布渣叶总生物碱降血脂作用机制研究

冯亮

(广州医学院羊城医院药剂科，广东 广州 510140)

布渣叶又名破布叶，为椴树科破布叶属植物，盛产于中国的南方，尤其是两广地区，该药物味淡、甘，性微寒，无毒。有清热消滞，利湿退黄的功能，是用于湿热实滞腹痛、湿热黄疸等病症，药理研究也证明了该药物具有镇痛、退黄、消食等作用，在广东地区也是著名凉茶“王老吉”、“六和茶”等的主要组成药物之一，随着该药物越来越多的被人们所认识，近年来对其有效成分的研究不断的开展和深入［1-3］。在目前的疾病发病率和死亡率当中，心血管疾病占第一位，而其中的血脂异常优势心血管疾病的重要危险因素之一，调节血脂可以纠正脂质代谢紊乱，从而减轻或者预防动脉粥样硬化，减少冠状粥样硬化性的心脏病发生。近年来有关布渣叶的研究主要集中在清热利湿方面，现有降血脂的机理研究主要集中在该药物的总生物碱成分。胆固醇在人体中合成及代谢是一个复杂的过程，调节血脂涉及到多种酶和相关蛋白及血管活性物质的参与［4-6］。为了进一步探讨布渣叶内总生物碱调脂的作用机理，我们采用高脂血症的大鼠动物模型，观察该药物成分对载脂蛋白、卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性、血清脂质过氧化代谢产物丙二醛水平及超氧化物歧化酶活性等脂质要素的影响，从而探讨布渣叶总生物碱降脂作用的机理。

1 材料和方法

1.1 材料

布渣叶药材(批号20141103，产地:广西)，购自广州市中芝源中药有限公司。

阳性对照组采用瑞舒伐他丁钙片，以药物说明书的临床日用量作为参考，根据剂量换算方法“体表面积比”的换算形式，换算动物实验剂量作为临床等效剂量，瑞舒伐他丁片大鼠的药效剂量为5.2 mg/kg，实验用药均用水按剂量稀释后4 ℃冰箱进行保存，每天灌胃前进行加热处理。

SD 大鼠雌雄各半，共100 只，体重为180～250 g，购自广东省医学实验动物中心，动物合格证号为0094687。

基础饲料由广东省医学实验动物中心提供;高脂饲料为5% 猪油、1% 胆固醇、10% 蛋黄粉、85%基础饲料混合配制。

ApoAI、ApoB 检测试剂盒购自碧云天生物技术有限公司，游离胆固醇测定试剂盒购自武汉博士德生物公司;CRP、MDA 试剂盒购自杭州四季青生物工程有限公司;SOD 试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

检测采用Olympus-AU400 全自动生化分析仪(OLYMPUS，日本)，μ-Quant 扫描酶标分光光度仪(BiofugeStratos，德国) 。

1.2 方法

1.2.1 布渣叶总生物碱的制备［7］

选取布渣叶药材饮片1 kg，加入0.1%盐酸溶液中煎煮2 次，第1 次为16 倍量，第2 次为12 倍量，每次煎煮0.5 h，经过过滤，将滤出液浓缩至5 000 mL，加入盐酸调整pH 值为4，用0.5BV/h的速度将浓缩液通过已经处理好的732 型阳离子的交换树脂，纯水进行洗脱到无色，在用2.5BV 的0.25%的氨水醇溶液进行洗脱，然后进行洗脱液的收集，对滤液进行减压回收，乙醇无醇味为止，并浓缩成膏状，真空干燥后对药物进行粉碎即可。

1.2.2 分组及造模

高脂饲料造模的同时给予布渣叶总生物碱预防高血脂。基础饲料进行适应性喂养大鼠5 d 后，将大鼠随机分为5 组，每组大鼠10 只，雌雄各半，雌雄分开，分别为正常对照组:以基础饲料喂养;高脂模型组:采用高脂饲料喂养;布渣叶总生物碱低中高剂量组:给予高脂饲料的同时分别进行300、600、900 mg/kg 的布渣叶总生物碱灌胃，每天1 次;阳性对照组:给予高脂饲料的同时给予瑞舒伐他丁钙片5.2 mg/kg，1 天1 次;正常对照组和高脂模型组分别给予等量的饮水，于第4 周给药后，禁食12 h 后，股动脉取血并分离血清。

1.3 检测指标和方法

ApoAI、ApoB 的测定采用免疫透射比浊法进行;按照两酶系统进行LCAT 的检测，计算出LCAT 的活性;SOD 的测定采用黄嘌呤氧化酶法进行测定;血清MDA 采用硫代巴比妥酸法进行测定;血清NO 采用硝酸还原酶法进行测定;CRP 采用免疫比浊法测定。

1.4 统计学处理

数据均采用SPSS21.0 统计软件进行分析，正态分布资料采用() 表示。遵循正态分布而且方差齐性，故多组间的比较采用方差分析，P ＜0.05 具有统计学意义。

2 结 果

2.1 布渣叶总生物碱对大鼠血清ApoAI、ApoB 水平的影响

高剂量的布渣叶总生物碱能能够提高ApoAI的水平，降低ApoB 水平，中高剂量能够提高ApoAI/ApoB 的水平，与模型组比较差异具有统计学意义(P ＜0.05)，见表1。

