PTEN、Kindlin-2和DcR3在老年结直肠癌的表达及其对预后的判断价值

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PTEN、Kindlin-2和DcR3在老年结直肠癌的表达及其对预后的判断价值

马靖靖刘付宝

(安徽医科大学，安徽合肥230000)

摘要〔〕目的探讨PTEN、Kindlin-2和DcR3在老年结直肠癌的表达及其对预后的判断价值。方法选取80例健康对照者为对照组，80例结直肠癌患者为观察组，应用流式细胞术检测结肠黏膜组织PTEN、Kindlin-2和DcR3蛋白的表达。比较各组PTEN、Kindlin-2和DcR3表达情况及其与结直肠癌患者不同临床特征的关系，PTEN、Kindlin-2和DcR3蛋白表达量与患者生存的关系。结果相比于对照组，观察组PTEN蛋白表达量明显下降(P<0.05)；观察组Kindlin-2蛋白表达量明显上升(P<0.05)；观察组DcR3蛋白表达量明显上升(P<0.05)。PTEN、Kindlin-2和DcR3的表达与结直肠癌的淋巴结转移、Dukes分期及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达密切相关(P<0.05)。结直肠癌患者PTEN(χ2=12.23，P=0.031)，Kindlin-2(χ2=7.23，P=0.042)与DcR3(χ2=14.35，P=0.021)与生存密切相关，PTEN蛋白表达阴性、Kindlin-2蛋白表达阳性、DcR3蛋白表达阳性的患者预后较差。结论结直肠癌中PTEN、Kindlin-2和DcR3异常表达对肿瘤的进展有重要意义，联合检测三者表达可能有助于预后判断。

关键词〔〕结直肠癌；PTEN；Kindlin-2；DcR3

中图分类号〔〕R969.4〔文献标识码〕A〔

基金项目：安徽省自然科学

通讯作者：刘付宝(1968-)，男，博士，主任医师，主要从事普外科疾病研究。

第一作者：马靖靖(1983-)，女，住院医师，主要从事结肠癌研究。

全世界每年新增结直肠癌病例数多为94万，每年死亡人数可达50万人〔1〕。PTEN是新近发现的一种抑癌基因，可通过对细胞的多种调控途径，如生长、增殖、信号转导等方式来实现；Kindlin-2是黏着斑蛋白家族的一员，在多种肿瘤上均高表达，具有调节整合素的作用，可改变细胞间黏附；DcR3作为新近发现的基因，在抗凋亡及免疫功能上都起着重要作用，可通过多种途径影响肿瘤的发生与进展〔2～4〕。本研究观察PTEN、Kindlin-2和DcR3的表达在结直肠癌疾病发生发展的意义，并对预后评估做出判断。

1资料与方法

1.1一般资料①观察组选取2011年3月至2014年5月我院结直肠癌患者80例，其中男50例，女30例；年龄62～75，平均(69.5±7.9)岁。纳入标准：病情符合WHO关于结直肠癌的诊断标准，经影像学检查及临床医师诊断确诊，且随访资料完整。排除术前有放疗及化疗的患者。②对照组选取健康志愿者80例，其中男48例，女32例;年龄63～77岁，平均(68.6±6.9)岁。纳入标准:不存在胃肠道症状并且影像学检查未见异常，心肝肾功能基本正常。两组性别、年龄差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。程序符合本单位的伦理学标准并得到批准，且已得到患者与家属的知情同意。

1.2检测方法PTEN、Kindlin-2和DcR3的检测应用流式细胞术技术。结肠黏膜组织剪碎后制成单细胞悬液，调整细胞浓度为1×106/ml，分别取1 ml，加入PTEN、Kindlin-2和DcR3一抗，避光4℃下孵育30 min。然后加入适量的PBS洗涤，1 500 r/min 4℃ 离心，弃上清，加入一定浓度的PE-IgG二抗100 μl，避光4℃下孵育30 min，然后加入适量的PBS洗涤，1 500 r/min 4℃ 离心，弃上清，每管加入300 μl的PBS重悬，应用美国BC公司的流式细胞仪检测，应用Flowjo软件进行分析处理数据。荧光指数(FI)=(样本蛋白的平均荧光强度-对照样本的平均荧光强度)/ 对照样本的平均荧光强度。

