植物提取液对4种食用菌子实体病原物的抑制作用*

王刚正，陈 媛，边银丙

（华中农业大学应用真菌研究所，湖北 武汉 430070）

〈病虫害防治〉

植物提取液对4种食用菌子实体病原物的抑制作用*

王刚正，陈 媛，边银丙**

（华中农业大学应用真菌研究所，湖北 武汉 430070）

将30种市售产品或采集的植物样品进行提取，把植物提取液加入培养基进行抑菌效果实验。对4种病原菌菌丝生长的测定结果表明，在30种供试植物中，大蒜（Allium sativum）提取液对粉红聚端孢霉（Trichothecium roseum）的抑制率达99.1%；蒲公英（Taraxacum mongolicum）提取液对有害疣孢霉（Mycogone perniciosa）抑制率达96.3%；石榴皮（Punica granatum）和龙葵（Solanum nigrum）提取液对蜡蚧轮枝菌（Lecanicillium fungicola）抑制率分别为85.2%和83.5%。但所有植物提取液对真菌轮枝霉（Verticillium fungicola）均无明显的抑制作用（＜40.3%）。

植物提取液；食用菌；子实体病害；抑菌作用

许多食用菌子实体病害经常造成重大的经济损失[1-4]。食用菌子实体生长期短，对化学药剂较敏感，且使用化学农药极易带来农药残留和药害。为此，国内外学者开始探索采用高效安全的植物源农药防治食用菌病害：Sokovic等[5]发现牛至（Origanum vulgare） 精油对双孢蘑菇有害疣孢霉（Mycogonepeiniciosa）和轮枝霉菌（Verticillium fungicola）等具有很好的抑制作用；Thierry R等[2，6]研究表明，百里香（Thymus mongolicus） 精油对有害疣孢霉菌丝生长具有很好的抑制作用。为进一步筛选植物提取液用于食用菌的病害防治，本研究选取30种植物提取液，研究它们对双孢菇的疣孢霉病（Mycogone peini－ciosa）、双孢菇干泡病的真菌轮枝霉（Verticillium fungicola）、鸡腿菇的黑头病（Lecanicillium lecanii）、鸡腿菇菌柄溃疡病的粉红聚端孢霉（Trichothecium roseum）等子实体病害病原菌菌丝生长的抑制作用。

1 材料与方法

1.1植物样品与病原菌菌株来源

30种植物材料均为市售产品或作者采集（表1）。4种引起食用菌子实体病害的病原物包括有害疣

M.perniciosa

Lecanicillium lecanii

V.fungicola

T.roseum

Solanum nigrum

Allium sativum

Allium cepa

Oxalis rubra

Solanum nigrum

表1 供试植物材料及其提取液制备方法Tab.1 Plant materials and methonds preparing extracts in this study

1.2植物提取液的制备方法

将商陆和曼陀罗干燥后的材料称重，加入蒸馏水煮沸，收集上层水煮液；重新加水煮沸，重复3次，合并3次收集的水煮液，将水煮液浓缩至100 mL，制成浓度为1 g·mL-1的水煮液，作为母液备用。将大蒜、龙葵果、洋葱和红花醡浆草以1∶10的比例与蒸馏水混合榨汁，作为母液。其他植物材料参考Shan B[7]和Ghassan Al-Samarrai[8]的方法提取植物活性成分，供试植物样品烘干，并用粉碎机粉碎，过筛，然后与50%乙醇或丙酮或无菌水混匀，水浴，超声波处理1 h，更换浸提液，重复3次，合并3次收集的浸提液，3 000 r·min-1离心10 min；除去废渣，收集上清液[7-8]。采用旋转蒸发仪进行减压浓缩，将上清液浓缩至20 mL，制成浓度为500mg·mL-1的浸提液，作为母液备用。母液4℃保存。

1.3植物提取液室内抑菌效果的测定

采用3种方式，分别将植物提取液与培养基混匀（表1）。采用细菌过滤器（0.22 μm）将提取液过滤，然后与培养基按1∶10混匀；提取液与培养基按1∶10混合，121℃，灭菌30 min；提取液121℃灭菌30 min后，再按1∶10与培养基混匀。每个平皿中加入20 mL混匀培养基，接种6 mm菌丝块，25℃培养，3 d～10 d后测量病原菌菌落生长速度。以加入50%酒精或无菌水到培养基中作为对照。每个处理重复5次。计算不同植物提取液对病原菌的抑制率。所有数据通过Spss17.0分析软件中的新复极差法（Duncan’s Multiple Range）进行差异显著性分析。

2 结果与分析

2.1植物提取液对有害疣孢霉菌丝生长的抑制作用

植物提取液对有害疣孢霉菌丝生长的抑制作用见表2。

表2结果表明，蒲公英提取液对有害疣孢霉（M.perniciosa） 菌丝抑制率达到96.3%，龙葵、花椒、茶、商陆、银杏、石榴皮等植物提取液的抑制作用分别为89.4%、88.7%、84.8%、75.8%、74.8%和70.2%。蒲公英、龙葵、花椒、茶等4种植物提取物抑制率之间没有达到显著差异水平。其他植物提取液对有害疣孢霉抑制率均低于60%。