2.2 布渣叶总生物碱对大鼠血清CRP、LCAT、NO 水平的影响

中剂量和高剂量的布渣叶总生物碱可以提高大鼠的NO 水平和LCAT 活性，与模型组比较具有统计学差异(P ＜0.05)，CRP 的含量与模型组比较无统计学差异(P ＞0.05)，见表2。

2.3 布渣叶总生物碱对大鼠血清SOD 活性及MDA 水平的影响

中剂量和高剂量的布渣叶总生物碱可以提高大鼠血清的SOD 活性，与模型组比较具有统计学差异(P ＜0.05)，而降低MDA 水平，与模型组比较具有统计学差异(P ＜0.05)，见表3。

表1 布渣叶总生物碱对大鼠血清ApoAI、ApoB 水平的影响

表2 布渣叶总生物碱对大鼠血清CRP、LCAT、NO 水平的影响

表3 布渣叶总生物碱对大鼠血清SOD 活性及MDA 水平的影响

3 讨 论

布渣叶作为广东地区的凉茶常用材料不断的被研发，市场的需求量不断的扩大，大量该药物的化学成分得到了深入的研究，现已从布渣叶中提取出了生物碱、黄酮类、三萜类、甾体等多种活性药物成分，药理研究表明布渣叶具有调血脂、解热镇痛退黄的作用、抗衰老、杀虫等功效［8-10］。已有研究已证实了布渣叶的黄铜类物质具有清除自由基的活性;水提取物具有增加冠脉流量，降低血压和脑血管阻力的作用;随着布渣叶的化学组分日益深入，人们开始进一步阐释化学成分与临床之间的联系，对临床药物应用的指导及新药的开发研究具有重要的指导意义。本研究在中医理论指导下，利用布渣叶总生物碱对调脂作用进行了初步的探讨，有助于阐明布渣叶的降脂作用机制，为临床对该药物的开发利用提供了科学的依据［11-14］。

高脂血症是动脉粥样硬化发生和发展的主要疾病，可以引发心脑血管疾病及糖尿病的发生，长期的高脂饮食还可以导致机体的脂质代谢的紊乱［15］。本实验中采用的高脂饲料的喂养方法对高血脂动物模型进行复制，与人类通常所患的高脂血症疾病的机理具有相似之处，因此此造模方法具有实际的临床意义。研究已证明，动脉粥样硬化以及冠状粥样硬化性心脏病的发病与血液中的低密度脂蛋白成正相关性，与高密度脂蛋白的水平呈负相关，调节机体的血脂水平可以纠正脂质代谢的紊乱，减轻动脉粥样硬化的发生，减轻冠状动脉粥样硬化性心脏病的发病［16-18］。

研究发现ApoAI、ApoB 是考察血脂的敏感性指标，也可作为动脉粥样硬化的预测因子。本研究通过观察布渣叶总生物碱作用高脂血症大鼠该指标的变化情况。结果显示，布渣生物碱可以明显的升高ApoAI 的水平，降低ApoB 水平，中高剂量能够提高ApoAI/ApoB 的水平，与模型组比较差异具有统计学意义，有效地改善了给药组大鼠的脂质代谢异常的情况。研究发现的布渣叶可以升高高脂动物模型高密度脂蛋白水平［19］，可能与提高ApoAI 水平有关;布渣叶生物碱可以降低高脂动物模型高密度脂蛋白水平［20］，可能与降低ApoB 水平有关，推测该药物通过提高ApoAI 的水平促进高密度脂蛋白的合成，激活提高卵磷脂胆固醇酰基转移酶，从而促进胆固醇的逆转运，达到调节血脂的作用。研究结果还显示，高脂模型组的LCAT 活性下降，具有降低总胆固醇的作用，中高剂量的布渣叶总生物碱可以提高LCAT 的活性，使胆固醇得到清除，胆固醇显著的降低了;同时中高剂量的布渣叶总生物碱可以降低MDA 的含量，提高SOD 的活性，说明该药物能够提高血清中SOD 的活力，抑制高脂血症大鼠血清中异常的脂质过氧化物含量，减少氧自由基的产生，达到抗氧化的目的;同时该药物可以提高NO 水平，也说明了其可以改善血管内皮的功能，促进NO 的生成，起到保护内皮细胞降低血管张力的作用。与CRP 含量影响不大，从一定程度上说明了调脂作用于CPR 作用不大。

综上所述，布渣叶总生物碱通过升高高密度脂蛋白胆固醇升高ApoAI，激活LCTA，从而促进胆固醇的逆转运，提高SOD 活性，增强机体康脂质过氧化能力，促进NO 生成，改善血管内皮功能，具有从多方位调节血脂的作用。在有效成分工艺的研究报道中，越来越多的相关布渣叶总生物碱的报道，虽然还没有单独以布渣叶有效成分和部位进行药物开发的报道，但是相信随着研究的深入，该药物开发的相关研究会越来越多的呈现出来。

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