桥本甲状腺炎合并甲状腺乳头状癌组织中survivin和Ki-67的表达变化及意义

章幂，章佳新，冯倩倩

(扬州大学临床医学院苏北人民医院，江苏扬州225001)

桥本甲状腺炎(HT)可合并发生甲状腺乳头状癌(PTC)，且近年发病率呈上升趋势。survivin是凋亡抑制蛋白家族的成员，可通过有丝分裂促进转化细胞的异常增殖［1］。Ki-67存在于增殖细胞的细胞核中，能反映组织细胞的增殖能力［2］。本研究观察了甲状腺腺瘤(TA)、HT、PTC及HT合并PTC组织中survivin和Ki-67蛋白的表达，探讨HT和PTC的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集苏北人民医院病理科2007年1月～2014年2月的甲状腺存档蜡块，随机抽取TA 20例、HT 40例、PTC 40例、HT合并 PTC 40例;均经病理学证实，且临床资料齐全，术前均未行任何治疗。40例HT合并PTC患者中，男7例，女33例;年龄23～72岁，中位年龄47岁;临床分期Ⅰ、Ⅱ期26例，Ⅲ、Ⅳ期14例;有淋巴结转移17例，无淋巴结转移23例。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 采用免疫组化SP法。纯化的小鼠抗人survivin单克隆抗体，购自美国Santa Cruz公司;小鼠抗人Ki-67单克隆抗体，购自美国CST公司;DAB试剂盒由北京中杉金桥生物技术有限公司提供，染色步骤按操作说明书进行。选取5个不同高倍视野，每个视野计数100个细胞。survivin阳性染色为细胞质或细胞核内出现棕黄色颗粒。阳性细胞所占百分比 ＜5%、5%～25%、25%～50%、50%～75%、＞75%分别为 0、1、2、3、4 分，阳性细胞显色强度无着色、轻度染色、中度染色、重度染色分别为0、1、2、3分，两者得分之和≥2分为表达阳性。Ki-67阳性染色为细胞核内出现棕黄色颗粒，阳性细胞所占百分比≥10%为表达阳性。

1.2.2 统计学方法 采用SPSS17.0统计软件。组间比较行χ2检验，用Spearman等级相关系数描述相关性。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同甲状腺组织中survivin和Ki-67表达情况在 TA、HT、PTC、HT合并 PTC组织中 survivin蛋白阳性表达率分别为 10.0%(2/20)、42.5%(17/40)、77.5%(31/40)、72.5%(29/40)，除 HT 合并PTC与PTC比较P＞0.05外，其余两两比较P均＜0.05;在 TA、HT、PTC、HT 合并 PTC 组织中 Ki-67 蛋白阳性表达率分别为 15.0%(3/20)、57.5%(23/40)、67.5%(27/40)、65.0%(26/40)，除 HT、PTC及HT合并PTC与TA比较P均＜0.05外，其余两两比较P均＞0.05。

2.2 survivin和Ki-67表达与HT合并PTC患者临床病理参数的关系 见表1。

表1 survivin和Ki-67表达与HT合并PTC患者临床病理参数的关系

2.3 HT合并PTC组织中survivin和Ki-67表达的关系 相关性分析发现，survivin与Ki-67的表达呈正相关(r=0.146，P=0.007)。

3 讨论

流行病学表明，慢性炎症和肿瘤关系密切，阻止癌前病变患者的慢性炎症，可降低癌症发生率［3～5］。Lindsay等［6］首次提出HT合并甲状腺恶性肿瘤，指出甲状腺恶性肿瘤可由HT发展而来，其后大量学者也证明了此观点，并且认为HT和PTC的关系尤为紧密［7，8］。

survivin是迄今发现的抑制细胞凋亡最强的一种凋亡抑制因子，其主要通过两种途径抑制细胞凋亡:①与细胞周期蛋白激酶p34cdc2及p34cdk4发生作用，阻断凋亡通路信号的转导［9］;②直接通过抑制凋亡终末效应器Capase3和Capase7的活性，阻断各种诱导的细胞凋亡过程［10］。研究发现［11］，survivin 在多种恶性肿瘤中均异常表达增高，在肿瘤的发生、发展中起重要作用。本研究显示，survivin在PTC和HT合并PTC组织中高表达，提示survivin基因可能参与HT合并PTC或PTC的发生、发展过程。本研究还发现，survivin异常表达与淋巴结转移、临床分期有关，表明survivin与HT合并PTC的恶性程度和不良预后有关。而本研究中，HT组织survivin蛋白也呈中等程度异常表达，提示HT可能具有一定癌变潜质。

Ki-67在细胞 G1、S、M、G2期均有表达，为调节细胞周期存在于细胞核内的蛋白［12］。有研究发现，ki-67在多种恶性肿瘤均过度表达，与恶性肿瘤的发生、发展及预后有关［13］。本研究结果显示，Ki-67在PTC和HT合并PTC中异常高表达，提示Ki-67在HT合并PTC(或PTC)的发生、发展过程中起重要作用。进一步研究发现，Ki-67表达与患者淋巴转移和临床分期有关，表明Ki-67可能在肿瘤的远处转移、侵袭中起重要作用。同时，本研究中Ki-67在HT中也呈异常高表达状态，提示HT可能具有一定的癌变倾向。

研究发现，HT中有 IL-17的异常高表达存在［14，15］。在胃癌中 IL-17 可上调 IL-6 水平，间接活化STAT-3信号通路，进而促进肿瘤的发生发展。岳利华等［16］研究发现，在淋巴瘤中异常活化的STAT-3不仅可促进survivin表达，也可促进Ki-67表达。提示HT在高水平的IL-17炎性因子的长期刺激下，引起STAT-3信号通路的异常活化，进而引起survivin和Ki-67的逐渐异常表达增高。这可能也是本研究中survivin、Ki-67在HT中呈中等程度表达的原因所在。本研究关性分析发现，survivin与Ki-67表达呈正相关关系，均与淋巴结转移、临床分期有关，提示survivin与Ki-67的关系紧密，两者可能来自同一条通路的调控，这也一定程度印证了以上观点。因此，HT与PTC之间关系密切，HT具有一定的癌变为PTC的倾向，而survivin和Ki-67在HT中的异常高表达可能在肿瘤的发生、发展、侵袭及远处转移等过程中起着重要作用。

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