榆林地区妇女HPV感染基因型别分布和相关因素研究

康　伟，高尚风，高燕云，张延玲

(1.西安交通大学医学院第一附属医院妇产科，陕西西安710000；

2.榆林市第一医院，陕西榆林719000)



榆林地区妇女HPV感染基因型别分布和相关因素研究

康伟1，2，高尚风1*，高燕云2，张延玲2

(1.西安交通大学医学院第一附属医院妇产科，陕西西安710000；

2.榆林市第一医院，陕西榆林719000)

摘要：目的探索榆林地区妇女人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)感染基因亚型和影响HPV感染的相关因素。方法选取我院妇科2007-05～2013-05检查的妇女，采用巢式PCR和焦磷酸测序技术检测895例受检者宫颈脱落细胞中HPV分型情况，详细记录受检者一般资料，分析HPV感染的相关危险因素。结果HPV阳性检出率为19.9%，共检出17种HPV亚型，以HPV16亚型检出率最高，HPV阳性感染率在各年龄段分布不同，差异有统计学意义(χ2=16.89，P=0.02)，且随着年龄的增加，HPV感染率增加。未受过高等教育、吸烟、怀孕≥2次、性伴侣包皮过长、宫颈糜烂和宫颈炎症、经济收入≤3000、剖腹产、性生活频率>2次/周HPV感染率高为HPV感染的相关因素。结论HPVDNA基因型别检测可为宫颈癌的早期筛查，降低HPV感染率和宫颈相关疾病提供重要依据。

关键词：人乳头瘤病毒；基因型；相关因素；年龄

宫颈癌严重威胁着全球女性健康，仅次于乳腺癌，是全球第二位女性高发恶性肿瘤[1]。据统计约78%～85%发生在发展中国家[2]。为人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)被证实宫颈癌发病的主要因素之一。研究表明，在已发现的200余种不同的HPV亚型中有50余种高危亚型与女性子宫颈癌的发生密切相关[3-4]。作为宫颈癌的主要致病因素，HPV亚型分布具有地区差异性和种族差异性，对其型别检测具有重要的临床指导意义。本文对我院妇科门诊2007-05～2013-05检查的妇女HPV亚型感染情况及基因型别进行回顾性分析，旨在研究本地区妇女HPV感染情况、型别及相关因素。

1资料与方法

1.1一般资料

选取我院妇科门诊2007-05～2013-05检查的妇女，共计895例，年龄18～65岁，平均44.2±19.8岁，均长期居住在榆林地区，纳入标准：(1)无宫颈手术史；(2)36 h内无性行为；(3)3 d内无阴道用药或阴道冲洗。排除细菌性、霉菌性以及滴虫性阴道炎，处于月经期及妊娠期者。

1.2标本采集

先用窥阴器暴露宫颈，用干棉签擦净宫颈口多余分泌物，用宫颈刷于宫颈口内顺时针轻轻转动3～5圈，收集于装有细胞保存液的洗脱管，送检。

1.3HPV基因型别检测

按陈秀杰[1]等方式进行HPVDNA片段的巢式PCR扩增。(1)采用PCR试剂盒(美国QIAGEN公司)提取宫颈脱落细胞DNA，严格按说明书操作。采用HPV通用引物MY09/11和GP5+/6+进行扩增。每次PCR都设立阳性对照和阴性对照。再用HPV核酸扩增分型检测试剂盒对HPV进行基因分型。(2)焦磷酸测序分型。19种HPV亚型的特异引物序列及单链测序模板的制备按陈秀杰[1]等报道方法进行。采用PyroMarkQ96ID仪进行测序检测。根据测序结果，与已知的19种HPV基因亚型，其中16种高中危亚型HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、cp8304，3种低亚型HPV6、HPV11、HPV43序列比较，读出HPV感染标本的基因型别。

1.4统计学处理

统计分析所有资料采用SPSS 20.0进行分析处理，HPV亚型分布及检出率采用χ2检验，HPV感染影响因素经单因素分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1HPV感染率及各亚型分布

895例中178例(19.9%)样本检测出HPV阳性。19种基因亚型中共检测出17种，未检测出的基因亚型为HPV35和HPV52。在178例HPV阳性标本中，共计219株HPV基因亚型，各亚型分布及检出率见表1。其中高危型HPV16亚型106例、HPV18亚型16例、HPV31亚型8例、HPV33亚型16例、HPV39亚型3例、HPV45亚型4例、HPV51亚型3例、CP8304亚型8例、HPV53亚型9例、HPV56亚型4例、HPV58亚型13例、HPV59亚型4例、HPV66亚型4例、HPV68亚型5例，3种低危型HPV6亚型9例、HPV11亚型4例、HPV43亚型3例。

表1　各HPV亚型分布及检出率比较

*包括多重感染

2.2HPV感染与年龄的关系

HPV各分型在各年龄段间的感染情况见表2。HPV阳性感染率在各年龄段分布不同，差异有统计学意义(χ2=16.89，P=0.02)，且随着年龄的增加，HPV感染率增加。HPV高危型、HPV低危型和多重感染率在各年龄段有差异，差异有统计学意义(χ2=15.02，P=0.03)。不同年龄组高危HPV感染率差异有统计学意义(χ2=49.92，P<0.01)，不同年龄组低危HPV感染率差异无统计学意义(χ2=1.93，P=0.692)，不同年龄组多重HPV感染率无显著性差异(χ2=1.181，P=0.851)。

表2　HPV各亚型在各年龄段的分布[n(%)]