2.2植物提取液对蜡蚧轮枝菌菌丝生长的抑制作用

植物提取液对蜡蚧轮枝菌菌丝生长的抑制作用见表3。

由表3可见，石榴皮和龙葵提取液对蜡蚧轮枝菌（L.lecanii）抑制作用最好，抑制率分别为85.2%和83.5%，与其他植物提取物抑制率存在显著差异。大蒜、银杏、茶等植物提取液对蜡蚧轮枝菌菌丝生长抑制率分别为64.1%、63.6%和61.6%，其他几种植物提取液抑制率均低于60%，抑制效果则不明显。

2.3植物提取液对粉红聚端孢霉菌丝生长的抑制作用

植物提取液对粉红聚端孢菌丝生长的抑制作用见表4。

表2 植物提取液对有害疣孢霉菌丝生长的抑制作用Tab.2 Inhibition effect of plant extracts on Mycogone perniciosa

表3 植物提取液对蜡蚧轮枝菌菌丝生长的抑制作用Tab.3 Inhibition effect of plant extracts on Lecanicillium lecanii

表4 植物提取液对粉红聚端孢菌丝生长的抑制作用Tab.4 Inhibition effect of plant extracts on Trichothecium roseum

由表4可见，大蒜提取液对粉红聚端孢霉（T. roseum）菌丝的抑制作用最强，抑制率达到99.1%，与其他植物提取物抑制率存在显著差异。朝天椒、银杏抑制作用稍弱，抑制率分别为86.9%和83.4%，但与石榴皮、龙葵和茶叶等植物提取液抑制率亦达到显著差异水平。其他24种植物提取液抑制率均低于74.3%。

2.4植物提取液对真菌轮枝霉菌丝生长的抑制作用

供试的30种植物提取液对真菌轮枝霉（V. fungicola）菌丝生长均无明显的抑制作用。抑制作用最大的是大蒜提取液，虽然与其它植物提取液抑制率存在显著差异，但其抑制率仅40.3%。龙葵、银杏两种植物提取液完全没有抑制作用，其它27种植物提取液抑制率介于8.3%～29.5%。

3 讨论

每一种植物提取液中均含有特定的抑菌物质。从本次试验还观察到一些植物提取液对一些病原菌菌丝生长有抑制作用，一些植物提取液对另一些病原菌菌丝生长又有促进作用。同一种植物提取液对不同病原菌具有不同的抑菌效果，如银杏对粉红聚端孢霉（T.roseum）和蜡蚧轮枝菌（L.lecanii）具有一定的抑制作用，花椒对有害疣孢霉（M.perniciosa）有一定的抑制效果，但他们对其他病原菌抑制作用较弱。一些植物提取液对病原菌生长具有某种程度的促进作用，如乌莲莓对矩孢木霉（T.oblongisporum）、橘皮对有害疣孢霉（M.perniciosa）、茵陈和车前对粉红聚端孢霉（T.roseum） 等均观察到有促进生长的作用。本研究采用供试植物提取液进行培养皿中的抑菌试验，为进一步开展田间子实体病害防治试验，探索高效安全环保的防治方法奠定了基础。

[1]黄春燕，万鲁长，单洪涛.鸡腿蘑黑斑病及其病原研究初报[J].食用菌学报，2008，15（1）：83-85.

[2]Potocnik I.,Vukojevic J.,Stajic M.,et al.Sensitivity of Mycogone perniciosa,pathogen of culinary-medicinal button mushroom Agaricus bisporus(J.Lge)Imbach(Agaricomycetideae), to selected fungicides and essential oils[J].International Journal of Medicinal Mushrooms,2010,12(1):91-98

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[4]Dong WH,Bian YB.Stipe canker caused by Trichothecium roseum on the edible shaggy mane Coprinus comatus in China [J].Plant Disease,2013,97(11):1507-1507.

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[6]Thierry R,Sandra C,Kimberly P.,et al.Application regime for disease control using thyme oil[C]//Proceedings of the 18th congress of the iInternational society for mushroom science. Beijing:Institute of Agricultural Resources and Regional Planning of AAS,2012:338-342.

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《中国食用菌》声明

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《中国食用菌》编辑部

2015年7月10日

Antimicrobial Effect of Plant Extracts Against Four Pathogens of Edible Mushroom Fruit Body

WANG Gang-zheng,CHEN Yuan,BIAN Yin-bing
(Institute of Applied Mycology,Huazhong Agricultural University,Wuhan 430070,China)

The extracts form thirty plants collected or brought in the market were added to the medium to screen their antimicrobial activity in four edible fungi fruiting body pathogen.The results measuring the radial length of four pathogen mycelia demonstrated that the inhibition rate of Allium sativum extract against Trichothecium roseum was 99.1%during thirty plant tested.The inhibition ratio of Taraxacum mongolicum extract on Mycogone perniciosa was 96.3%.The suppression ratio of Punica granatum and Solanum nigrum extracts against Lecanicillium fungicola was 85.2%and 83.5%respectively.However,the suppression effect of all plant extracts against Verticillium fungicola were＜40.3%.

plant extract;edible fungi;fruiting body disease;antimicrobial effect

S646.9

A

1003-8310（2015）04-0076-04

10.13629/j.cnki.53-1054.2015.04.018

国家现代农业产业技术体系资助项目（CARS-24）。

王刚正（1988-），男，在读博士研究生，主要研究方向为食用菌病害与分子生物学。E-mail:wgzhau@163.com

**通信作者：边银丙 (1963-)，男，博士，教授，主要从事食用菌遗传育种与生物技术。E-mail:bianyb.123@163.com

2015-05-10