was sensitive to josamycin, minocycline, doxycycline and tetracycline antibiotics, the sensitive rates were 94.6%, 89.9%, 86.9% and 80.9% respectively, but resistant to ciprofloxacin, erythromycin and sparfloxacin. Conclusion Mycoplasma culture and drug susceptibility testing should be given to infertile patients, and targeted therapy should be based on the results of drug susceptibility, which will be beneficial to the treatment of the disease and prevent the production of resistant strains.

收稿日期（2015-04-19 修回日期 2015-05-19）

作者单位：400038 重庆，第三军医大学附属西南医院皮肤性病科（周小芳，黄秀英，冯林，钟白玉，张恋，沈柱，翟志芳）

E-mail: 1013745344@qq.com

The study on Mycoplasma infection and drug sensitivity in 200 infertile patients from southwest China

ZHOU Xiao-fang，HUANG Xiu-ying，FENG Lin，et al
Department of Dermatology, Southwest Hospital Affilliated to Third Military Medical University, Chongqing 400038, China

[Key words]Infertility；Infection，Mycoplasma；Drug sensitivity analysis

[J Pract Dermatol, 2015, 8(5):324-326]

近年来不孕不育发病率呈逐步上升趋势，据世界卫生组织预测，不孕不育将成为威胁人类的第三大疾病[1]，其中泌尿生殖道感染是不孕不育人群的一个高危因素，支原体则是影响人类生殖健康的重要病原体之一[2,3]。解脲支原体（Uu）和人型支原体（Mh）与不孕症的关系越来越引起人们的重视。有研究表明，支原体感染造成的不孕不育可达30%～50%，进行支原体检测并给予敏感的药物成为治疗不孕症的重要措施[4]。本文对我国西南地区200例不孕不育患者泌尿生殖道分泌物支原体培养及药敏试验结果进行分析，以探讨不孕不育患者支原体感染及其药敏试验情况，为指导临床合理治疗支原体感染提供依据。

1　资料与方法

1.1 一般资料

2012年5月—2014年6月就诊于我院生殖医学中心，并确诊为不孕不育患者共200例，均来自我国西南地区（含重庆、四川、贵州、云南）。其中男12例，年龄27～49岁；女188例，年龄21～43岁。所有患者均在我院中心实验室行实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测为支原体阳性，经生殖医学中心临床医生给予经验性用药治疗后，PCR检测支原体仍未转阴者。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 女性患者取宫颈分泌物。患者取截石

位，括开阴道充分暴露宫颈口。先用无菌棉拭子擦去宫颈黏液，用另一棉拭子插入宫颈管内1～2 cm，捻转数次取出；男性患者取尿道分泌物或通过前列腺按摩后取前列腺液，用棉拭子将分泌物置于支原体培养基内。1.2.2 操作方法 培养过程按照支原体培养鉴定药敏试剂盒（珠海迪尔生物工程有限公司）操作步骤进行操作。所用试剂均在有效期内。将已取材的拭子接种在支原体培养基中，取100 µl分别加入到微孔测试板的各孔中，再分别加2滴无菌液体石蜡至各孔中，盖上微孔测试盖，置于35～37 ℃恒温培养箱内孵育24～48 h。Uu在20～24 h、Mh在24～48 h观察并记录结果。

1.2.3 结果判断 支原体培养基颜色无改变仍呈黄色为阴性，呈樱桃红色或红色并且透亮清澈为阳性。药敏试验结果判定：两孔均呈黄色为阴性，对该抗生素敏感；下孔呈红色，上孔呈黄色为阳性，对该抗生素中度敏感；两孔均呈红色为阳性，对该抗生素有耐药性。

2　结果

2.1 阳性率

入选的200例PCR检测支原体阳性的不孕不育患者中，经支原体培养确定为Uu、Mh感染者共168例（84%），其中单独Uu感染者114例（57%），单独Mh感染者0例，Uu和Mh混合感染者54例（27%）（表1）。

表1　200例不孕不育患者支原体培养结果 [例(%)]

