黑龙江省3种地榆属药用植物总皂苷的含量测定※

李 丽 孟令锴 张朝立 韩婼伊 李 洁

黑龙江省3种地榆属药用植物总皂苷的含量测定※

李 丽1孟令锴2张朝立2韩婼伊2李 洁1

目的 测定黑龙江省3种地榆属植物总皂苷的含量。方法 以地榆皂苷Ⅰ为对照品，紫外分光光度法在323 nm处测定总皂苷含量。结果 地榆、小白花地榆、垂穗粉花地榆中总皂苷含量分别为6.57%、6.44%、5.38%。结论 该方法速度快、准确、灵敏、重现性好，结果可靠，为系统开发、利用该属药用资源提供了坚实基础。

地榆；小白花地榆；垂穗粉花地榆；总皂苷；含量测定

中药地榆作为药用已有2 000多年的历史，始载于《神农本草经》，具有凉血止血、解毒敛疮的功效[1-2]。黑龙江省地榆属资源主要有地榆（Sanguisorba officinalis L.）、小白花地榆[Sanguisorba parviflora（Maxim.）Takeda]、垂穗粉花地榆（Sanguisorba tenuifolia Fish.ex Link）等物种[3]。地榆主要含有鞣质及皂苷类成分，其所含皂苷类成分能明显促进细胞因子刺激的骨髓细胞体外增殖[4]。黑龙江省地榆属资源丰富，本实验旨对该地区地榆属植物总皂苷成分含量进行测定，为进一步开发利用黑龙江省地榆属植物提供基础。

1 仪器与试剂

地榆皂苷Ⅰ对照品（成都瑞芬思生物科技有限公司生产，批号 101209）；地榆、小白花地榆、垂穗粉花地榆（采于牡丹江市牡丹峰、横道河子及北山风景区，经鉴定分别为蔷薇科地榆属地榆、小白花地榆、垂穗粉花地榆）；紫外可见分光光度计（美国瓦里安公司）。

2 方法与结果

2.1 测量波长的选择 精密称取2 mg已干燥恒重的地榆皂苷Ⅰ对照品，以浓硫酸定容至50 ml，70 ℃水浴40 min，用紫外分光光度计，190～400 nm范围内扫描，该体系在紫外323 nm处有特征吸收峰。

2.2 总皂苷含量测定

2.2.1 对照品溶液配制 精密称取5.02 mg地榆皂苷Ⅰ于25 ml容量瓶中，加浓硫酸定容，超声溶解，置70 ℃水浴加热40 min，冷却至室温，即得。

2.2.2 供试品溶液的配制 精密称取3种地榆药材粉末各250 mg，分别置于50 L烧杯中，各加入25 ml甲醇，超声提取30 min，将滤液浓缩至干后，30%的氨试液15 ml溶解，加入水饱和正丁醇，充分振摇，静置，分层，重复正丁醇萃取操作，合并萃取液，减压浓缩。残渣用适量浓硫酸超声溶解，并转移至100 ml容量瓶中，加浓硫酸定容至刻度，70 ℃水浴40 min，冰水浴中冷却至室温，得3种供试品溶液。

2.2.3 方法学考察

2.2.3.1 标准曲线的建立 精密吸取地榆皂苷Ⅰ对照品储备液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 ml分别置于5 ml容量瓶中，加入浓硫酸稀释定容至刻度，备用。分别精密吸取上述各浓度对照品溶液2 ml，按紫外分光光度法，测定OD323nm（波长323 nm处吸光度值），得线性回归方程：Y=0.048X+0.2977，r=0.9980。线性范围为20.08～160.64 μg/ml。

2.2.3.2 精密度试验 精密吸取对照品储备液（0.0201 mg/ml）2 ml，重复测定6次，测定OD323nm，RSD=0.68%（n=6）。表明仪器精密度良好。

2.2.3.3 对照品稳定性试验 取对照品溶液（0.0201 mg/ml）2 ml，放置0、1、2、4、8 h，测定OD323nm， RSD=0.89%。表明对照品溶液在8 h内稳定。

2.2.3.4 样品重复性试验 取 250 mg小白花地榆药材样品平行5份，照制备供试品溶液方法，测定OD323nm，RSD=1.43%。表明该方法重复性良好。

2.2.3.5 加样回收率试验 精密称取已测知含量的小白花地榆药材样品6份，分别精密加入一定量对照品溶液，按照样品制备与测定方法测定，计算回收率，见表1。

表1 回收率测定结果

结果如表1所示，地榆皂苷Ⅰ的加样回收率为99.13%，RSD值为1.42%，表明该方法的准确度良好。

2.2.3.6 样品测定 精密称取250 mg 3种地榆属药材样品，各测定平行3份，照制备供试品溶液方法制备药材样品溶液，测定OD323nm值，计算各样品平均含量，见表2。

表2 3种地榆属植物总皂苷含量结果

3 讨论

通过对反应温度与反应时间进行优化，发现反应温度为70 ℃、反应时间为40 min时，吸光度不再升高，可得到完全反应。采用紫外分光光度法测定地榆属植物中总皂苷含量，以浓硫酸为显色试剂，反应条件为反应温度70 ℃，反应时间40 min，该方法简便、准确、灵敏、重现性好。测定结果显示，3种野生地榆属植物总皂苷含量中，地榆最高，小白花地榆次之，垂穗粉花地榆最低，此结果可为下一步开发利用地榆属植物提供了理论依据，为黑龙江省野生地榆属资源的开发打下基础。

[1]孙星衍,孙星翼.神农本草经[M].北京∶商务印书馆,2005∶94-94.

[2]沈保安.中国常用中草药[M].合肥∶安徽科学技术出版社,2005∶481-481.

[3]国家中医药管理局.中华本草[M].上海∶上海科学技术出版社, 2009∶2896-2897.

[4]高小平,吴建明,邹文俊,等.地榆促造血作用的有效部位筛选[J].中国天然药物,2006,4(2)∶137-140.

Determination of Total Saponins in Three Medicinal Plants Sanguisorba in Heilongjiang Province

Li Li Meng Lingka Zhang Chaoli Han Ruoyi Li Jie

Objective To determine 3 Sanguisorba saponins content of plants in the Heilongjiang province.Methods Using ziyuglycoside I as standard sample,UV spectrophotometry was applied to the determination of total saponins content in 323 nm.Results The total saponins containing of S. officinalis was 7.57%,The total saponins containing of S.parviflora was 6.44%,The total saponins containing of S.tenuifolia tenuifolia was 5.38%.Conclusion This method is fast,reproducible and reliable results,it lay solid foundation for developing and utilizing medical resource of Sanguisorba.

Sanguisorba officinalis L.;Sanguisorba parviflora(Maxim.)Takeda;Sanguisorba tenuifolia Fish.ex Link; Total saponins;Quantitative Determination

R927.2

A

1673-5846(2015)01-0023-02

1牡丹江医学院附属红旗医院，黑龙江牡丹江 157011

2牡丹江医学院，黑龙江牡丹江 157011

黑龙江省卫生厅科研项目（2013201）；牡丹江医学院科研项目（ZS201307）；黑龙江省大学生创新创业训练计划项目（201410229025）

李丽（1963-），硕士研究生，主任，主治医师。研究方向：年轻急性淋巴细胞白血病治疗临床研究。E-mail：13836309723@163.com

李洁（1982-），硕士研究生，主治医师。研究方向：年轻急性淋巴细胞白血病治疗临床研究。E-mail：mdlbaby@163.com