毛叶三条筋化学成分的研究

杨玉春， 伍贤学， 孟艳林， 秦 颖， 夏从芳， 胡秋芬， 李银科*

（1.玉溪师范学院资源环境学院，云南玉溪653100；2.云南民族大学化学与生物技术学院，民族药资源化学国家民委-教育部重点实验室，云南昆明650500）

毛叶三条筋化学成分的研究

杨玉春1，2， 伍贤学1， 孟艳林2， 秦 颖2， 夏从芳2， 胡秋芬2， 李银科1*

（1.玉溪师范学院资源环境学院，云南玉溪653100；2.云南民族大学化学与生物技术学院，民族药资源化学国家民委-教育部重点实验室，云南昆明650500）

目的 研究毛叶三条筋Lindera caudata（Nees）Hook.f.的化学成分。方法 毛叶三条筋提取液的分离纯化采用硅胶、HPLC色谱等技术进行，然后根据所得化合物的理化性质及波谱数据进行鉴定。结果 从中分离鉴定出6个化合物，分别为（1R，2S，5R，6S）-2-（3，4-methylenedioxyphenyl）-6-（4-hydroxy-3，5-dimethoxyphenyl）-3，7-dioxabicyclo［3.3.0］octane（1）、（1R，2S，5R，6S）-6-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-2-（3，4-methylenedioxyphenyl）-3，7-dioxabicyclo［3.3.0］octane（2）、epipinoresinol（3）、pinoresinol（4）、medioresinol（5）、（-）de-4′，4″-O-dimethylepimagnolin A（6）。结论 所有化合物均为首次从该植物中分离得到。

毛叶三条筋；化学成分；分离鉴定

毛叶三条筋Lindera caudata（Nees）Hook.f.又名黄脉山胡椒、朴香根、芽三英 （傣名），为樟科山胡椒属植物，是西双版纳人民常用的植物药，生长于海拔700～2 300 m的灌丛、疏林、路边、林缘等处，资源丰富，收录于 《中药大辞典》［1］，具有止血生肌，理气止痛之功效，也可治疗跌打扭伤、外伤瘀肿、出血、胸痛咳嗽等。山胡椒属植物的主要成分有生物碱、黄酮、萜类、脂肪酸、木质素和鞣质等［2-7］，但目前对毛叶三条筋化学成分的研究较少，仅报道有十八烷醇和4，5-dihydrohumenol A［8］。本实验应用硅胶、HPLC色谱等技术，从该植物80%乙醇提取液中分离得到6个化合物，

具体结构见图1。

图1 化合物1～6的化学结构式Fig.1 Chem icaIstructures of com pounds1-6

1 仪器与材料

1.1 仪器 VG AUTO Spec-3000质谱仪（英国VG公司）；Bruker AVANCEⅢ-400核磁共振仪（德国Bruker公司）；Agilent 1100 HPLC色谱仪、ZORBAX SB-C18反相柱（9.4 mm×250 mm）、LH-20凝胶柱（美国Agilent公司）；EYELA N1100旋转蒸发仪 （东京理化器械株式会社）；SHZ-DⅢ循环水真空泵 （上海道京仪器有限公司）；SK5210HP超声波清洗器 （上海沪粤明科学仪器有限公司）；流动相过滤装置，包括0.45μm微孔滤膜 （美国颇尔公司）。MS和NMR由云南民族大学测定。

1.2 试剂 100～200目、200～300目硅胶、GF254硅胶板 （100 mm×100 mm） （青岛海洋化工有限公司）；MCI-gel CHP-20P（日本三菱化学株式会社）；Sephadex LH-20凝胶（美国GE公司）；显色剂为5%H2SO4-乙醇溶液。乙醇、甲醇、石油醚、乙酸乙酯均为工业纯，乙腈、四氢呋喃均为分析纯 （国药集团化学试剂有限公司）；超纯水（自制）。

1.3 材料 毛叶三条筋于2012年3月购自云南省普洱市景谷县，经云南民族大学化学及生物技术学院陈毅坚教授鉴定为毛叶三条筋Lindera caudata（Nees）Hook.f.，标本保存于云南民族大学民族药资源化学国家民委教育部重点实验室。

2 提取分离

取干燥的毛叶三条筋20.0 kg，粉碎后用80%乙醇溶液25 L室温浸泡2～3 d，超声提取4次，每次30 min，过滤，减压回收溶剂，常温下反复浸泡，超声提取5～6次，合并后得到浸膏1.5 kg。浸膏用粗硅胶 （100～200目）3.0 kg拌样，烘干，上硅胶柱层析 （100～200目，10.0 kg），石油醚-乙酸乙酯1：0（I）、20：1（Ⅱ）、9：1（Ⅲ）、4：1（Ⅳ）、1：1（Ⅴ）、0：1（Ⅵ）梯度洗脱，分成6个部分。

