特非那定的荷移分光光度法测定

胡小明，叶露阳

（平顶山学院 化学化工学院，河南 平顶山 467000）

特非那定属于特异H1受体拮抗剂［1］，主要用于过敏性鼻炎、急慢性荨麻疹及枯草病的治疗，具有缓解抗组胺药物造成不良影响的优势，但是对于心脏病患者和肝损坏患者有诱发心律失常的可能.因此，建立一种快速、准确测定特非那定含量的方法十分必要.目前国内外已报道的特非那定的测定方法主要有光度法［2］、伏安法［3］、荧光光谱法［4］以及液相色谱法［5-6］等.中国药典2010版尚未规定特非那定的检测方法.本文利用甲基红与特非那定的荷移反应，建立了简便、快捷测定特非那定的分光光度法，该方法用于测定药物制剂中特非那定的含量，加标回收率为97.8%和101.2%.

1 实验部分

1.1 仪器和试剂

UV-2550型双光束紫外可见分光光度计（日本岛津分光公司）；723N型可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；CS-501型超级恒温仪（重庆实验设备厂）.

0.5g/L特非那定（中国药品生物制品鉴定所）乙醇溶液：准确称取特非那定标准品0.050 0g，加适量无水乙醇全部溶解后转移入100mL容量瓶中，摇匀定容.1.0×10-3mol/L甲基红（国药集团化学试剂有限公司）乙醇溶液：准确称取甲基红0.067 3g，加无水乙醇溶解，定容至250mL容量瓶中.上述溶液置于4℃的冰箱内保存备用.实验所用其他试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水.

1.2 实验方法

准确移取适量特非那定工作溶液于25mL容量瓶中，加入1.0×10-3mol/L的甲基红溶液3.0 mL，用反应溶剂稀释至刻度，摇匀，于室温条件下反应15min，以试剂空白为参比，用1cm比色皿在波长430nm处测定络合物的吸光度.

2 结果与讨论

2.1 吸收光谱

按照实验方法，利用UV-2550双光束紫外可见分光光度计，在400～700nm范围内进行光谱扫描，绘制吸收光谱（图1）.

图1 体系的吸收光谱Fig.1 Absorption spectra of system

由图1可知，特非那定在400～700nm范围内没有吸收；甲基红的最大吸收波长为520nm.加入特非那定后，溶液在520nm处的吸收峰消失，在430nm处出现一个新的最大吸收峰，最大吸收波长蓝移90nm，说明甲基红和特非那定发生了电荷转移反应并生成一种新物质.本实验选取430nm作为测定波长.

2.2 溶剂的选择

按照实验方法，选用二次蒸馏水、甲醇、无水乙醇、乙二醇、丙酮、正丁醇、正丙醇、异丙醇为溶剂，考察溶剂对体系吸光度的影响.结果表明，用二次蒸馏水作溶剂时体系的吸光度最大且稳定.由于甲基红和特非那定均由无水乙醇配制而成，考察乙醇与水的混合比例，发现V乙醇∶V水＝1∶9时，反应效果最好，灵敏度最高.而体系中加入酸、碱或缓冲溶液，会使反应灵敏度大大下降.本实验选用1∶9的乙醇-水混合溶液作为反应溶剂.

2.3 表面活性剂的影响

按照实验方法，选用聚乙二醇、十六烷基三甲基氯化铵、十二烷基苯磺酸钠、吐温-80、OP-10作为表面活性剂，考察表面活性剂对体系吸光度的影响.结果表明，表面活性剂对反应体系没有表现出增敏现象，本实验中不加表面活性剂.

2.4 甲基红用量的影响

按照实验方法，改变甲基红的用量，考察甲基红用量对体系吸光度的影响.结果表明，甲基红的用量为3.0mL时，体系吸光度最大，随着甲基红用量的增加，吸光度基本保持不变.本实验甲基红用量定为3.0mL.

