杜仲叶醇提物对去卵巢大鼠所致骨质疏松的防治作用

杜仲叶醇提物对去卵巢大鼠所致骨质疏松的防治作用

陈立强赵文杰1王振齐亚灵陈玉强杨宇刘振玉

(佳木斯大学，黑龙江佳木斯154007)

摘要〔〕目的观察杜仲叶醇提物对去卵巢大鼠骨质疏松(OP)模型的影响，探究杜仲防治OP的作用机制。方法选取10月龄SD雌性大鼠，制作去卵巢大鼠OP模型，分为假手术组、模型组、阿尔法骨化醇(ALF)组、杜仲叶醇组，并观察各组股骨重量、胫骨抗弯力、血清碱性磷酸酶(ALP)的变化。结果与模型组比较，杜仲叶醇组股骨重量明显增加，胫骨抗弯力增强，ALP含量增高(P<0.05)；与ALF组无明显差异(P>0.05)。结论杜仲叶醇提物通过提高血清ALP含量，增加股骨重量，提高胫骨抗弯力等因素防治OP。

关键词〔〕杜仲；去卵巢；骨质疏松；血清碱性磷酸酶

中图分类号〔〕R683.42〔文献标识码〕A〔

基金项目：黑龙江省卫生厅科研项目(2011-425)；佳木斯大学科研项目(S2010-43)；佳木斯大学研究生科技创新项目(LZZ2014_003)

通讯作者：齐亚灵(1967-)，女，医学博士，教授，博士生导师，主要从事中药抗衰老研究。

1黑龙江省农垦二院

第一作者：陈立强(1979-)，男，实验师，在读硕士，主要从事中药抗衰老研究。

骨质疏松(OP)是一种全身性骨骼疾病；以骨的组织结构出现退化、骨的重量减轻、骨的脆性增加、易发生骨折为特征；其治疗难度大、发病率高〔1〕。机体生理性、退行性的变化导致的OP的发病率随年龄的增长而增加。本研究观察杜仲叶醇提物对去卵巢OP大鼠股骨重量、胫骨抗弯力、血清碱性磷酸酶(ALP)的影响。

1材料与方法

1.1实验动物及主要试剂10月龄SD雌性大鼠(哈尔滨医科大学实验动物中心提供)48只，体重(269.2±18.7)g，自由摄食、饮水。阿尔法骨化醇(ALF)(上海宝曼生物科技有限公司)，杜仲叶(佳木斯市宝泰医药公司)，血清ALP检测试剂盒(艾美捷科技有限公司)。

1.2实验分组与动物模型〔2〕建立将大鼠随机分成4组，每组12只，即假手术组、模型组、ALF组和杜仲叶醇提物组。成功制作去卵巢大鼠所致OP模型，去卵巢大鼠骨量丢失，出现明显的OP特征，模型稳定，可靠〔3〕。水合氯醛(0.3 ml/kg)腹腔注射，麻醉后，无菌环境下打开腹腔，模型组、ALF组及杜仲叶醇组摘除双侧卵巢，假手术组不摘卵巢。关闭腹腔并逐层缝合。青霉素(2万U/只)肌注。

1.3给药方法术后10 d，ALF组：ALF(0.75 μg/10只)灌胃；杜仲叶醇组：杜仲叶醇提物6 g/kg灌胃。假手术和模型组给予等量蒸馏水灌胃。1次/d，持续90 d。治疗结束后颈椎脱臼处死，心脏穿刺抽取0.5~1 ml血液，凝固后10 000 r/min取血清，4℃保存。取股骨、胫骨，剔除骨表面软组织，称重。

1.4胫骨抗弯力测定将大鼠胫骨置推拉力计模具上，自中点处下压，记录胫骨断裂时压力。

1.5ALP活力测定按照试剂盒说明。

1.6统计学方法应用SPSS17.0统计软件进行单因素方差分析，LSD(L)检验。

2结果

2.1各组体重及股骨重量术后各组体重较术前明显增加，与假手术组比较，模型组体重增加尤为显著(P<0.01)，股骨重量明显降低(P<0.01)；与模型组比较，ALF和杜仲叶醇组体重增加不显著，股骨重量有所增高(P<0.05)，见表1。

2.2各组股骨抗弯力检测结果与假手术组比较，模型组抗弯力降低(P<0.05)，ALF组和杜仲叶醇组抗弯力上升(P<0.05)；与模型组比较，ALF和杜仲叶醇组胫骨抗弯曲力显著提高(P<0.01)。ALF组和杜仲叶醇组差异不显著，见表2。

2.3各组ALP检测结果与假手术组比较，模型组血清ALP含量明显降低，ALF与杜仲叶醇组明显增高(P<0.05)，但ALF组和杜仲叶醇组差异不显著。

表1　各组体重与股骨重

与假手术组比较:1)P<0.05，2)P<0.01；与模型组比较:3)P<0.05

表2　各组胫骨抗弯力及血清ALP值

与模型组比较:1)P<0.05，2)P<0.01；与假手术组比较:3)P<0.05

3讨论

随增龄，人体的组织、器官发生退化而导致的OP包括老年性OP和妇女绝经后OP，前者主要与衰老有关，后者主要与雌激素不足有关〔2〕。由于杜仲富含酚酸、木脂素和黄酮类等化学物质，杜仲叶醇提物具有类似性激素作用。本研究说明去卵巢后OP大鼠的骨量逐渐减少，骨强度下降；应用ALF和杜仲叶醇提取物治疗后，可以通过改善骨的质量，有效防治因雌激素降低而导致的骨质丢失，进而改善OP症状。

ALP由成骨细胞产生，当骨受到损伤时，成骨细胞活动增强，致使细胞内的ALP 释放进入血液中，引起血清 ALP 活性增高〔3~6〕。本文结果表明，杜仲叶醇提物防治OP，与提高去卵巢大鼠ALP含量，促进成骨细胞功能活动有关。

综上，杜仲叶醇提物通过提高血清ALP含量，增加股骨重量，提高胫骨抗弯力进而改善骨的质量等因素防治OP，其作用机制有待进一步研究。

4参考文献

1Hubacek JA，Weichetova M，Bohuslavova R，etal.Genetic polymorphisms of TGF-β，PAI-1，and COL1A-1，and determination of bone mineral density in Caucasian females〔J〕.Endoc Regul,2006；40(1)：77-81.

2田茂友，李洪洋.去卵巢大鼠骨质疏松模型研究〔J〕.现代预防医学，2007；34(12)：2239-41.

3刘晓青，崔燎，吴铁，等.人参防治去卵巢大鼠骨丢失生化指标的观察〔J〕.中国老年学杂志，2005；25(3)：299-301.

4陈邹阳.联合检测骨折患者血浆碱性磷酸酶与纤维蛋白原的意义〔J〕.国际检验医学杂志，2012；12(33)：2922-3.

5董华，胡乃武，董清平.骨痛仙胶囊对家兔骨折血清碱性磷酸酶、钙、磷影响的实验研究〔J〕.中医药学报，2003；31(2)：51-2.

6李建明，张英.血清碱性磷酸酶与骨折愈合的相关性分析〔J〕.新疆医学，2014；44(1)：8-10.

〔2013-12-19修回〕

(编辑苑云杰)