经溶样分析，Ⅰ～Ⅲ不溶于甲醇，Ⅳ、Ⅴ易溶，Ⅵ极性较大，在大致对比Ⅳ、Ⅴ后，最终选择Ⅴ进行分离，即石油醚：乙酸乙酯为1：1的部分。甲醇溶解后，经MCI-gel CHP-20P柱处理，0.45 μm微孔滤膜过滤，再经ZORBAX SB-C18反相柱（9.4 mm×250 mm），75%甲醇为流动相，体积流量为8.0 mL/min，分为六段。在调配流动相比例后，再经Agilent-C18反相柱，以3.0 mL/min的体积流量对以上六段进行分析，发现第一段为杂质，继续调节流动相配比，HPLC柱对后五段进行分离纯化，得到化合物1（18.3 mg）、2（12.9 mg）、3（13.1 mg）、4（11.8 mg）、5（9.5 mg）、6（27.1 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：无色胶状物。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.88（1H，d，J=1.5 Hz，H-2），6.85（1H，dd，J=8.0，1.5 Hz，H-6），6.78（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），6.65（2H，s，H-2，6），5.92（1H，s，H-O-CH2-O），4.71（2H，t，J=5.4 Hz，H-7，7′），4.24（1H，m，H-9），3.86（1H，m，H-9′），3.83（6H，s，3，5-OCH3），3.10（2H，m，H-8，8′）。13C-NMR（400MHz，CD3OD）δ：149.3（C-

3，3′，5），148.5（C-4′），136.4（C-4），136.1（C-1′），133.0（C-1），120.6（C-6′），108.9（C-5′），107.5（C-2′），104.4（C-2，6），102.3（C-O-CH2-O），87.5（C-7），87.2（C-7′），72.7（C-9′），72.6（C-9），56.7（3，5-OCH3），55.5（C-8，8′）。以上数据与文献 ［9］一致，故鉴定化合物1为 （1R，2S，5R，6S）-2-（3，4-methylenedioxyphen-yl）-6-（4-hydroxy-3，5-dimethoxyphenyl）-3，7-dioxabicyclo［3.3.0］octane。

化合物2：1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.88（1H，brs，H-2′），6.85（1H，m，H-2），6.83（1H，m，H-5′），6.81（1H，m，H-6′），6.78（1H，m，H-6），6.75（1H，m，H-5），5.92（1H，s，H-OCH2-O），4.70（1H，m，H-7），4.24（1H，m，H-7′），4.19（2H，m，H-9，9′），3.85（2H，m，H-9，9′），3.84（3H，s，3-OCH3），3.11（2H，m，H-8，8′）。13C-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：149.3（C-3′），149.1（C-3），148.5（C-4′），147.3（C-4），136.5（C-1′），133.7（C-1），120.6（C-6′），120.0（C-6），116.0（C-5），110.9（C-2），108.9（C-5′），107.5（C-2′），102.3（C-O-CH2-O），87.6（C-7），87.4（C-7′），72.7（C-9′），72.6（C-9），56.4（3-OCH3），55.5（C-8，8′）。以上数据与文献 ［10］一致，故鉴定化合物2为 （1R，2S，5R，6S）-6-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-2-（3，4-methylenedioxyphenyl）-3，7-dioxabicyclo［3.3.0］octane。

化合物3：白色无定型粉末。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.96（1H，brs，H-2′），6.94（1H，d，J=1.8 Hz，H-2），6.82（1H，m，H-6），6.80（1H，m，H-6′），6.78（1H，m，H-5），4.85（1H，d，J=6.1 Hz，H-7′），4.40（1H，d，J=7.0 Hz，H-7），4.10（1H，d，J=9.4 Hz，H-9），3.85（3H，s，3-OCH3），3.84（3H，s，3′-OCH3），3.78（1H，d，J=8.6 Hz，H-9′），3.37（1H，m，H-8′），3.27（1H，d，J=8.6 Hz，H-9′），2.92（1H，q，H-8）。13C-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：149.3（C-3），148.8（C-3′），147.3（C-4），146.5（C-4′），133.8（C-1），131.3（C-1′），120.1（C-6），119.3（C-6′），116.0（C-5），115.9（C-5′），110.8（C-2），110.4（C-2′），89.4（C-7），83.4（C-7′），71.9（C-9），70.6（C-9′），56.3（3，3′-OCH3），55.6（C-8），51.2（C-8′）。以上数据与文献 ［11］一致，故鉴定化合物3为epipinoresinol。

