通信作者:马斌林,男,主任医师,教授,博士生导师,研究方向:乳腺头颈甲状腺肿瘤,E-mail:doveydc@21cn.com。
乳腺浸润性导管癌中PS2的表达及其与ER、PR的关系研究
董朝1, 贺家勇2, 杨乐1, 马斌林1
(1新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺头颈外科, 乌鲁木齐830011;2乌石化职工医院外科, 乌鲁木齐830019)
摘要:目的探讨乳腺浸润性导管癌中雌激素调节蛋白(PS2)的表达及其与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的关系。方法收集新疆医科大学附属肿瘤医院2008-2009年经病理确诊并行外科手术治疗的70例乳腺浸润性导管癌组织石蜡标本,采用免疫组化法检测PS2、ER、PR表达,分析PS2与ER、PR表达及临床病理因素的相关关系。结果PS2、ER、PR阳性表达率分别为37.14%(26/70)、40.00%(28/70)、42.86%(30/70)。PS2在ER阳性和阴性病例中的阳性表达率分别为60.71%(17/28)和21.43%(9/42),两者差异有统计学意义(P<0.05)。PS2在PR阳性和阴性病例中的阳性表达率分别为66.67%(20/30)和15.00%(6/40),两者差异有统计学意义(P<0.05)。患者年龄、月经状态与PS2蛋白表达无明显关系(P>0.05),PS2表达与ER呈正相关(γ-s=0.35,P=0.014),PS2表达与PR呈正相关(γ-s=0.475,P=0.000),PS2表达与患者组织分级及淋巴结转移有关(P<0.05)。结论PS2表达与ER、PR及淋巴结转移状况与组织分级临床因素有关。ER、PR、PS2综合检测对判定乳腺内分泌治疗效果及预后具有重要意义。
关键词:乳腺浸润性导管癌; 雌激素调节蛋白; 雌激素受体; 孕激素受体; 临床相关性
基金项目:新疆医科大学科研创新基金(XJC201270)
作者简介:董朝(1977-),男,硕士,副主任医师,研究方向:乳腺头颈甲状腺肿瘤。
中图分类号:R737.9
doi:10.3969/j.issn.1009-5551.2015.03.024
[收稿日期:2014-05-04]
The research on the expression and the clinical correlation of PS2 and
ER, PR in breast infiltrating ductal carcinoma
DONG Chao1, HE Jiayong2, YANG Le1, MA Binlin1
(1DepartmentofMammary,HeadandNeckSurgery,AffiliatedTumorHospital,
XinjiangMedicalUniversity,Urumuqi830011,China;2DepartmentofSurgery,Staff-worker
HospitalofUrumqiPetrochemicalSubsidiaryChinaNationalPeroleum,Urumqi830019,China)
Abstract:ObjectiveTo study the expression of PS2 and the clinical correlation between PS2 and ER, PR in patients with breast infiltrating ductal carcinoma. MethodsDetect the expression of PS2, ER and PR in 70 cases of samples in patients with breast infiltrating ductal carcinoma by using immunohistochemical method. The clinical relevance of the PS2 with ER, PR and clinical factors were analyzed. ResultsThe positive rates of PS2, ER, PR were 37.14%(26/70), 40.0%(28/70), 42.86%(30/70) respectively. The positive expression rate of PS2 was 60.71%(17/28) for the ER positive group and 21.43%(9/42) for the ER negative group. There were significant differences (P<0.05). The positive rate of PS2 protein in PR positive group and negative group were 66.67%(20/30) and 15.00%(6/40) respectively. The menstrual status and age of patients had no significant effects on the PS2 protein expression (P>0.05). The expression of PS2 protein could be affected by the clinical stages and lymphatic metastasis (P<0.05). ConclusionThe expression of PS2 in breast infiltrating ductal carcinoma was significantly correlated with ER, PR and the pathological factors such as clinical stages and lymph node metastasis status. The comprehensive test of ER, PR, PS2 had great significance in determining the effect of endocrine treatment and prognosis of breast cancer.
