2014年下半年山东省部分规模猪场疫病监测与剖析

李玉杰 孔祥华 张 月 孙圣福 王士荣 刘丽萍 陈 静（山东省动物疫病预防与控制中心 山东 济南 250022）

2014年下半年山东省部分规模猪场疫病监测与剖析

李玉杰 孔祥华 张 月 孙圣福 王士荣 刘丽萍 陈 静*（山东省动物疫病预防与控制中心 山东 济南 250022）

为了查清山东省下半年几种猪病的流行情况，山东省动物疫控中心采用RT-PCR和PCR的方法对2014年7～12月期间部分猪场送检的100份病料进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV）、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪伪狂犬病毒(PRV)病原检测和分析。结果表明，病原多重感染的危害越来越突出，以PRRSV+PCV2(48%)的组合最为常见。从猪腹泻的病例中检出PCV-2和PRRSV感染是主要原因，再次证明PRRSV和PCV-2是危害我省养猪业的头号疫病病原。实验还显示不同规模猪场存在的主要病原没有很大差别。

近几年来，本省养猪业的发展较为平稳，但仍然会受到疫病的困扰，使得猪群的发病率和死亡率居高，造成严重的经济损失。猪病毒性疾病危害尤为严重，临床表现越来越复杂，典型病例明显减少，而且混合感染和继发感染增多，必须依靠实验室诊断才能确诊(杨汉春，2011；吕超超，2011等；孙志华，2012；张志，2012)。据报道，猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪伪狂犬病毒(PRV)病是当前危害我国养猪业的4种重要疫病(杨汉春，2014)。为了查清此4种疫病在下半年本省猪场的流行情况，本中心采用RT-PCR和PCR的方法对部分猪场送检的病料进行病原检测和分析，了解感染情况和流行现状，从而为防控该病提供可靠依据。

1 材料与方法

1.1 材料 于2014年7～12月期间，采自山东省济南、德州、烟台、临沂、滨州、淄博和济宁7个地市的10个发病猪场猪的肺脏、脾脏、肾脏、淋巴结和扁桃体等100份组织样品。

1.2 主要试剂 Prime Script One Step RT-PCR kit Ver. 2、RNA抽提试剂TRIzol、Gel Extraction Mini Kit、DL2000 DNA Maker 均购自TaKaRa公司。

1.3 样品处理 取冻存(短期-20℃、长期-70℃)的疑似发病猪病变实质脏器(肺脏、脾脏、肾脏、淋巴结和扁桃体等)解冻至软冻状态，取5～10g置于研钵中充分研磨，加入pH7.2的PBS制成组织匀浆，8000r/min离心5min，取上清置于-20℃保存备用。

1.4 检测方法 PRRSV、PEDV、PCV2和PRV的检测分别按照实验室建立的RT-PCR和PCR方法进行，4种病毒的引物分别来自ORF7编码区、M蛋白编码区、ORF2编码区和gD蛋白编码区。

2 结果

2.1 4种病毒的阳性率 100份病料中PRRSV、PEDV、PCV2和PRV的阳性率分别为72%、4%、80%和8%，全部样品被检出至少携带一种病毒。同时检出2种及2种以上病毒样品有56份，占检测样品总数的56%。以PRRSV和PCV2共存的现象最多，占被检样品总数的48%，也有个别样品被检出PRRSV和PEDV共存，PRRSV、PRV和PCV2共存(表1)。

表1 同时检出2种及以上病毒的组合形式及比率 (%)

2.2 无腹泻症状猪的病原检测分析 100头疑似病猪中不存在腹泻症状，但伴有喘、呼吸困难、体温升高等有36头，PRRSV的检测为全阳性，36头病猪均携带蓝耳病毒，其次是PCV-2，占89%，PEDV与PRV检测为全阴性(表2)。

表2 不同临床症状猪的各种病毒阳性率 (%)

