益气解毒法治疗溃疡性结肠炎的抗氧化防御机制研究

赵建勋 李 霞 吴大英

（深圳市龙岗中心医院 广东深圳 518116）

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是一种病因不明确的慢性肠道炎症性疾病，主要临床症状以以腹痛、腹泻、粘液脓血便以及里急后重为主，主要病变为肠黏膜的弥漫性损伤包括充血、糜烂和／或溃疡，常持续不愈或反复发作，为WHO确认的现代难治病。目前其发病机制尚不清楚，研究认为可能与遗传、环境、免疫等因素有关。近年来氧自由基（OFR）损伤在UC发病中的作用逐渐成为研究热点，有证据提示UC肠黏膜中OFR水平明显升高，大量OFR对自身组织产生攻击作用，充当或激活炎性介质，参与并加重了UC肠黏膜炎症的发生、发展，使炎症进一步加重。目前多采用脂质过氧化产物MDA来间接反映OFR水平。SOD是存在于生物体内重要的抗氧化酶系，能有效地催化超氧化自由基分解为H2O和氧分子，从而抑制肠组织中的脂质过氧化反应，稳定细胞膜。因此，SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力。我们现采用中药益气解毒法治疗溃疡性结肠炎，取得良好效果，在此基础上运用现代实验技术检测益气解毒中药联合医药治疗组和西药组治疗UC患者外周血SOD、MDA变化及临床疗效，从而进一步探讨益气解毒法治疗UC的抗氧化防御系统的影响。

1 临床资料

1．1 受试对象及分组：选择就诊于深圳市龙岗中心医院肛肠外科专科门诊的符合纳入标准的溃疡性结肠炎病人，病例收集时间为2012年5月－2014年5月。共收入50例病人，其中治疗组25人（男性15例，女性10例），平均年龄48．3±5．5；对照组25人（男性18例，女性7例），平均年龄47．6±6．1，两组年龄比较差异无统计学意义（t=0．381，P=0．705）。病情程度，治疗组病情轻度2例，中度18例，重度5例；对照组病情轻度3例，中度16例，重度6例，两组病情构成差异无统计学意义（P=0．877）。

1．2 诊断及临床严重程度分级标准：UC诊断及临床严重程度分级参照中华医学会消化病学分会2000年全国炎症性肠病学术研讨会（成都）标准，UC脾虚毒蕴型诊断参考慢性非特异性溃疡性结肠炎中西医结合诊断、辨证和疗效标准（试行方案）［1］。

1．3 纳入标准：符合溃疡性结肠炎诊断，类型包括慢性复发性、慢性持续型、初发型，但不包括爆发型，均为活动期，病情包括轻、中、重度；中医辨证为脾虚湿毒蕴证；年龄18－65岁；女性受试者应在受试期间采取严格的避孕措施，或者已经绝经，或已经绝育；患者自愿签署知情同意。

1．4 材料与方法：治疗组为中西医治疗组（以西药内服并中药内服加中药灌肠），对照组为西药组（单给予西药治疗）。

处方如下：

（1）白头翁方和参苓白术散方加减：①内服方：白头翁12g败酱草15g二花15g连翘12g当归12g枳壳12g桔梗12g陈皮9g木香9g补骨脂15g乌梅12升麻6g炒白术15g炒山药15g山楂12g黄芪24g每日一剂，水煎二次，每次加水1000ml，每次煎取200ml，共取药汁400m1，分2次服，早晚餐后温服，各服200m1，14天为一个疗程。②灌肠方：白头翁15g黄连6g地榆炭12g制乳没各15g黄芩10g木香6g白芨10g煅五倍子15g，将药煎成150ml分两次保留灌肠，每日两次，每次保留2小时，14天为一个疗程。

（2）西药：柳氮磺吡啶1．0每日三次口服，共3个月。

1．5 观察指标及方法

1．5．1 疗效判定标准按文献［1］，完全缓解：临床症状完全消失，结肠镜检查黏膜大致正常。有效：临床症状基本消失，结肠镜检查黏膜轻度炎症或假息肉形成。无效：未达到有效标准。1．5．2 免疫机制相关因子测定：治疗前及治疗后2个月检测SOD及MDA。SOD及MDA检测方法：于清晨空腹抽外周静脉血5ml，4000r／min离心5min，分离血浆，于EP管中－80℃保存，亚硝酸盐法测定血清SOD活力；MDA采用TBA显色法测定。

1．6 统计学处理：统计分析采用SPSS17．0统计软件包进行数据的统计分析，计量资料用均数±标准差表示，组内治疗前后和组间比较计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验。

2 结 果

2．1 临床疗效比较，治疗组总有效率为92%，对照组84%，两组比较有统计学差异（χ2=6．65，P＜0．05，见表1）

表1 两组临床疗效比较 例（%）

2．2 两组患者治疗前、后血清SOD活力及MDA水平变化比较：两组治疗后血清SOD活力均较治疗前有所升高（P＜0．05），而以治疗组升高更为显著；MDA较治疗前均有所下降（P＜0．05），而以治疗组下降更为显著；两组治疗前后差值比较差异有统计学意义（MDA：t=8．539，P＜0．05；SOD：t=3．27，P＜0．05），见表2、3、4。

