车前草中几种活性物质含量的测定

赵春 （长江大学化学与环境工程学院，湖北 荆州434023）

车前草 （Plantago asiatica L.）又名车轮菜，为车前科 （Plantaginaceae）多年生草本植物，含有黄酮类、胡萝卜苷、桃叶珊瑚苷、车前苷、多酚、生物碱、三萜、甾醇类化合物等化合物［1～6］。车前草在我国分布广泛，具有悠久的药用历史，以种子和全草入药，中医认为其具有抗菌、杀虫、清热利尿、祛痰、凉血、解毒的功效，主治水肿尿少、热淋涩痛、暑湿泻痢、痰热咳嗽和痛肿疮毒等［7～10］。本研究通过测定车前草中类黄酮、草酸、单宁和亚硝酸盐的含量，旨在为车前草的综合开发利用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料、仪器与试剂

车前草采自长江大学东校区校园内，洗去泥土，风干，粉碎，过80目筛，密封保存备用。

试剂：芦丁标准品、无水乙醇、硝酸铝、氢氧化钠、草酸、重铬酸钾、次甲基蓝、碳酸钠、硫酸、单宁、三氯化铁、硫酸锌、N－1－萘基乙二胺盐酸盐、对氨基苯磺酸、亚硝酸钠、氨水等，均为市售分析纯试剂。

主要仪器：722型分光光度计为上海精密科学仪器有限公司产品；植物粉碎机为上海精密科学仪器有限公司产品；EB－330H分析天平为上海精科电子天平厂产品；数显恒温水浴锅、电热恒温鼓风干燥箱为常州国华电器有限公司产品。

1.2 活性物质含量的测定方法

类黄酮的测定采用超声波乙醇浸提法［11］，草酸的测定采用次甲基蓝－重铬酸钾法［12］，单宁的测定采用比色法［13］，亚硝酸盐含量测定采用分光光度法［14］。每种处理重复4次。

1.3 加样回收率试验

准确称取一定量样品2份，一份不加入标样，另一份加入等量标准品，按1.2所述方法测定类黄酮、草酸、单宁和亚硝酸盐含量，计算回收率，重复4次。

2 结果与分析

2.1 车前草不同部位的类黄酮含量

以芦丁标准溶液的浓度为横坐标、光密度为纵坐标进行线性回归，得到光密度 （y）与浓度 （x）的线性方程为y＝－0.0149＋0.0114 x，相关系数R＝0.9998。可见芦丁标准溶液的浓度与光密度之间存在极显著的线性关系。

车前草中类黄酮的含量测定结果见图1。从图1可知，根中类黄酮含量最高，叶中类黄酮含量次之，花中类黄酮含量最低，三者间含量差异显著。

2.2 车前草不同部位的草酸含量

草酸标准溶液的光密度 （y）与浓度 （x）的线性方程为y＝0.0373＋0.0101x，相关系数R＝0.9998，车前草各部分草酸含量测定结果见图2。可见，车前草叶的草酸含量最高，而花的草酸含量最低。

2.3 车前草不同部位的单宁含量

以单宁酸标准溶液的浓度为横坐标、光密度为纵坐标进行线性回归，得到光密度 （y）与单宁酸标准溶液浓度 （x）的线性方程为y＝0.0443＋0.005 x，相关系数R＝0.9922。可见，浓度与光密度之间存在极显著的线性关系。

车前草各部位单宁的含量测定结果见图3。测定结果说明，车前草叶、花中单宁含量较高，二者间无明显差异，根中单宁含量最小。

图1 车前草不同部位的类黄酮含量

图2 车前草不同部位的草酸含量

2.4 车前草不同部位的亚硝酸盐含量

以光密度为纵坐标，亚硝酸钠标准溶液的浓度为横坐标，光密度 （y）与亚硝酸钠标准溶液的浓度 （x）的线性方程为y＝－0.0029＋0.7034x，相关系数R＝0.9997。

车前草根、叶、花中亚硝酸盐含量见图4。由图4可知，车前草叶中亚硝酸盐含量最高，根中亚硝酸盐含量最低。

图3 车前草不同部位的单宁含量

图4 车前草不同部位的亚硝酸盐含量

2.5 回收率

类黄酮、草酸、单宁和亚硝酸盐回收率测定结果见表1。由表1可知，各活性物质测定回收率均达到94%以上，说明测定方法是可靠的。

表1 回收率测定结果

3 讨论与小结

类黄酮、草酸、单宁和亚硝酸盐都是植物次生代谢产物，植物中的类黄酮和单宁具有较强的生理活性，在医药和农业生产中有着广泛用途。类黄酮具有降血压、降血脂的作用，而单宁有利于心脏血管疾病的预防；草酸摄入过多会影响人体对钙的吸收，引起低血钙，造成骨质疏松症；亚硝酸盐具有很强的毒性，还会生成有强致癌性的亚硝胺。

在农业有害生物的防治中，一般认为黄酮类化合物对昆虫具有防御作用，其防御机制或在于影响昆虫的行为和代谢，使之发生忌避和拒食；或是破坏昆虫正常的代谢过程，引起中毒甚至死亡。单宁一般被认为是有效的化学防御物质，对昆虫的不利作用主要是干扰昆虫对食物的利用，尤其是干扰肠道的消化。单宁分子能与蛋白质分子结合形成稳定的交叉链，能抑制酶的活性，使昆虫不能利用鞣化的蛋白质，单宁还能与淀粉形成络合物而影响昆虫对淀粉的消化。植物中草酸和亚硝酸盐含量也会影响昆虫的取食行为。

本研究测定了车前草根、叶、花中类黄酮、草酸、单宁和亚硝酸盐的含量，可为车前草的综合开发利用提供参考。

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