肺癌组织中SPARC与CD105表达变化及意义

肺癌组织中SPARC与CD105表达变化及意义

郑英娟，张志华，张秀珑，汤建华，张志林，冯平

(河北北方学院附属第一医院，河北张家口075000)

摘要：目的观察富含半胱氨酸酸性分泌蛋白(SPARC)与CD105在肺癌组织中的表达变化，并探讨其临床意义。方法 选择71例肺癌组织、30例癌旁正常肺组织，用免疫组化法检测组织中SPARC阳性表达率，采用CD105单克隆抗体标记血管内皮细胞，计数微血管密度(MVD)。结果 SPARC在肺癌组织中的阳性表达率高于正常肺组织，肺癌组织中CD105标记的MVD高于正常肺组织(P均<0.05)。SPARC阳性表达率、CD105标记的MVD与肺癌的临床分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)。SPARC阳性表达的肺癌组织中MVD高于阴性表达者(P<0.05)。结论 肺癌组织中SPARC、CD105呈高表达，SPARC阳性表达的肺癌组织中MVD高；联合检测SPARC与CD105对判断肺癌的性质及预后有重要意义。

关键词：肺肿瘤；富含半胱氨酸酸性分泌蛋白；CD105；新生血管生成

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.45.024

中图分类号：R734.2 文献标志码：B

收稿日期：(2015-05-02)

通信作者：张志华

新生血管生成是肿瘤生长和转移的基础，肿瘤在生长过程中打破了促血管生成和抑制血管生成各因素间的平衡，以满足其自身血供的需要。肺癌发生、发展和转移均依赖血管生成。富含半胱氨酸酸性分泌蛋白(SPARC)具有抗黏附、抗增殖、抗肿瘤血管生成和调节细胞外基质组成的作用。近年有学者认为，SPARC有抑制肿瘤血管生成的作用。CD105是一种主要表达于新生血管内皮细胞的细胞黏附分子，是更具有特异性的肿瘤新生血管标志物。本研究观察肺癌组织中SPARC及CD105表达情况，探讨二者与肺癌发生发展的关系。

1资料与方法

1.1临床资料收集本院2008～2012年收治的肺癌患者71例，均经病理学检查证实诊断。其中，男51例、女20例，年龄45～73岁、中位年龄59岁。按WHO(2000)肺癌分类标准组织学分级：高分化6例、中分化41例、低分化18例、未分化6例；组织病理学分类：非小细胞肺癌67例(腺癌50例、鳞状上皮细胞癌15例、类癌1例、肉瘤样癌1例)、小细胞癌4例；临床分期：Ⅰ、Ⅱ期41例、Ⅲ、Ⅳ期30例；有淋巴结转移41例、无转移30例。同时收集30例相应癌旁正常肺组织(距肿瘤切缘>5 cm)作为对照组。患者术前均未行放疗、化疗。

1.2SPARC、CD105表达检测正常肺组织及肺癌组织标本均经10%中性甲醛固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片，用免疫组化PV6000法染色。兔抗人SPARC多克隆抗体工作浓度1∶150，鼠抗人CD105单克隆抗体为即用型抗体，严格按说明书操作，以PBS代替一抗作阴性对照，已知阳性切片作阳性对照。每张切片随机选择5个视野进行观察。SPARC阳性表达结果判定：参照文献[1]，根据着色强度及阳性细胞百分比进行评分，两项得分相乘后≥4分为阳性。采用CD105单克隆抗体标记血管内皮细胞，计数微血管密度(MVD)。参照Weinder等[2]方法在低倍镜下扫视整张切片，确定微血管最密集的5个视野，然后在400倍视野下计数所有染色的微血管，取5个视野计数结果的均数为该切片的微血管数。计数时凡呈现单个内皮细胞或内皮细胞群者只要其与邻近的微血管、肿瘤细胞或其他结缔组织分开,就作为1个微血管，但肌层较厚及管腔面积>8个红细胞直径的血管不计数。

