头孢喹诺与恩诺沙星联合用药对黄羽肉鸡人工诱发常见细菌病的疗效观察

吴 波，蒋武毅，段龙川，罗厚强

（1.温州市动物疫病预防控制中心，浙江温州 325000；2.温州市农产品检验测试中心，浙江 温州 325000；3.温州科技职业学院 动科系，浙江 温州 325006）

头孢喹诺与恩诺沙星联合用药对黄羽肉鸡人工诱发常见细菌病的疗效观察

吴 波1，蒋武毅2，段龙川3，罗厚强3

（1.温州市动物疫病预防控制中心，浙江温州 325000；2.温州市农产品检验测试中心，浙江 温州 325000；3.温州科技职业学院 动科系，浙江 温州 325006）

为了掌握头孢喹诺与恩诺沙星联合用药对黄羽肉鸡人工诱发感染大肠杆菌、沙门氏菌和禽多杀性巴氏杆菌的治疗效果，采用头孢喹诺和恩诺沙星分别以0.25 mg·kg-1（皮下注射）和100 mg·L-1（饮水）剂量联合给药，并与2种药物以临床剂量单用做对比。结果表明，头孢喹诺和恩诺沙星以低剂量联合用药的治疗效果显著优于头孢喹诺临床用药剂量单用，极其显著优于恩诺沙星临床用药剂量单用。

头孢喹诺；恩诺沙星；鸡；细菌病

目前，家禽饲养过程中很多病毒性疾病得到了控制，但细菌性疾病却越来越严重，如大肠杆菌病、鸡白痢、鸡霍乱、鸡慢性呼吸道病、鸡传染性鼻炎等，临床上容易导致鸡发病的细菌主要有大肠杆菌、沙门氏菌和禽多杀性巴氏杆菌［1］这几种病，特别是巴氏杆菌病，令不少养殖户感到头痛。用药时有好转，暂停死亡，停药2 d后，病程又出现反复，死亡增加，难以根治。其原因可能由于未能对症治疗，部分药物使用频繁且配伍不科学，使细菌产生很强的耐药性，这几种病常给养殖户造成很大的经济损失，如何在较短时间内通过临床和实验室检测，并且及时提出治疗措施，对减少养殖户的经济损失起着至关重要的作用。

恩诺沙星（Enrofloxacin，EF）是广泛应用于畜禽养殖业中的第3代喹诺酮类抗菌药，主要用于治疗畜禽细菌性疾病和支原体感染［2］，作为动物专用抗菌药物，具有抗菌谱广、杀菌活性强、与其他抗菌药物无交叉耐药性等特点，已备受兽医界重视［3］。头孢喹诺作为动物专用第四代头孢菌素类抗生素，对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有很强的杀灭作用，并且不易产生耐药性，在可食用组织中残留较少，安全性较高［4］。已有研究表明2种药物联用对鸡大肠杆菌的体外抑菌试验有较好的协同作用［5］，但是对黄羽肉鸡人工诱发大肠杆菌、沙门氏菌和禽多杀性巴氏杆菌混合感染的疗效研究尚未见报道。

1 材料和方法

1.1 材料

供试药品。硫酸头孢喹诺，商品名克百特，含量2.5%，生产批号为120801，购自于江苏倍康药业有限公司。乳酸恩诺沙星，由浙江国邦药业有限公司提供，批号121108-1，含量99.5%。

受试菌株。大肠杆菌 （ATCC25922）、沙门氏菌 （ATCC14028）、禽多杀性巴氏杆菌（ATC12948）购自杭州天和微生物试剂有限公司。

培养基。肉汤培养基，MuellerHinton（简称MH）培养基，血清 MH肉汤培养基。固体培养基，血清琼脂培养基、鲜血琼脂培养基、普通琼脂培养基、麦康凯培养基。上述各种培养基均按常规方法制备，并置于4℃冰箱保存备用。