表2 治疗组与对照组在治疗前、治疗后MDA的比较

表3 治疗组与对照组在治疗前、治疗后SOD的比较

表4 治疗组与对照组在治疗前－治疗后MDA、SOD比较

3 讨 论

近年来，UC的发病机制尚未完全明确，自由基损伤已经成为UC发病的重要机制之一。在生理情况下，为了防御正常生命活动中产生的氧自由基对组织和细胞的损伤，机体建立了一套完整的抗氧化防御系统，如超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、髓过氧化物酶（MPO）等，但当氧自由基形成过量或抗氧化系统消弱，氧自由基可以引起机体的一系列损伤，其中最重要的就是触发细胞膜上的多不饱和脂肪酸过氧化的链式反应，产生丙二醛（MDA）等脂质过氧化物是使组织损害进一步加重［2］。一方面，氧离子除直接导致黏膜细胞脂质过氧化损伤外，还能增加黏膜通透性。另一方面，UC时，结肠黏膜中SOD抗氧化活性下降，使OFR清除减少，也加重了UC的发生［3］。SOD是体内清除OFR，防止OFR致组织、细胞损伤的主要酶系。炎症反应时，NO及OFR等氧自由基大量产生，造成SOD的耗竭，合成减少，组织SOD活力下降。周彦宏等［4］使用具有抗氧化应激作用的药物，以抗氧化物酶SOD和MDA为指标评价疗效，可明显减轻三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的大鼠实验性结肠炎。国外学者对SOD用于防治UC进行了大量的实验研究，Suzuki等［5］发现，卵磷脂－超氧化物歧化酶（lecithinized SOD，PC－SOD）可使UC患者临床症状评分下降。本研究通过中医辨证益气解毒治则，采用白头翁方和参苓白术散方加减联合西药组和西药治疗两组治疗前后SOD活力进行比较，结果表明，联合治疗组较西药组SOD活力升高更为明显，提示使用益气解毒中药可以增强SOD抗氧化活性，具有明显的黏膜保护作用，促进UC患者肠粘膜的恢复。

MDA是OFR触发细胞膜上的多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应的产物，其水平的高低间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度。郝志明等［6］通过观察UC患者血清SOD、MDA水平发现，其血清中MDA浓度显著高于正常对照，由于排除了合并全身其他器官的病变，故MDA升高的来源可归结于肠黏膜，说明UC患者炎症肠黏膜局部存在OFR损伤，MDA可使肠黏膜组织损害进一步加重。本研究结果证实，联合治疗组较西药组能更有效较低UC患者血清MDA水平，从而减轻氧自由基对肠黏膜的损伤。

氧自由基属于中医毒邪范畴，近年运用益气解毒法及相关中药清除氧自由基日益受到重视。实验证明该类药物（黄芪、败酱草等）有提高血清超氧化物歧化酶（SOD）及过氧化氢酶（CAT）的活性作用，有利于氧自由基的清除，从而减轻肠黏膜的损伤［7，8］。谷松等［9］用免疫法建立UC大鼠模型，观察加味四逆散对UC大鼠结肠组织SOD和MDA的影响。结果表明，模型组SOD含量明显降低，MDA含量显著上升，加味四逆汤治疗各组MDA含量明显降低，SOD含量上升，说明加味四逆汤治疗UC的途径之一，可能是清除了炎症发生时增多的氧自由基，间接使肠组织中SOD活性增高，抗氧化能力大大增强而发挥疗效。

本研究通过观察患者血清SOD、MDA水平及临床疗效评价，证实了应用益气解毒法之相关中药联合西药治疗UC患者较单独使用西药可更有效提高SOD活力，增强清除氧自由基能力；降低MDA水平，减轻氧自由基对肠黏膜细胞的损伤；另外可说明益气解毒法中药通过修复抗氧化防御机能，有效改善患者临床症状，从而达到治疗UC的目的。

［1］ 全国炎症性肠病学术会议．溃疡性结肠炎的诊断及疗效标准［J］．中华消化杂志，2000，21（4）：236－237．

［2］ 朱炳喜，吕愈敏．氧自由基在溃疡性结肠炎发病机制中的研究［J］．中华消化内镜杂志，1997，14（2）：111－112．

［3］ Rezaie A，Parker RD，Abdollahi M．Oxidative stress and pathogenesisof inflammatory bowel disease：an epiphenomenon or thecause［J］．Dig Dis Sci，2007，52（9）：2015－2021．

［4］ Zhou YH，Yu JP，Liu YF，et al．Effects of Ginkgo biloba extracton inflammatory mediators（SOD，MDA，TNF－α，NF－κBp65，IL－6）in TNBS－induced colitis in rats［J］．Mediators Inflamm，2006，2006（5）：92642．

［5］ Suzuki Y，Matsumoto T，Okamoto S，et al．A lecithinized superoxidedismutase（PC－SOD）improves ulcerative colitis［J］．ColorectalDis，2008，10（9）：931－934．

［6］ 郝志明，苌新明，王利公，等．溃疡性结肠炎患者血清 MDA及SOD的变化［J］．胃肠病学和肝病学杂志，2002，9（2）：124－125．

［7］ 焦君良，王生茂．溃疡性结肠炎血清免疫学及SOD变化［J］．河北医药，2000，22（7）：497～498．

［8］ 雷载权．中药学［M］．第6版，上海：上海科学技术出版社，1995．76～77，280～281．

［9］ 谷松，关庆增，孙宏伟等．加味四逆散对溃疡性结肠炎肝郁大鼠模型自由基损伤的影响［J］．中医药学刊，2003，21（5）：705－706．