2.5 反应时间和温度的影响

按照实验方法，改变反应时间，考察反应时间对体系吸光度的影响.结果表明，当反应时间为15 min时体系吸光度最大，在6h内吸光度基本保持不变.本实验选取反应时间为15min.

按照实验方法，改变反应温度，考察反应温度对体系吸光度的影响.结果表明，当反应温度为20℃时，反应效果最好.本实验选取反应温度为室温.

2.6 络合物的络合比及反应机理

应用等摩尔连续变化法和摩尔比法测定荷移络合物的组成比.结果表明，特非那定与甲基红的荷移反应络合物的组成为1∶1.

特非那定分子拥有孤对电子，是一种富电子物质，可以作为电子供给体；甲基红分子结构中拥有一个吸电子的羧基和一个偶氮基团，具有一定的接受电子的能力，属于缺电子物质，可以与特非那定发生络合反应，形成稳定的n-π型荷移络合物.基于荷移络合物的组成可推测荷移反应如图2所示.

2.7 工作曲线、检出限及精密度的测定

在最佳实验条件下，改变特非那定标准溶液的加入量，测定体系的吸光度，绘制工作曲线.结果表明，特非那定浓度在0.4～48.0mg/L范围内符合比尔定律，线性关系良好，回归方程为A＝0.029 9＋0.024 3c（mg/L），线性相关系数r＝0.998 9.表观摩尔吸光系数为ε＝1.15×104L·mol-1·cm-1.

按实验方法平行测定试剂空白溶液11次，计算标准偏差，按3倍的标准偏差计算出本方法的检出限为0.28mg/L.按实验方法平行配制6份特非那定含量为20mg/L的反应体系，测定其吸光度，得其相对标准偏差为1.40%.

图2 荷移络合物的形成过程Fig.2 Forming process of charge-transfer complex

2.8 干扰物质的影响

在最佳实验条件下，固定体系中特非那定浓度为20mg/L，考察药物辅料和常见无机离子对体系吸光度的影响.控制相对误差在±5%以内时，这些物质的允许倍数为：葡萄糖（120）、糊精（40）、乳糖（30）、淀粉（80）、蛋白质（120）、谷氨酸（0.6）、赖氨酸（0.75）、铬氨 酸（0.25）、Ca2＋（12）、Zn2＋（15）、Al3＋（50）、Mg2＋（30）、Na＋（200）、NO-3（30）、SO（30）.

2.9 样品含量分析

取特非那定片剂5片（标示量为60mg/片），研碎，准确称取相当于原药50mg的量，用无水乙醇全部溶解后，过滤，取其滤液，定容于100mL容量瓶中.取此溶液1mL，按照实验方法，测定药物中特非那定的含量.同时用标准加入法，进行回收实验，结果如表1所示.

表1 样品中特非那定的测定结果Table 1 Determination results of terfenadine in samples

3 结论

利用特非那定与甲基红的荷移反应建立了测定药物中特非那定含量的分光光度法.考察了最佳反应条件，并测定了药物制剂中特非那定的含量.实验结果表明该方法适用于特非那定含量的快速测定.

［1］陆芳，金孝玲.复方特非那定凝胶滴鼻剂的制备［J］.中国实用医药，2009，4（26）：126-127.

［2］程斌，刘启，王秀英.特非那定片的含量测定方法［J］.中国医院药学杂志，2001，21（11）：703.

［3］GHONEIM M，ISSA R，TAWFIK A.Assay of terfenadine in pharmaceutical for mulation and human plasma by adsorptive stripping voltammetry［J］.J Pharm Biomed Anal，2001，26（4）：593-598.

［4］秦艳芳，王广泉，常银霞.以葫芦脲-盐酸巴马汀为荧光光探针测定特非那定［J］.湖南文理学院学报：自然科学版，2011，23（4）：49-53.

［5］陈柳生，李鸿亮，王如意.特非那定片有关物质的检测方法研究［J］.海峡药学，2013，25（9）：89-91.

［6］李丽敏，郝彬.人血浆中特非那定的LC-MS测定法［J］.中国临床药理学与治疗学，2009，14（4）：432-435.