滁菊鲜品与干品中化学成分的色谱分析

沈 洁，郭立玮

(1.南京市第二医院药剂科，江苏 南京 210003;2.南京中医药大学中药复方分离工程重点实验室，江苏南京 210023)

滁菊为菊科植物菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)的干燥头状花序，主产于安徽滁州，为我国的道地药材之一［1］，具有散风清热，平肝明目，清热解毒之功效［2］。为储存和临床使用方便，滁菊多在采收后阴干、焙干或晒干后入药［3］。现代研究表明，滁菊中的挥发油对葡萄球菌、链球菌、绿脓杆菌、流感病毒等有明显的的抑制作用，其中的桉叶油素、龙脑、桉叶二烯酮明显高于其他菊花［4］。因此，笔者通过气相色谱—质谱联用(GC-MS)技术和高效液相色谱(HPLC)法，对滁菊鲜品与干品中的化学成分进行了分析比较，旨在为该药材的干燥加工和合理使用提供参考。

1 仪器与试剂

Agilent 6890N5973气相色谱—质谱联用仪(美国)，Waters 515/2487高效液相色谱仪，乙腈为色谱纯(德国Merck公司)，甲醇为色谱纯(德国Merck公司)，乙醚为分析纯(扬州三和化工有限公司)，滁菊鲜品由滁州市滁菊研究所提供，经南京中医药大学生药学教研室吴启南教授鉴定符合2010年版《中国药典》一部的规定，滁菊干品由鲜品经60℃干燥2 h得到。

2 实验方法

2.1 挥发油的提取 按照2010年版《中国药典》一部附录XD挥发油测定法［5］，取滁菊鲜品、干品各100 g，剪碎，置于3 000 mL圆底烧瓶中，并在瓶中加入少量沸石，加入1 200 mL蒸馏水浸泡2h，用挥发油提取器采用水蒸气蒸馏法提取10 h，即得挥发油。

2.2 GC－MS分析

2.2.1 供试品溶液的制备 将水蒸气蒸馏法提取的滁菊鲜品和干品的挥发油，经无水硫酸钠脱水后，以乙醚为溶剂分别配成浓度0.1%的溶液，进GC－MS分析。

2.2.2 GC条件 石英毛细管柱HP－5MS;进样口温度:280℃，程序升温:60～130℃，4℃·min－1，130℃保持5 min，再以6℃·min－1的速度升温到280℃，280℃保留2 min。不分流进样。

2.2.3 MS条件 电轰击电离(EI)源，电离电压70 eV;离子源温度250℃;四极杆温度160℃;扫描范围40～400 aum。

2.3 HPLC 分析

2.3.1 供试品溶液的制备 分别取滁菊鲜品7 g、干品碎花1 g(根据鲜品的含水量进行折算)，加甲醇20 mL，超声提取30 min，滤过，取续滤液定容至10 mL量瓶中，用0.45μm微孔滤膜滤过，即得。

2.3.2 HPLC 条件 色谱柱:Hypersil ODS2(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，大连依利特公司;流动相:乙腈—甲醇—水(20∶40∶100);流速:1.0 mL·min－1;检测波长:349 nm;柱温:30℃;进样量:5μL。

3 实验结果

3.1 GC-MS结果分析 按“2.2”项下 GC-MS条件对滁菊鲜品和干品的挥发油分别进行测试，得到总离子流图，见图1，2;对总离子流图中的各峰进行MS扫描，所得MS图再通过计算机检索并与标准MS图相对照，从中鉴定出了鲜品与干品挥发油中的部分化合物，经面积归一化法测定各组分的质量分数［6］，结果见表1。

