生物活性肽对端粒长度的影响

王志萍，范圣刚，唐永和，张磊

生物活性肽对端粒长度的影响

王志萍，范圣刚，唐永和，张磊

目的 评价生物活性肽对端粒长度的影响。

方法 采用多中心、随机、双盲、安慰剂平行对照研究试验设计，试验受试者分为 4组，每组 50人。前 3组分别口服生物活性肽 2、4、6 g/d；对照组口服安慰剂。疗程均为 9个月。应用荧光实时定量 PCR法检测端粒长度，检测实验前以及试验后 3个月、6个月和 9个月的外周血端粒长度，评价生物活性肽对端粒长度的影响作用。

结果 对比服用生物活性肽前，全分析集（FAS）分析提示经过 3个月，4组受试者端粒缩短率分别为 1.42‰、1.42‰、1.48‰ 和 1.48‰，差异不明显（P=0.0678）；口服生物活性肽满 6个月时，4组受试者端粒缩短率分别为2.55‰、2.20‰、1.66‰ 和 2.91‰，端粒缩短程度出现了变化（P=0.0415）；口服生物活性肽满 9个月时，端粒缩短率分别为 3.44‰、2.97‰、1.90‰ 和 4.15‰，端粒缩短程度出现了差异（P=0.0403）。

结论 生物活性肽有延缓端粒缩短的作用。

生物活性肽； 端粒缩短； 随机对照试验

肽是两个或两个以上的氨基酸以肽键相连的化合物，在人体内发挥重要生理功能［1］。具有活性的多肽称为活性肽，又称生物活性肽或生物活性多肽。端粒与寿命的关系早就被科学研究所证实，2009年的诺贝尔生理学或医学奖就授予了发现端粒的三位科学家。端粒实际就是一种 DNA片段，由特殊的碱基序列构成。端粒的作用是保护染色体，由端粒酶来启动、制造和维持其功能。端粒的长度决定着生物的寿命，端粒越短，生物的寿命越短。

衰老是人体发展的必然结果。中老年人适当补充生物活性肽可以增强免疫力，延缓衰老，而端粒长度的变化也和衰老有着一定的关联，那么中老年人适当补充生物活性肽，端粒长度是否发生变化，值得思考。

本研究采用多中心、随机、双盲、安慰剂对照，荧光实时定量 PCR法［2］初步评价生物活性肽对端粒长度的影响。

1 对象与方法

1.1 入选标准

所有受试者均为以前未服用过含有活性肽的保健食品，年龄在 40～60岁之间的志愿者（肿瘤患者［3］除外）。志愿者共 200例，男性约占 25%，“三高”人群约 29%（无其他疾病）。

1.2 分组与给药

采用多中心、随机、双盲、安慰剂平行对照试验设计。以受试者的报名次序、年龄段、性别和健康程度，依次进行分组和发药。试验分为 A、B、C、D 4个组，分别口服生物活性肽 2、4、6 g/d和安慰剂；疗程 9个月。

1.3 方法

采用荧光实时定量 PCR法测量 4组受试者试验前、3个月、6个月、9个月的全血端粒长度。分别将 4组的 3个月、6个月、9个月的端粒长度平均值与试验前每组的端粒长度平均值进行比较。

1.4 统计学处理

对所有受试者进行全分析集（full analysis set，FAS）分析。所有符合试验方案、依从性好（依从性评价在 80%～100%）的试例，对其疗效进行符合方案数据（Per-protocol，PP）分析。对 4组资料的人口特征、一般情况以及基线情况（试验前）进行可比性分析。端粒指标用端粒长度缩短率来表示。端粒指标的 4组比较采用考虑中心效应的CMH方法。实验室数据主要采用统计描述分析试用前和试用后之变化情况。以 P＜0.05认为有显著差异。采用 SAS 9.13软件编程分析。

2 结果

2.1 一般资料

本研究共入组 200例，脱落 58例，完成142例。可供 PP分析的受试者人数为 142例，可供 FAS分析的受试者人数为 200例。不同组间的基线特征比较见表 1，4组受试者的各项数值具有可比性（P＞0.05）。