1.3统计学方法应用SPSS17.0统计软件进行t检验。

2结果

2.1各组PTEN、Kindlin-2和DcR3表达的比较相比于对照组，观察组PTEN蛋白表达量明显下降(P<0.05)；Kindlin-2、DcR3蛋白表达量明显上升(P<0.05)；见表1。

2.2PTEN、Kindlin-2和DcR3 与结直肠癌患者不同临床特征的关系PTEN、Kindlin-2和DcR3的表达与结直肠癌的淋巴结转移，Dukes分期及增殖细胞核抗原(PCNA)表达密切相关(P<0.05)；见表2。

2.3PTEN、Kindlin-2和DcR3的表达与生存的关系结直肠癌患者随访8～60个月，经生存分析显示，结直肠癌中PTEN(χ2=12.23，P=0.031)，Kindlin-2(χ2=7.23，P=0.042)，DcR3(χ2=14.35，P=0.021)表达量与结直肠癌患者的生存密切相关，PTEN蛋白表达阴性、Kindlin-2蛋白表达阳性、DcR3蛋白表达阳性的患者预后较差。

组别PTENKindlin-2DcR3观察组0.46±1.091)2.01±1.231)2.09±1.651)对照组1.00±1.211.03±0.981.02±1.71

与对照组比较：1)P<0.05

nPTENKindlin-2DcR3淋巴结转移无451.75±0.211.13±0.511.26±0.23有351.02±0.161)1.96±0.611)1.99±0.221)Dukes分期A+B481.79±1.211.02±0.981.15±0.55C+D321.11±1.191)1.88±0.651)1.68±0.661)PCNA表达〔5〕<25%401.56±0.211.16±0.641.24±0.23≥25%401.02±0.231)1.86±0.681)1.88±0.211)

与不同的临床特征比较:1)P<0.05

3讨论

结直肠癌的发生发展是一个涉及多过程、多基因、多原因累加的繁琐过程，其致病机制至今不明，分子生物系统在结直肠癌的发生及发展中存在着重要作用〔6，7〕。PTEN可通过多种途径抑制肿瘤的发生，如①调节脂质磷酸化酶的活性，使PIP3去磷酸化，从而加快肿瘤的凋亡，抑制肿瘤的生长；②抑制丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等信号传导途径，从而抑制肿瘤细胞的生长分化；③对局部黏着斑激酶及Shc酶的去磷酸化，从而降低肿瘤细胞的迁移，降低肿瘤的浸润、增殖和转移〔8，9〕。Kindlin-2是黏着斑蛋白家族功能最为广泛的一员，其可通过多种途径来影响细胞内的信号转导、迁移、黏附及增殖，其可通过整合素及转化因子的作用位点，影响细胞之间的链接，减弱细胞间的黏附能力〔10〕。DcR3可通过与死亡因子Fas-L特异性结合，从而减弱由线粒体引起的细胞凋亡，促进肿瘤细胞逃避免疫细胞的攻击〔11〕。本研究提示PTEN蛋白表达阴性、Kindlin-2蛋白表达阳性、DcR3蛋白表达阳性的患者预后较差，与相关研究基本吻合〔1，12〕，均提示PTEN、Kindlin-2和DcR3与结直肠癌的发生及发展密切相关，并影响着疾病的转归预后。

4参考文献

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10刘冬，葛勇胜，许戈良，等.Kindlin-2在肝细胞癌中的表达及其与肿瘤血管生成的关系〔J〕.安徽医科大学学报，2014；49(2)：206-9.

11蓝东，钟腾飞，邹龄松，等.膀胱癌中陷阱受体3、Bcl-2与PCNA的联合诊断价值〔J〕.国际医药卫生导报，2014；20(23)：3520-5.

12Stanilov N，Miteva L，Dobreva Z，etal.Colorectal cancer severity and survival in correlation with tumour necrosis factor-alpha〔J〕.Biotechnol Biotechnol Equip，2014；28(5)：911-7.

〔2014-07-11修回〕

(编辑苑云杰)