2.3HPV感染单因素分析

HPV感染的相关危险因素单因素分析见表3。未受过高等教育、吸烟、怀孕≥2次、性伴侣包皮过长、宫颈糜烂和宫颈炎症的受检者其HPV感染率高，与相对因素相比具有非常显著性差异(P<0.01)。经济收入≤3000、剖腹产、性生活频率>2次/周的受检者其HPV感染率高，与相对因素相比具有显著性差异(P<0.05)。

表3　HPV感染的相关危险因素单因素分析

3讨论

Hausen于1987年首次提出HPV与宫颈癌发病假设后，经过20多年大量研究证实生殖道HPV的感染与宫颈癌关系密切[5-7]。根据其致病能力的大小HPV可分为高危型和低危型两种，高危型HPV可诱发全身多种部位的癌变，而低危型HPV与性传播疣或尖锐湿疣有关，一般不诱发癌变。不同地区HPV人群的感染率不同，所携带的型别不同，由于HPV感染的蔓延，宫颈病变发病出现年轻化趋势，严重威胁年轻女性的健康与生命，引起国内外学者的高度重视。如果不采取积极的措施，在未来的10年宫颈癌的死亡人数将上升25%[8]。不同HPV亚型的致病性不同，因此，正确对HPV感染筛查及型别检测是预防和控制宫颈病变和对临床指导具有非常重要的指导意义。

HPV亚型分布具有地域性特点，还存在种族和民族差异，各地区和民族的HPV亚型分布存在明显的不同。本文对我地区895例妇女HPV亚型分析结果显示，有178例样本检测出HPV阳性，检出率为19.9%。19种基因亚型中共检测出17种，未检测出的基因亚型为HPV35和HPV52。高危亚型占HPV阳性感染比率由高到低为HPV16、HPV18、HPV33、HPV58、HPV53、HPV31、CP8304、HPV68、HPV66、HPV59、HPV56、HPV45、HPV39、HPV51；低危亚型占HPV阳性感染比率由高到低为HPV6、HPV11、HPV43，与亚洲地区最常见的HPV16，18和33报道一致。从国内统计资料来看，各亚型分布略有区别，山西省为HPV52、HPV58型，潍坊地区为HPV58、HPV33型，沈阳地区为HPV52、HPV58型[2]，提示本地区与本地区与其他地区HPV亚型分布存在地域性差异。

研究证实HPV的感染率与年龄密切相关，侯萌等报道HPV感染随年龄增加呈上升趋势[9]。本研究显示，HPV阳性感染率在各年龄段分布不同，差异有统计学意义(χ2=16.89，P=0.02)，且随着年龄的增加，HPV感染率增加，与有关报道一致。HPV高危型、HPV低危型和多重感染率在各年龄段有差异，差异有统计学意义(χ2=15.02，P=0.03)。不同年龄组高危HPV感染率差异有统计学意义(χ2=49.92，P<0.01)，不同年龄组低危型HPV感染率无显著性差异(χ2=1.93，P=0.692)，不同年龄组多重HPV感染率无显著性差异(χ2=1.181，P=0.851)。另有研究称国外报道HPV感染的高峰年龄是19～29岁，总的HPV感染率偏低，其中高危型HPV感染率也相应少，随着年龄的增长，性生活逐渐活跃，流产、感染几率也逐渐增加[10]。

既往研究表明，吸烟、初次性交年龄、性伴侣数、分娩次数等危险因素与HPV感染相关[11-12]。本研究发现，未受过高等教育、吸烟、怀孕≥2次、性伴侣包皮过长、宫颈糜烂和宫颈炎症、经济收入≤3000、剖腹产、性生活频率>2次/周HPV感染率高，为HPV感染的相关因素。因此，应加强对广大妇女健康宣传，以降低HPV感染率和宫颈癌发病率。

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Analysis of HPV genotypes and related factors of

healthy women in Yulin

KANGWei1,2,GAOShang-feng1*,GAOYan-yun2,ZHANGYan-ling2

(1.Department of obstetrics and gynecology,the First Affiliated Hospital of Xi'an Jiao Tong University

Medical College,Xi'an 710000,China；2.Yulin First Hospital,Yulin 719000,China)

Abstract：Objective To analyze human papillomavirus (HPV) genotypes and related factors of healthy women in Yulin.Methods Cervical exfoliated cells HPV genotypes of 895casse of health examination in hour hospital from May 2007 to May 2013 in our hospital were examined with nest PCR and pyrosequencing methods.Besides,their general information was recorded and HPV infection related factors were analyzed.Results HPV infection positive rate was determined to be 19.9%,and 17 kinds of genotypes were examined,among which HPV 16 was the highest one.In addition,HPV infection positive rate differed in different ages range,with significant difference(X2=16.89,P=0.02) and it goes with age increasing.Having not been to university,smoking,being pregnant≥2 times,sexual partner with redundant prepuce,cervical erosion,cervicite,salary<3000 RMB/month,frequency of sexual activity>2 times/week will lead to high rate of HPV infection(P<0.05 or 0.01) and are all HPV related factors.Conclusion HPV DNA genotyping can provide important reference for HPV screening at early time and decrease the HPV infection rate and cervical disease.

Key words：Human papillomavirus； Genotype； Related factors； Age

[收稿日期2014-06-15；责任编辑赵菊梅]

通讯作者：*高尚凤(1959—)，女，陕西子洲人，教授，主任医师，硕士生导师，西安交通大学医学院第一附属医院妇产科主任。

作者简介：康伟(1975—)，女，陕西清涧人，副主任医师，主要从事宫颈疾病、宫颈液基细胞检查与HPV分型检测研究。

中图分类号：R711.74

文献标识码：A

文章编号：1672-2639(2015)04-0014-04