表1 滁菊鲜品与干品中挥发油的化学成分对比结果

峰号 保留时间/min 分子式 中文名 鲜品质量分数/%干品质量分数/%37 33.469 C21 H36 O4 2，3－ 羟丙基 －(Z，Z，Z)9，12，15－十八碳三烯酸酯0.06—38 33.618 C17 H34 O 2 － 七癸酮 0.13 0.09 39 33.758 C17H32 O4二丁基壬二酸酯0.40 0.26 40 34.076 C17 H34 O2 14－甲基－十五酸甲酯0.08 0.10 41 34.871 C16H32 O2 正十六碳酸 4.35 8.63 42 36.680 C18 H34 O2 油酸 23.01 23.72 43 39.991 C21 H40 O3 环氧丙醇 2.23 1.90 44 40.118 C35 H68 O5 1－羟甲基－1，2－二乙基－十六烷酸酯0.19 0.37 45 41.886 C38 H74 O2二十四烷基油酸酯0.13 －46 42.725 C27H56 二十七烷 1.37 1.21 47 45.016 C27 H52 O4 Si2 2，3－二［(三甲基硅烷基)氧］丙酯 －(Z，Z，Z)9，12，15 － 十八碳三烯酸0.32 0.44 48 45.214 C26H54 3－乙基－5(2－－乙基丁基)－十八烷0.29 0.17 49 46.315 C27H52O4Si2 2，3 － 二(三甲基硅烷基)丙基(Z，Z，Z)－ 9，12，15－十八碳三烯酸酯0.50 0.49合计77.08 80.35

3.2 HPLC指纹图谱及相似度评价 按“2.3”项下HPLC条件对滁菊鲜品和干品的提取物分别进行测试，得到鲜品和干品的HPLC指纹图谱，见图3，4;将采集的HPLC图导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004 A版)”，进行谱峰匹配和相似度计算［7］，结果分别见表2，结果发现滁菊鲜品和干品的化学成分有较大差别，指纹图谱的相似度不高。

表2 菊花鲜品与干品中成分的HPLC指纹图谱相似度

4 讨论

滁菊中挥发性成分主要包括烃类、醛类、酮类、醇类、酸类 、酯类、杂环类和酚类等化合物［8］，成分比较复杂，对其挥发性成分的分析技术要求较高。GC－MS联用技术广泛用于植物挥发油和精油化学成分分析［9］，因此本文选择GC－MS对滁菊鲜品和干品的挥发油成分进行了分离鉴定。由表1可知，滁菊鲜品和干品中的挥发性成分存在着差别:滁菊鲜品中鉴定出43个成分，经面积归一化法测定各组分的质量分数，占总峰面积的77.08%;相对百分含量在1%以上的是樟脑、龙脑、4α－甲基－1－亚甲基 －7－(1－ 甲基乙烯基)－ ［4αR －(4aà，7à，8aá)］－十氢萘、表蓝桉醇、雪松－8－烯－13－醇、芹子－6－烯－4－醇、喇叭茶醇、正十六碳酸、环氧丙醇、油酸、二十七烷等;干品中鉴定出41个成分，经面积归一化法测定各组分的质量分数，占总峰面积的80.35%;相对百分含量在1%以上的是樟脑、龙脑、4α－甲基－1－亚甲基－7－(1－甲基乙烯基)－ ［4αR －(4aà，7à，8aá)］－ 十氢萘、表蓝桉醇、二表雪松烯－1－氧化物、反式－长松香芹醇、芹子－6－烯－4－醇、喇叭茶醇、正十六碳酸、环氧丙醇、油酸、二十七烷等;鲜品中有8个成分在干品中未测到，说明滁菊经干燥后有一些成分挥发了;而干品中新出现了6个成分在鲜品中未测到，说明滁菊在干燥过程中挥发性成分发生了变化。此外，滁菊鲜品与干品的HPLC指纹图谱显示，鲜品与干品的化学成分存在着较大的区别，同时两者的指纹图谱相似度较低，进一步说明滁菊经干燥后成分发生了较大的变化。

滁菊为国家地理标志产品，因具有良好的药用功效，被誉为我国“四大药菊”之首［10］。有关药理学研究表明，滁菊的主要成分为黄酮类、挥发油萜类化合物及绿原酸等，具有多种生理活性，有很好的应用开发价值［11－14］。为了储存和临床使用的方便，滁菊多以干品入药或食用，本文的GC－MS和HPLC研究结果表明，滁菊经60℃干燥后的干品与鲜品的成分已经发生了较大变化，因此滁菊在干燥工艺上应选择低温干燥，以保持滁菊的原有成分及功效。

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