2.2 端粒长度评价

端粒长度评价分别进行 FAS分析和 PP分析，主要端粒指标比较见表 2和表 3。FAS分析提示口服生物活性肽经过 3个月后，4组受试者端粒缩短率分别为 1.42‰、1.42‰、1.48‰、1.48‰（P=0.0678）；口服生物活性肽满 6个月时，4组受试者端粒缩短率为 2.55‰、2.20‰、1.66‰、2.91‰（P=0.0415）；口服生物活性肽满 9个月时，端粒缩短率为 3.44‰、2.97‰、1.90‰、4.15‰（P=0.0403）。口服生物活性肽满 6个月及 9个月时，FAS分析和 PP分析均提示端粒缩短率4组差异有统计学意义（P＜0.05）。

表1 4组受试者一般资料的比较Table 1 Summary of characteristics of the subjects

表2 4组受试者端粒指标比较（FAS分析）Table 2 Telomere length in 4 groups（FAS analysis）

3 讨论

活性肽的生理活性涉及人体的消化、吸收、营养代谢调控、生长发育、免疫、神经调节等各个环节。生活中，有些老年人适当补充生物活性肽后，免疫力增强［4］，精气神变足。

研究发现，随着细胞的不断分裂，端粒逐渐缩短，当端粒缩短到一定程度的时候，可能触发某种信号，导致细胞衰老［5］。端粒酶的本质是 RNA指导的DNA聚合酶，能以自身RNA成分为模板，以端粒 3'端突出的单链为引物，由催化亚单位催化，逆转录合成端粒 DNA重复序列并添加到染色体末端，从而维持端粒长度及染色体的稳定性。由于端粒的缩短和端粒酶无活性，体细胞通常会逐渐衰老而死亡。

表3 4组受试者端粒指标比较（PP分析）Table 3 Telomere length in 4 groups（PP analysis）

鉴于生物活性肽近似一种保健食品，所以用安慰剂作为平行对照进行试验。根据中老年人身体需要，采取了低补充量（相当于日常饮食所摄入的量）、中补充量、高补充量 3种剂量组，观察补充一定量的生物活性肽对端粒长度的影响，证实低剂量组影响不是很明显，中、高剂量组能够不同程度地阻止端粒的缩短。

综上所述，该试验表明，A、B、C、D 4组在中、高剂量组有统计学意义，服用生物活性肽能够不同程度地阻止端粒的缩短。

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Methods A multicenter，double-blind，randomized and placebo controlled trial of bioactive peptides on telomere length was conducted.The subjects were divided into 4 groups:trial group A（n=50），trial group B（n=50），trial group C（n=50）and placebo group（group D，n=50），and then treated with bioactive peptides 2，4，6 g/d and placebo，respectively.The treatment lasted for9 months.Real-time quantitative PCR was used to measure the telomere length，before and after treatment for 3，6 and 9 months in the peripheral blood，to evaluate the effect of bioactive peptides on telomere length.

Results FAS（full analysis set）analysis showed that reduction of telomere length rate were 1.42‰，1.42‰，1.48‰and 1.48‰，respectively，after 3 months trial.And 2.55‰，2.20‰，1.66‰and 2.91‰，respectively，after 6 months trial.And 3.44‰，2.97‰，1.90‰and 4.15‰，respectively，after 9 months trial in group A，group B，group C，and group D.Analysis showed that the telomere length in the four groups were shortened without significant difference after 3 months（P=0.0678）.However，the difference between the four groups is obvious after 6 months and significant after 9 months（P＜0.05）.

Conclusions The long-term use of bioactive peptides may delay the reduction of telomere length.

Effect of bioactive peptides on telomere length

WANG Zhi-ping，FAN Sheng-gang，TANG Yong-he，ZHANG Lei

Objective To evaluate the effect of bioactive peptides on telomere length.

Bioactive peptides；Telomere shorting；Randomized controlled trial

WANG Zhi-ping，Email:wangzhiping81313@163.com

10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2015.02.011

265716山东龙口，烟台阿波罗生物药业科技有限公司（王志萍、范圣刚、唐永和）；265700山东龙口，龙矿集团技术中心（张磊）

王志萍，Email：wangzhiping81313@163.com

2014-12-10

www.cmbp.net.cn 中国医药生物技术，2015，10（2）:153-156

Author Affiliations:Yantai Appollo Biological Pharmaceutical Co.Ltd.，Shandong Longkou 265716，China（WANG Zhi-ping，FAN Sheng-gang，TANG Yong-he），Longkou Mining Group Technology Center，Shandong Longkou 265700，China（ZHANG Lei）

www.cmbp.net.cn Chin Med Biotechnol，2015，10（2）:153-156