实验动物。50日龄黄羽肉鸡140羽，体重（1.45±0.2）kg，雌雄各半，试验前确保没有使用头孢菌素类和喹诺酮类药物。

1.2 方法

1.2.1 诱发感染

挑取特征性菌落先接种血平板，置37℃过夜培养，次日挑选单个菌落1～2个接种于5 m L培养基 （加5%血清）中，37℃培养18 h。2～7组试验鸡胸肌注射大肠杆菌、沙门氏菌和禽多杀性巴氏杆菌混合培养液0.3 m L（约含105活菌）。

1.2.2 给药

试验前精密称取硫酸头孢喹诺和乳酸恩诺沙星，无菌操作配制成工作浓度，人工诱发感染12 h后给药。硫酸头孢喹诺皮下注射，每日2次，连续给药3 d后停药；乳酸恩诺沙星在饮水中予以添加，每日2次，连续给药5 d后停药。

1.2.3 动物分组及处理

第1组为健康对照组，实验动物不诱发感染，不给药；第2组为感染对照组，实验动物诱发感染，不给药；第3组至第6组为药物对照组，第7组为头孢喹诺和恩诺沙星联用试验组 （表1）。

表1 实验动物分组及处理

1.2.4 临床观察与实验室鉴定

停药后连续观察10 d，每天记录诱发感染前后观察实验动物临床症状，对病死动物剖检做细菌分离培养鉴定。

1.3 药效评价

1.3.1 死亡率

在试验期间，出现典型症状并死亡，尸体剖检心脏、肝脏有典型的病变特征，判定为诱发感染引起死亡。根据死亡实验动物数计算死亡率。

1.3.2 治愈率

在试验期间，实验动物经给药后，精神状态、食欲等恢复正常，均属治愈。根据治愈数占整个试验动物总数计算治愈率。

1.3.3 有效率

在试验期间，治愈的和没有死亡但有临床症状表现的实验动物均为 “有效”；试验结束时每组存活的数量占试验动物总数的比率为有效率。

1.3.4 相对增重率

根据试验开始及结束时每只实验动物的体重，计算增重量及每组实验动物的平均增重，并以健康对照组增重为100%，各组增重与之相比得各组相对增重量。

2 结果和分析

2.1 临床观察

人工诱发感染各组陆续出现不同程度的临床症状。主要表现为精神萎靡、卧地昏睡或呆立，反应迟钝，食欲减退或废绝。部分动物排泄白色带绿粪便，呼吸不畅，发出咕噜声。鸡冠和肉髯发绀呈黑紫色，肉髯常发生水肿。

剖检死亡动物，发现其心包积液，皮下组织和腹腔中的脂肪、肠系膜有大小不等的出血点，胸腔、腹腔、气囊和肠浆膜上常见纤维素性或干酪样灰白色的渗出物。肝脏的病变较为明显，表现为肿大、质脆，呈棕红色、棕黄色或紫红色，表面有很多针头帽大小或小米粒大小的灰白色或灰黄色的坏死点，部分可见点状出血。

2.2 实验室鉴定

革兰氏染色阴性，培养物在麦康凯培养基上生长成红色菌落，37～40℃下能发酵葡萄糖、乳糖，并产酸产气。吲哚试验和M.R试验为阳性。

2.3 临床药效

头孢喹诺与恩诺沙星联合用药对黄羽肉鸡人工诱发常见细菌病的临床药效见表2。结果表明，各组实验动物发病情况有明显差异。感染对照组实验动物死亡率较高，相对增重率低。经头孢喹诺和恩诺沙星单用或者联用治疗后，与感染对照组比较，能较为迅速减轻临床症状，降低死亡率。头孢喹诺临床用量对照组与2药联用试验组的各项评价指标差异不大，后者治疗效果略好。恩诺沙星临床用量对照组死亡率和治愈率明显低于2联用试验组，与头孢喹诺低剂量对照组接近。2药联用试验组在低剂量联合使用时，对发病动物的治愈效果以及相对增重率 （90.58%）显著优于头孢喹诺临床用量对照组 （P＜0.05）；与其他对照组相比，各项评价指标差异则极其显著。