Key words: breast infiltrating ductal carcinoma; estrogen receptor; progesterone receptor; clinical significance
乳腺癌是妇女最常见及发病率最高的恶性肿瘤,我国乳腺癌发病人数以每年3%左右的速率增长[1-3]。雌激素受体(estrogen receptor,ER)及孕激素受体(progesterone receptor,PR)对预测肿瘤的治疗效果及判断预后具有指导意义。雌激素调节蛋白(presenilin 2,PS2)是一种富有半胱氨酸的雌激素诱导蛋白,其表达水平对乳腺癌临床内分泌治疗及预测具有指导意义。本研究观察70例乳腺浸润性导管癌组织中PS2、ER和PR的表达情况,为乳腺癌的预后判断及治疗效果评价提供理论依据,现报道如下。
1资料与方法
1.1临床资料收集新疆医科大学附属肿瘤医院2008-2009年经病理确诊并行外科手术治疗的70例乳腺浸润性导管癌患者的临床病理资料,年龄36~78岁,平均(54±7.3)岁。左乳癌37例,右乳癌33例;伴淋巴结转移者23例,无淋巴结转移者47例。按WHO组织学分级标准:I级10例,II级36例,III级24例。纳入标准:患者术前未接受新辅助放化疗及内分泌治疗。排除标准:患者病期较晚,无法行手术治疗,有术前新辅助治疗的患者。石蜡标本均经10%甲醛溶液固定,4 μm常规连续切片,做免疫组织化学染色。另一部分新鲜组织于-70℃低温冰箱内放置保存,做进一步测试分析。
1.2主要仪器及试剂RM-2135型切片机(德国LEICA公司),Olympus BX50显微镜(日本),Pixe LINK 1394 显微摄像仪(美国),BM-II生物细胞包埋机(新安毅达),TrionX-100曲拉通(Amresco),HH-W21-600电热恒温培养箱(上海医用恒温设备厂)。ER、PR、PS2兔抗人单克隆抗体(美国Novus)、DAB染色试剂、苏木素、甲苯胺蓝、1%盐酸酒精等均购自福州迈新生物技术有限公司。
1.3实验方法免疫组织化学染色采用S-P法,经脱蜡水化及抗原修复后将切片置于新鲜配制的3%H-2O-2中浸泡30 min,以灭活内源性过氧化物酶活性,PBS冲洗5 min×3次,滴加10%正常山羊血清,室温下置湿盒内20 min,以中和非特异性反应。滴加一抗溶液(ER、PR、PS2兔抗人单克隆抗体)于切片上, PBS滴加组为对照组,37℃恒温箱内孵育过夜,取出,PBS洗3 min×3次,吸去水分,滴加二抗工作液,于湿盒内37℃孵育25 min。DAB底物显色30 s,苏木素复染30 s,1%盐酸酒精分化3 s,流水冲洗10 min左右,显微镜下观察及照相。
1.4结果判定方法ER、PR阳性判断依据[2]:当尿素酶染色显示细胞核有棕黄色颗粒出现时,即可判断为阳性,PS2阳性染色为细胞浆中有棕黄色颗粒出现,也有可能少量会出现在细胞膜上。细胞比率≤10%为阴性,阳性细胞比率11%~40%为(+),阳性细胞比率41%~70%为(++),阳性细胞比率>70%为(+++),(+)、(++)、(+++)视为阳性。
1.5统计学处理使用SPSS 19.0软件进行统计学分析。组间均数比较采用t检验,组间率的比较用χ2检验,相关分析采用Sperman等级相关系数,以 P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1PS2的表达及其与ER、PR的关系ER阳性表达率为40.0%(28/70),PR阳性表达率为42.86%(30/70),PS2阳性表达率37.14%(26/70)。PS2在ER阳性组织中的阳性表达率为60.71%(17/28),在ER阴性组织中的阳性表达率为21.43%(9/42),两者差异有统计学意义(P<0.05)。PS2在PR阳性组织中的阳性表达率为66.67%(20/30),在PR阴性组织中的阳性表达率为15.00%(6/40),两者差异有统计学意义(P<0.05)。
表1 PS2表达及其与ER、PR的关系/例
2.2PS2蛋白表达与临床因素的关系患者年龄及绝经与否对PS2蛋白表达无明显影响(P>0.05),PS2在组织学分级为I级病例组中阳性表达12例,阳性表达率为44.44%,明显高于III级表达率27.27%(χ2=4.694,P=0.039),PS2表达与淋巴结转移有关,淋巴结转移患者PS2的表达率明显小于无淋巴结转移患者(P<0.05)。PS2表达与ER呈正相关(r-s=0.35,P=0.014),PS2表达与PR呈正相关(r-s=0.475,P=0.000)。
表2 PS2表达与临床病理因素关系/例
3讨论
乳腺癌在欧美国家妇女肿瘤发病率中居第一位,近年我国乳腺癌发病人数呈逐年上升趋势[2,4]。乳腺癌生物学行为的相关研究亟待突破。ER、PR、PS2是作为乳腺癌诊断、治疗及预后的重要预测因子,探讨其在浸润性导管癌中蛋白表达情况,具有重要意义[5-6]。
国内外众多研究已经证实,ER、PR的表达情况能够反映肿瘤对激素的响应[7-8]。ER的阳性表达率能够反映出乳腺癌细胞对雌激素的敏感性和依赖性,ER阳性的乳腺癌预后较好,内分泌治疗更加有效。PR是雌性激素与受体结合诱导产物,PR与ER的表达往往重叠,PR可有效反映ER的状况,是表征ER的亲和力的重要指标。由于ER可能与特异性的激素相结合,从而导致其发生变异,仅采用ER对乳腺癌内分泌治疗效果进行预测效果较差,临床常用ER、PR联合作为乳腺癌内分泌治疗的预测指标。Minckwitz等[9]研究发现,对乳腺癌患者的ER或PR呈阳性组进行内分泌治疗,治疗有效率达到70%,由此可见内分泌情况对于乳腺癌治疗有重要的意义。本研究显示,ER表达阳性率为40.0%(28/70),PR阳性表达率为42.86%(30/70),并且在ER为阳性的患者中,PR多为阳性。
