白细胞介素22在HBV相关性肝病中的表达及意义*

赵孝荣吴继周

白细胞介素22在HBV相关性肝病中的表达及意义*

赵孝荣①吴继周①

目的：探讨白细胞介素22在HBV相关性肝病中的表达及意义。方法：酶联免疫法检测30例慢性乙型肝炎无症状携带者（ASC）、40例慢性乙型肝炎活动期（CHB）患者、45例慢性乙型肝炎后肝硬化（LC）患者、30例原发性肝癌（HCC）患者、25例健康对照者外周血清中IL-22水平。分析IL-22与肿瘤标志物AFP的相关性。结果：CHB组、LC组、HCC组外周血IL-22水平均高于对照组（P=0.010、0.003、0.000）。外周血清IL-22水平与AFP之间无相关性。结论：IL-22可能在肝脏慢性纤维化、肝癌发生方面可能起一定作用。

白介素-22； 乙型肝炎； 肝疾病

长期的慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染是肝纤维化、肝硬化、肝功能失代偿及肝癌的高危因素。HBV相关性肝病发病机制复杂，机体的免疫调节紊乱导致病毒不能有效清除，引起慢性炎症。白细胞介素22（Interleukin-22，IL-22）可由辅助性T细胞17（T help cell 17，Th17）及Th22细胞、自然杀伤细胞等产生。IL-22与IL-19、IL-20、IL-24、IL-26、IL-28及IL-29同属IL-10细胞因子家族，是Th22、Th17等活化后的重要效应分子[1]。既往已有诸多研究表明[2]，IL-22可能在多种炎症性疾病或自身免疫性疾病中具有双重作用。本研究针对HBV相关性慢性乙型肝炎无症状携带者（asymptomatic carrier， ASC）、慢性乙型病毒性肝炎活动期（CHB）、乙肝肝硬化（LC）、原发性肝癌（HCC）患者血清IL-22的变化以及甲胎蛋白（AFP）的指标进行初步研究，探讨IL-22与乙肝病毒感染相关性肝病的表达及意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012-2014年在本院门诊就诊及住院的乙肝表面抗原（HBsAg）阳性患者145例，其中ASC 30例，CHB 40例，LC 45例，HCC 30例。诊断标准符合《慢性乙型肝炎防治指南》（2010年）、《WHO消化系统肿瘤病理学和遗传学》（2010 年）、《原发性肝癌诊疗规范》（2011年）。同时排除合并有自身免疫性疾病或HBV以外的其他病毒感染，且无慢性病史。排除6个月内接受抗病毒及免疫调节治疗的患者。另外随机抽取25例健康体检者作为本次试验的健康对照组（health control，HC）。各组研究对象的一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性，见表1。

表1 各组研究对象的一般资料

1.2 方法

1.2.1 标本采集和处理 采集研究对象空腹外周静脉血5 mL，于室温放置2 h后予离心，并分装血清置于-80 ℃低温冰箱冻存，待集中检测。同步留取血清标本测定AFP。

1.2.2 应用酶联免疫法（ELISA）检测血清中IL-22水平 采用ELISA试剂盒（武汉华美生物技术有限公司）检测血清中IL-22水平，严格按照说明书要求操作，使用美国Themo Electron Corporation的Multiskan MK3全自动酶标仪监测检测OD值，经Curve Expert软件分析测得样本水平。使用全自动生化仪检测AFP。

1.3 统计学处理 应用SPSS 16.0软件进行统计学分析，计量资料如呈正态，以（±s）表示，多组均数比较用单因素方差分析（one-way ANOVA），进一步进行组间比较，采用LSD-t检验法；相关分析采用spearman检验，计量资料如呈偏态分布，以中位数M（P25，P75）表示，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

各组外周血清IL-22水平及与肿瘤标记物AFP的相关性分析：（1）与正常对照组相比，HBV相关的不同肝病患者之间，IL-22水平比较差异有统计学意义（F=4.740，P=0.001）。组间比较发现CHB组、LC组、HCC组外周血IL-22水平均高于对照组（P=0.010、0.003、0.000），ASC组IL-22水平与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。（2）通过对各组患者IL22水平与肿瘤标记物AFP的相关性分析发现：外周血清IL-22水平与AFP之间均无相关性（P＞0.05），见表2。

表2 各组外周血清IL-22水平及AFP的比较（±s）

表2 各组外周血清IL-22水平及AFP的比较（±s）

注：r表示相关系数

组别IL-22（pg/mL）AFP（ng/mL）r值P值ASC组（n=30） 97.2±19.5 2.15±1.110.2150.376 CHB组（n=40）123.8±17.7 4.08±2.880.1070.684 LC组（n=45）130.4±21.5 5.17±5.370.3260.153 HCC组（n=30）161.7±23.0 10 867.30±6088.870.1480.500对照组（n=25） 62.2±15.9---