2.3 有腹泻症状猪的病原检测分析 100头疑似病猪中存在腹泻症状有64头，PCV2的阳性率最高，占75%，其次是PRRSV，占56%，PEDV与PRV检出率较低，分别是6%和12%(表2)。

2.4 不同规模猪场病原检测分析 10个规模猪场母猪现存栏量100以内有2个，PRRSV的阳性率为100%，PCV2的阳性检出率为40%，PRV的阳性检出率为20%，没有检测出PEDV病原。母猪现存栏量100～200的有6个，PRRSV的阳性率为53%，PCV2的阳性检出率为87%，PEDV与PRV检测显示病原阳性率均为7%。母猪存栏量200以上的大型猪场有2个，检测结果显示均为PRRSV和PCV2混合感染(表3)。

表3 不同规模猪场各种病毒阳性率 (%)

3 讨论

近几年农业部发布的全国疫情通报可知在多重感染的疾病中，80%是病毒病，蓝耳病、圆环病毒病、伪狂犬病、猪瘟等仍为常见多发病。目前病毒性疾病的治疗仍缺乏有效药物，且一些危害严重的病毒变异加剧，使得传统疫苗失去了有效保护作用，养猪业面临着疫病威胁将更加严峻。（1）本研究发现病原多重感染的危害越来越突出，检测结果显示病料中检出2种或2种以上病原的样品为60%，其中以PRRSV+PCV2(48%)的组合最为常见。多种病原的混合感染和继发感染不但造成误诊，给防治带来困难，而且造成高发病率和死亡率。本研究通过病原检测发现，无论有无腹泻症状PRRSV与PCV-2的阳性率都很高，这表明PRRSV和PCV-2是危害我省养猪业的头号疫病病原。我国PRRSV毒株呈多样化趋势，不同病毒株之间的重组不断加剧，而且现用的活疫苗毒株与流行毒株之间也会发生重组。加上蓝耳病活疫苗的滥用，创造了更广阔的重组空间，使得毒株的变异趋势不可预测，加重了该病的复杂性和控制难度。无论是小型及散养猪场，还是大型猪场，蓝耳病病毒居高不下，这表明蓝耳病成为严重影响本省养猪生产的第一大疫病，因此猪场应以控制病毒感染为首要任务。圆环病毒2型感染率较高，不少猪场出现典型的断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)和皮炎与肾病综合征(PDNS)，在猪病中的地位日益凸显。PRRSV和PCV2均可造成细胞免疫和体液免疫抑制，破坏机体的免疫系统，导致猪群抗病能力大大减弱，给养殖业造成重大损失。建议猪场在切实做好生物安全措施、卫生消毒的基础上，对猪群加强监测，摸清感染底数和免疫效果，实施科学、有效的免疫接种，必要时适当增加疫苗的免疫剂量(卫秀余，2012；穆永攀，2014；杨汉春，2015)。（2）猪腹泻是导致仔猪成活率不高并对养猪业健康发展造成严重危害的重要因素之一。100头疑似病猪中存在腹泻症状占64%，，其它临床症状伴有喘、呼吸困难、体温升高等。结果显示，有腹泻症状病猪中PCV-2与PRRSV的阳性率很高，分别达到75%、56%，无腹泻症状的病猪中也检出了PEDV与PRV病原，但检出率都较低。这表明PCV-2和PRRSV感染是引发猪腹泻的主要原因。

本研究通过对10个规模猪场100疑似猪病样品进行检测，发现PRRSV和PCV-2是主要的感染源，且混合感染严重，个别存在PEDV和PRV病原感染，且不同发病状况的主要病原差异不明显，不同规模猪场存在的主要病原也没有很大差别。综上结果为当前本省猪病流行状况提供了参考资料，从而为防控提供可靠依据。

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[6] 卫秀余. 三大猪病的防控现状及未来猪病动向[J]. 今日养猪业, 2012(5): 16.

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S858.28

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1007-1733(2015)12-0044-02

2015–10–21）

*通讯作者