PS2作为一种乳腺癌雌激素诱发蛋白,具有促进细胞能动性、细胞增生/分化等作用[10]。PS2对于乳腺癌具有特异性,是控制乳腺癌细胞转录的关键因素。PS2与ER、PR呈明显正相关性,ER、PR为阳性的组织中,PS2也有较高的表达率。本研究中,ER阳性组织中的阳性表达率为60.71%(17/28),在ER阴性组织中的阳性表达率为21.43%(9/42),阳性表达组织中PS2表达率显著高于ER阴性组织(P<0.05),PS2与ER同为阳性或阴性(PS2++/ER++、PS2+-/ER+-)的表达符合率为71.43%(50/70)。在PR阳性组织中的阳性表达率为66.67%(20/30),在PR阴性组织中的阳性表达率为15.00%(6/40),PS2与PR同为阳性或阴性(PS2++/PR++、PS2+-/PR+-)的表达符合率为77.14%(53/70)。进一步使用Sperman等级相关系数计算结果得出,PS2的表达与ER呈正相关关系(γ-s=0.35,P=0.014),与PR呈正相关关系(γ-s=0.475,P=0.000),表明PS2能够用作对乳腺癌治疗效果的预测及预后评估。
目前,对PS2的表达与月经情况、年龄、肿瘤组织学分级、淋巴结转移等患者临床因素相关性进行的研究结果存在较大争议。本研究中乳腺癌患者是否绝经、年龄因素对PS2蛋白表达没有明显相关性(P>0.05),PS2表达与临床组织分级、淋巴结转移有显著相关性(P<0.05)。肿瘤组织学分级反映的是肿瘤的侵袭能力,对评估肿瘤的分化程度有重要作用。本研究中,PS2表达率随组织学分级的增高而降低,在组织学分级为Ⅰ级者的PS2阳性表达率为44.44%,显著大于乳腺癌Ⅲ级者的表达率(27.27%,P<0.005),结果表明,PS2表达与乳腺癌的侵袭性密切相关。淋巴结转移患者内分泌治疗效果较差,并且患者易早期复发,PS2表达情况可用来预测淋巴结转移情况。本研究显示70例患者中,有32例无淋巴结转移,其中PS2阳性表达19例(59.38%),淋巴结转移患者组织中,PS2阳性表达7例(18.32%),两组差异有统计学意义(P<0.05)。
综上所述,PS2表达与ER、PR呈正相关,并与临床分期和淋巴结转移状况病理因素有关。PS2是检测内分泌治疗效果的一个重要指标,将PS2与其他因素综合分析,能有效地判断患者预后,但PS2不能取代ER、PR,而是对ER、PR的补充。ER、PR、PS2在乳腺癌的发生、进展中可能起了协同作用,综合检测意义较大,一方面可以作为乳腺癌肿瘤发展情况的检测指标;另一方面可用于判定乳腺内分泌治疗效果和预后。
参考文献:
[1]李霓, 郑荣寿, 张思维,等.中国城乡女性乳腺癌发病趋势分析和预测[J]. 中华预防医学杂志, 2012, 46(8):703-707.
[2]郑莹, 吴春晓, 吴凡.中国女性乳腺癌死亡现况和发展趋势[J]. 中华预防医学杂志, 2011, 45(2):150-154.
[3]DeSantis C, Siegel R, Bandi P, et al.Breast cancer statistics, 2011[J]. CA: A Cancer J Clin,2011, 61(6):408-418.
[4]李艳艳, 孙刚, 马斌林.267 例乳腺浸润性导管癌 EGFR, CK5/6 表达分析[J]. 新疆医科大学学报, 2013, 36(3):316-319.
[5]Lialiaris T S, Kouskoukis A, Georgiou G, et al.Expression of 6 common antigenic markers in invasive ductal breast carcinoma:potential clinical implications[J]. Appl Immunohistochemistry Mol Morphol, 2011, 19(2):106-111.
[6]杜江, 董朝, 钟红,等.ER, PR 以及 HER-2 在乳腺癌原发灶及复发灶问表达差异及其临床意义[J]. 新疆医科大学学报, 2013, 36(5):653-655.
[7]Van de Ven S, Smit V, Dekker T, et al.Discordances in ER, PR and HER2 receptors after neoadjuvant chemotherapy in breast cancer[J]. Cancer Treat Rev, 2011, 37(6):422-430.
[8]Caldarella A, Crocetti E, Bianchi S, et al.Female breast cancer status according to ER, PR and HER2 expression:a population based analysis[J]. Pathol Oncol Res,2011, 17(3):753-758.
[9]von Minckwitz G, Du Bois A, Schmidt M, et al.Trastuzumab beyond progression in human epidermal growth factor receptor 2-positive advanced breast cancer:A German Breast Group 26/Breast International Group 03-05 study[J]. J Clin Oncol, 2009, 27(12):1999-2006.
[10]Filipovic' A, Gronau JH, Green AR, et al.Biological and clinical implications of nicastrin expression in invasive breast cancer[J]. Breast Cancer Res Treat,2011, 125(1):43-53.
(本文编辑杨晨晨)