1.3统计学方法采用SPSS17.0统计软件。计数资料采用χ2检验。MVD以中位数[M(P25,P75) ]表示，采用Mann-WhitneyU检验及Kruskal-WallisH检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1正常肺组织及肺癌组织中SPARC、CD105表达比较SPARC主要表达于癌细胞周围的间质纤维细胞胞质中，少数表达于胞核，在癌细胞及血管内皮细胞偶见阳性表达，阳性表现为棕黄色弥漫状或颗粒状。SPARC在肺癌组织、正常肺组织中的阳性表达率分别为56.34%(40/71)、20%(6/30)，二者比较，P<0.05。CD105主要表达于肿瘤血管内皮细胞的细胞膜或细胞质，呈棕黄色，排列多不规则，较少形成明显管腔。在大血管不表达，在正常组织中表达极弱或不表达。在肺癌组织、正常组织中MVD分别为11.20(7.80，15.00)个/视野、0.30(0，0.80)个/视野，二者比较，P<0.05。

2.2肺癌组织中SPARC阳性表达、CD105表达与临床病理参数的关系结果见表1。

表1　 肺癌组织中SPARC阳性表达、CD105表达

2.3肺癌组织中SPARC阳性表达与MVD水平的关系SPARC阳性表达者MVD中位数为9.60个/视野，阴性表达者为12.80个/视野，二者比较，P<0.05。

3讨论

肿瘤生长需丰富的血液供应，新生血管生成可为肿瘤提供氧气、营养、促进其生长、转移的细胞因子及转移通道，肿瘤体积迅速增大，发生扩散和转移。肺癌如无新生血管生成来供应营养，肿瘤直径1～2 mm后将不再增长，肿瘤血管的生成机制在不同肿瘤细胞、不同器官生长点可能不同。肿瘤组织MVD是目前衡量新生血管的最主要量化指标。

SPARC是一种富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白，其与胚胎发育、血管生成、细胞更新、组织修复及重塑等均有密切关系。在不同组织不同微环境中，SPARC作用不同。SPARC在结直肠癌[6]、胃癌[7]、胰腺癌[8]、前列腺癌[9]、卵巢癌[10]等肿瘤组织中起抑制作用，在乳腺癌[11]、肝癌[12]等肿瘤组织中起促进作用。但SPARC在肺癌中的作用仍不明确，研究结果不尽相同。本研究结果显示，SPARC主要表达于癌细胞周围的间质纤维细胞胞质中，在临床分期越低、淋巴结无转移的患者中其阳性表达率越高，考虑SPARC主要表达于间质纤维细胞中，有可能起到维持肿瘤微环境的作用，进而抑制肺癌进展。随着肺癌临床分期与淋巴结出现转移时，MVD逐渐增加，而相应的SPARC阳性表达降低，在临床早期、淋巴结无转移时，SPARC表达阳性时，MVD减少。提示肺癌组织中SPARC可能通过抑制新生血管生成来抑制肺癌的进展。

CD105是一种同型二聚体的膜结合糖蛋白，可选择性表达于增殖状态的血管中[3]。在肿瘤新生血管构筑的研究中发现，CD105仅在处于增殖状态的肿瘤组织血管内皮细胞即新生血管内皮细胞上强表达，而在正常组织的血管内皮细胞上无表达或弱表达，CD105可准确反映血管内皮细胞的增殖状态[4]。因此CD105主要标记肿瘤新生血管。本实验结果显示CD105标记的微血管较幼稚，多数微血管仅由1～2个血管内皮细胞组成，个别甚至尚未形成管腔，提示CD105标记的多是刚形成的微血管。而且有研究报道CD105有促进肿瘤血管生成的作用[5]。

综上所述，SPARC在肺癌组织中的高表达可能有抑制肿瘤进展的作用，肺癌组织中SPARC阳性表达者MVD低，联合检测SPARC与CD105对判断肺癌的性质及预后有重要意义。

参考文献：

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