化合物4：粘稠油状物。1H-NMR（400 MHz， CD3OD）δ：6.91（2H，brs，H-2，2′），6.76（2H，m，H-6，6′），6.74（2H，m，H-5，5′），4.66（2H，brs，H-7，7′），4.20（2H，m，H-9，9′），3.86（6H，s，3，3′-OCH3），3.84（2H，m，H-9，9′），3.09（2H，brs，H-8，8′）。13C-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：149.1（C-3，3′），147.2（C-4，4′），133.8（C-1，1′），120.1（C-6，6′），116.1（C-5，5′），110.9（C-2，2′），87.4（C-7，7′），72.6（C-9，9′），56.4（3，3′-OCH3），55.3（C-8，8′）。以上数据与文献［12］一致，故鉴定化合物4为pinoresinol。

化合物5：白色粉末。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.95（1H，d，J=1.8 Hz，H-2），6.80（1H，dd，J=8.0，1.8 Hz，H-6），6.77（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），6.65（2H，s，H-2′，6′），4.71（2H，m，H-7，7′），4.26（2H，m，H-9，9′）3.85（3H，s，3-OCH3），3.84（6H，s，3′，5′-OCH3），3.11（2H，m，H-8，8′）。13C-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：149.3（C-3′，5′），149.1（C-3），147.3（C-4），133.7（C-1），133.1（C-1′），120.0（C-6），116.0（C-5），110.9（C-2），104.3（C-2′，6′），87.6（C-7′），87.4（C-7），72.7（C-9′），72.6（C-9），56.7（3′，5′-OCH3），55.5（C-8′），55.3（C-8）。以上数据与文献 ［13］一致，故鉴定化合物5为medioresinol。

化合物6：无色胶状物。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.95（1H，d，J=1.8 Hz，H-2），6.81（1H，m，H-6），6.78（1H，m，H-5），6.65（2H，s，H-2′，6′），4.86（1H，d，J=6.0 Hz，H-7′），4.41（1H，d，J=7.0 Hz，H-7），4.11（1H，d，J=9.4 Hz，H-9），3.86（3H，s，3-OCH3），3.84（6H，s，3′，5′-OCH3），3.78（1H，m，H-9′），3.41（1H，m，H-8′），3.29（1H，m，H-9′），2.95（1H，m，H-8）。13C-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：149.3（C-3），149.1（C-3′，5′），147.3（C-4），133.8（C-1），130.6（C-1′），120.0（C-6），116.0（C-5），110.8（C-2），103.9（C-2′，6′），89.5（C-7），83.6（C-7′），71.9（C-9），70.6（C-9′），56.7（3′，5′-OCH3），55.5（C-8），51.2（C-8′）。以上数据与文献 ［9］一致，故鉴定化合物6为 （-）de-4′，4″-O-dimethylepimagnolin A。

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Chem icaIconstituents from Lindera caudata（Nees）Hook.f.

YANG Yu-chun1，2， WU Xian-xue1， MENG Yan-lin2， QIN Yin2， XIA Cong-fang2， HU Qiu-fen2，LIYin-ke1*

（1.Gollgeof Resourceand Environment，YuxiNormal University，Yuxi653100，Ghina；2.SchoolofGhemistry and Biotechnology，Yunnan Minzu University；Key Laboratory of Ghemistry in Ethnic Medicinal Resources，State Ethnic Affairs Gommission and Ministry of Education，Kunming 650500，Ghina）

AIM To study the chemical constituents from Lindera caudata（Nees）Hook.f..METHODS

Lindera caudata（Nees）Hook.f；chemical constituents；isolation and identification

R284.1

A

1001-1528（2015）11-2455-04

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.11.026

2014-10-09

云南省科技厅应用基础研究计划应用基础研究青年项目 （2012FD056）；云南民族大学化学与生物技术学院2013年大学生（硕士组）SRT创新性实验项目（2013HXSRTY09）

杨玉春（1989—），男，硕士，从事天然产物的研究。E-mail：yychun214@126.com

*通信作者：李银科 （1984—），男，硕士，副教授，从事天然产物的研究。E-mail：linkli609@163.com

The isolation and purification of L.caudata extractwere carried outon silica and HPLC column.The structures of isolated compoundswere then elucidated on the basis of physicochemical properties and spectral data.RESULTS Six compounds were isolated from this plant and identified as（1R，2S，5R，6S）-2-（3，4-methylenedioxyphenyl）-6-（4-hydroxy-3，5-dimethoxyphenyl）-3，7-dioxabicyclo［3.3.0］octane（1），（1R，2S，5R，6S）-6-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-2-（3，4-methylenedioxyphenyl）-3，7-dioxabicyclo［3.3.0］octane（2），epipinoresinol（3），pinoresinol（4），medioresinol（5），（-）de-4′，4″-O-dimethylepimagnolin A（6）.

CONCLUSION All compounds are isolated from this plant for the first time.