表2 头孢喹诺与恩诺沙星联合用药对黄羽肉鸡人工诱发常见细菌病的临床药效

3 小结和讨论

实践过程中会遇到人工诱发感染过重或过轻的情况，在评价药效试验中，人工接种细菌，复制适应症病例，是非常重要的步骤。根据细菌的增殖及致病力规律，认为37℃培养16～18 h，细菌致病力最强［6］。再经试验确定适宜接种量，以诱发适应症［7］。因灌胃接种个体差异较大，本试验采用胸肌注射细菌培养液。

随着抗菌药物使用的日益泛滥，细菌耐药性问题已经严重影响了抗生素类药物的治疗效果。有研究表明，氟喹诺酮类药物在临床上应用最为广泛且同类药物之间存在交叉耐药性，因此恩诺沙星等作为非常有效的抗菌药物，已有相当程度的耐药性。从试验结果可以显示，其临床用药效果要弱于头孢喹诺。头孢喹诺作为较新的抗菌药，相对于第3代头孢菌素类抗菌药头孢噻呋钠，对大部分耐药菌仍具有较好的活性；其对细菌染色体和质粒编码的β-内酰胺酶高度稳定［8］，使得细菌不易产生耐药性。头孢喹诺和恩诺沙星抗菌机理不一样，可以从不同途径抑制并且杀死细菌，起到协同作用［5］。两者联用时的药物浓度在临床用药量约1/4的情况下，治疗效果还要优于临床用药对照组。头孢喹诺和恩诺沙星适当的配伍用药不但能大大减少用药量，解决兽药残留问题，而且能较为有效地控制病情，一定程度上缓解耐药菌泛滥的趋势。

［1］ Martinez M，McDermott P，W alker R.Pharmacology of the fluoroquinolones：a perspective for the use in domestic animals［J］.Vet J，2006，172（1）：10-28.

［2］ 蒋兴东，祁克宗，彭开松，等.动物性食品中氟喹诺酮兽药残留分析方法的研究进展 ［J］.上海畜牧兽医通讯，2008（1）：10-12.

［3］ 刘素英，刘勇军，尤华，等.恩诺沙星在肉鸡组织中残留消除规律研究 ［J］.中国兽药杂志，2005（6）：19-22.

［4］ 杜向党，李新生.头孢喹诺的最新研究进展 ［J］.中国畜牧兽医，2006，33（9）：15-17.

［5］ 郭永刚，胡立磊，吴玉臣.头孢喹诺与恩诺沙星对鸡大肠杆菌的联合药敏试验 ［J］.广东农业科学，2010（2）：144-148.

［6］ 甘肃农业大学.兽医微生物学 ［M］.北京：农业出版社，1998：34-35.

［7］ 李建科，蔡玉梅，马晓萍，等.盐酸沙拉沙星对鸡大肠杆菌病的疗效及安全性试验 ［J］.山东畜牧兽医，1998（4）：9-10.

［8］ 李辉，刘聚祥，王建平，等.第4代兽用头孢菌素头孢喹诺的研究进展 ［J］.兽药与饲料添加剂，2009，14（1）：17-19.

（责任编辑：卢福庄）

S 858.31；R 969.3

A

0528-9017（2015）04-0565-03

10.16178/j.issn.0528-9017.20150438

2014-12-10

温州市科技计划项目 （2013N0010）

吴 波 （1981-），男，浙江温州人，兽医师，硕士，主要从事动物疫病综合防控工作。E-mail：cris414727@126.com。

文献著录格式：吴波，蒋武毅，段龙川，等.头孢喹诺与恩诺沙星联合用药对黄羽肉鸡人工诱发常见细菌病的疗效观察 ［J］.浙江农业科学，2015，56（4）：565-567.