3 讨论

IL-22，一开始被命名为IL-10相关的T细胞来源的诱导因子（IL-10-related T cell derived inducible factor， IL-TIF）。IL-10R2与IL-22R1组成的异源二聚体受体复合物，IL-22与之结合，进一步激活下游信号传导通路，从而完成信号系统的传导[3]。当前，IL-22在肝脏各类疾病中的作用已在动物模型中得到广泛研究，有多篇研究证明，IL-22在肝损伤中具有直接的保护及协助再生作用，并且IL-22受体在肝脏中高表达，提示肝细胞是IL-22的重要效应细胞[4-5]。多项实验研究表明，IL-22在急性乙型病毒性肝炎（acute hepatitis B）和慢性乙型病毒性肝炎患者的肝内表达是增高的[6-7]。杨智等[8]发现肝硬化患者外周血清IL-22的表达水平升高，推测其原因是IL-22升高从而导致患者清除病毒的能力下降，从而使病情进入慢性迁延期。在体外试验中，IL-22可以促进肝细胞分泌能够启动、促进肝细胞再生的细胞因子IL-6及TNF-α[9]。而IL-22的保护作用，考虑与抗氧化、抗炎以及诱导肝细抗凋亡有关，其机制可能包括上调表达红素氧合酶1、氧化还原因子1以及显著增强STAT3（转录活化蛋白）的激活[10]。本研究中ASC组IL-22水平与健康对照组比较，差异并无统计学意义（P＞0.05），原因可能为机体尚处于免疫耐受期，不发生免疫应答有关；HBV相关性肝病中，CHB患者、LC患者、HCC患者外周血IL-22表达水平依次增加，HCC患者最高，与健康对照组相比，差异具有统计学意义（P=0.001）。这表明在慢性HBV感染时IL-22参与了肝脏的免疫及病理过程，考虑到动物模型中IL-22中的护肝作用，本研究推测CHB患者体内血清IL-22含量升高可能具有一定的保护作用。由于IL-22能够间接促进肝细胞的修复及再生，促进损伤肝细胞的存活，从而起到保护肝脏的作用， 但是IL-22的长期刺激有可能促进肝炎向前发展，LC患者体内血清IL-22含量升高则在肝脏慢性纤维化方面可能起一定作用。另有动物研究显示，注射IL-22致使细胞周期蛋白D1的升高从而造成肝细胞再生能力的增强，对二乙基亚硝胺（DEN）诱导HCC的易感性增加，而IL-22基因敲除小鼠形成HCC的易感性明显降低，那些在炎症损伤过程中存活的肝细胞则有可能成为原发性肝癌的前体细胞[6，11-12]。本研究通过检测外周血血清IL-22水平，发现HCC组外周血中IL-22水平确实高于正常对照组。同时也提示在肝癌患者体内IL-22参与了肿瘤免疫机制的调节。

有研究发现在人类肝脏癌细胞株中，IL-22能诱导急性期蛋白质的表达，参与体内炎性反应[13]。进一步在动物细胞体外培养研究中发现，IL-22能上调Bcl-2、Bcl-xL和细胞周期蛋白D等促进小鼠肝干细胞系BMOL的增殖并抑制其凋亡[14]。但有学者发现IL-22可调节肿瘤细胞周期，使其细胞周期停滞在G2/ M期，抑制肿瘤细胞增殖[15-18]。故IL-22在肝癌中的作用具体机制仍待进一步研究。因HCC组外周血中IL-22水平高于健康对照组，且IL-22对肝癌发生发展可能起一定作用，故本研究将HBV相关性肝病各组肿瘤标志物AFP与外周血IL-22水平进行相关性分析，得出IL-22与AFP无相关性的结果。但由于本研究中各组样本量较少，仍需要搜集大量样本进行深入研究。这些研究提示，IL-22参与HBV感染及病程进展的各个过程中发挥重要作用，LC、HCC患者IL-22含量升高可能在肝脏慢性纤维化、肝癌发生方面可能起一定作用，其机制尚需进一步研究。IL-22有可能成为治疗HBV相关性疾病的一个新靶点。

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Expression and Significance of Interleukin-22 in HBV Related Liver Diseases/

ZHAO Xiao-rong，WU J izhou.//Medical Innovation of China，2015，12（12）：001-003

Objective：To explore the expression and significance of IL-22 in HBV related liver diseases. Method：Whole vein blood was obtained from healthy control（HC）（n=25）and experimental groups including the patients with asymptomatic carrier（ASC）（n=30），chronic hepatitis B（CHB）（n=40），liver cirrhosis（LC）（n=45），hepatocellular carcinoma（HCC）（n=30）.The level of serum IL-22 were analysed by ELISA.Statistical analysis of the relevance of IL-22 levels and AFP was performed.Result：IL-22 level in the CHB group，LC group， and the HCC group were higher than that in the healthy control （P=0.010，0.003，0.000）.IL-22 levels had no correlation with AFP. Conclusion：IL-22 may contributed to the occurrence and the development of liver fibrosis and hepatocellular carcinoma.

Interleukin-22； Hepatitis B； Liver diseases

10.3969/j.issn.1674-4985.2015.12.001

2015-01-03） （本文编辑：蔡元元）

国家自然科学基金（30960170）；广西教育厅重点课题基金项目（桂教201202ZD021）

①广西医科大学第一附属医院 广西 南宁 530021

吴继周

First-author’s address：The First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University，Nanning 530021，China