2.2 药敏试验结果

200例患者的支原体药敏试验结果见表2。从表2可见支原体对交沙霉素、多烯环素、米诺环素、四环素等抗生素较敏感，而对环丙沙星、红霉素、司帕沙星等耐药性较高。支原体对12种抗生素的敏感性从高到低依次为：交沙霉素（94.6%）、米诺环素（89.9%）、多烯环素（86.9%）、四环素（80.9%）、克拉霉素（69.6%）、阿齐霉素（65.5%）、罗红霉素（53%）、红霉素（35.1%）、司帕沙星（20.8%）、左氧沙星（17.3%）、氧氟沙星（16.7%）、环丙沙星（3.6%）。

表2　168株支原体对12种抗生素的体外药敏试验结果 [株（%）]

3　讨论

支原体是一种介于细菌和病毒之间能独立生长的原核微生物，与泌尿生殖系统感染有关的主要是Uu和Mh，引起下生殖道炎症及男女不孕不育症等[3]。支原体与男女的不孕不育症、自然流产率、死胎等临床症状有密切关系[2]。已有研究发现，不孕不育患者夫妇Uu感染率明显高于正常人，该结果提示Mh的感染与不孕不育有密切联系[5]。Uu的感染不仅可引起胚胎发育停止与胎儿生长迟缓，甚至引起死胎。Uu感染可以使男性精液中白细胞增加，活性氧降低，使精子的细胞膜以及DNA损伤，引起精子正常代谢和生理机能受损，进而降低精子浓度和运动能力，影响精子识别卵细胞的能力[6-8]。同时，男性生殖泌尿道感染Uu后可引起女伴子宫内膜和输卵管黏膜等慢性炎症反应，感染也可诱发变态反应和自身免疫反应，它们都可能是引起不孕不育的重要因素[9]。因此，通过支原体检测与药敏试验进而指导合理用药成为治疗不孕不育症的重要措施。本研究中，入选的200例经PCR检测阳性且治疗后PCR仍然阳性

的不孕不育患者中Uu阳性率高达84%，其中单独Uu感染的占67.9%，并发Mh感染的为32.1%，Uu≥104的患者占单独Uu阳性患者的93.9%；Uu+Mh阳性患者中，Uu≥104的患者占94.4%，由此可见治疗Uu感染对于临床不孕不育治疗具有重要意义。

目前，治疗支原体药物已经广泛应用于临床患者，因此支原体的耐药率也在不断升高。至今为止，常用的支原体检测主要有支原体培养、血清学鉴定、基因诊断等。支原体培养鉴定及药敏试验的检测方法稳定性好，特异性高，临床应用广泛。本文200例患者均给予过经验性抗生素治疗，常用的药物为罗红霉素、阿奇霉素或司帕沙星，但其治疗效果欠佳，其中重要的一个原因是产生耐药性。因为支原体缺乏正常的细胞壁结构，包括β-内酰胺类与糖肽类等。抗生素的主要抗菌机制是阻碍微生物细胞壁的形成，因此支原体对它们具有天然耐药性。所以基于这个原因，临床工作中通常将四环素类、大环内酯类和喹诺酮类这3类抗生素作为支原体感染治疗的一线药物[10]。从本文的药敏试验结果看，支原体对交沙霉素、米诺环素、多烯环素、四环素等抗生素较敏感，敏感率分别为94.6%、89.9%、86.9%、80.9%；而对环丙沙星、红霉素、司帕沙星等耐药性较高。早在2004年，我科曾对Uu感染患者进行过药敏试验，结果与此次分析结果基本一致[11]，同时这一结果与国内其他研究结果也大致相符[12-14]。耐药性的产生可能是由于临床上的不合理用药以及支原体自身DNA旋转酶基因结构发生突变而造成药效失去了靶点。本文的研究表明，支原体对于四环素类抗生素具有较高敏感性，但有研究发现，Uu和Mh的基因中携带链球菌耐四环素基因terM，因此支原体有可能对四环素潜在性耐药[15]。因此，临床医生在没有得到药敏试验结果之前，应尽可能给予患者非氟喹诺酮类药物治疗支原体感染。

对于不孕不育患者应常规进行支原体培养及药敏试验[16]，并根据其药敏试验结果进行针对性治疗，避免盲目的应用抗生素，从而造成细菌耐药性的产生。同时，应用抗生素治疗应坚持规律、足量、足疗程的原则，以达到彻底治愈的目的。

【参 考 文 献】

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（本文编辑 耿建丽）