注射用盐酸头孢替安配伍溶液中降解产物的测定*

于 佳，杨利红*，刘丽娜，张 鑫

（1.黑龙江省食品药品检验检测所，黑龙江哈尔滨150088；2.黑龙江工程学院，黑龙江哈尔滨150050）

注射用盐酸头孢替安配伍溶液中降解产物的测定*

于 佳1，杨利红1*，刘丽娜2，张 鑫2

（1.黑龙江省食品药品检验检测所，黑龙江哈尔滨150088；2.黑龙江工程学院，黑龙江哈尔滨150050）

测定注射用盐酸头孢替安与0.9%NaCl注射液配伍后的降解产物。采用LC-MS,RP-HPLC法，分别以0.02mol·L-1NH4Ac水溶液-乙腈及磷酸盐缓冲液-乙腈为流动相，对溶液配伍后的降解产物进行定性、定量分析。两个主要降解产物确定为DMMT和去四唑头孢替安内酯；配伍后室温放置8h，DMMT的量增加明显，百分含量由约0.03%增加至约0.15%，去四唑头孢替安内酯的量由约0.1%增加至约0.3%，杂质总量由0. 03%增加至约0.15%。注射用盐酸头孢替安与0.9%氯化钠注射液配伍后不稳定，应临用新制，以确保临床用药安全。

LC-MS；注射用盐酸头孢替安；配伍；降解产物

注射用盐酸头孢替安为第二代半合成头孢菌素，主要用于治疗敏感菌所致的感染，如肺炎、支气管炎、胆道感染、腹膜炎、尿路感染以及手术和外伤所致的感染和败血症等，临床应用广泛，是目前临床上最常用的抗生素之一[1]。然而，在实验过程中我们发现：盐酸头孢替安原料极易吸潮变色，注射剂与氯化钠溶液配伍后2h内溶液颜色变化明显。

本文采用LC-MS、RP-HPLC法，对注射用盐酸头孢替安与0.9%NaCl注射液配伍后产生主要降解杂质进行定性定量分析：确定了主要降解杂质的结构，并采用外标法测定了主要降解杂质含量随溶液放置时间延长的变化情况。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

Agilent1100型高效液相色谱仪；ThermoFisher TSQ QuntumDiscoveryMAX型质谱仪，配有ESI离子源及Xcalliber数据处理系统。

乙腈（色谱纯，FISHER）；NH4Ac（色谱纯，SIGMA）；1-（2-二甲基氨基乙基）-5-巯基-1,2,3,4-四氮唑对照品，简称DMMT（上海笛柏化学试剂有限公司，99.0%）；去四唑头孢替安内酯对照品（实验室合成，98.4%）；去离子水：明澈-D超纯水仪制；K2HPO4、KH2PO（4A.R.国药集团)；注射用盐酸头孢替安（哈药总厂）；0.9%NaCl注射液（科伦药业）。

1.2 方法

LC-MS方法：采用XBrige Shield RP18（4.6× 250mm,5μm）色谱柱；流动相为20mmol·L-1乙酸铵水溶液-乙腈；流速：0.6mL·min-1；柱温：25℃；进样量：10.0μl；离子源：ESI源；电压：4.3V；鞘气（N2）：25arb；辅助气（N）2：5arb；碰撞气（Ar）；0.2Pa；离子传输毛细管温度：350℃；采用全扫描一级质谱及全扫描二级质谱同时测定。扫描范围（m/z）：60～1000。

HPLC方法：Waters e2695高效液相色谱仪；检测器:Waters 2998；按参照USP方法，采用XBrige Shield RP18（4.6×250mm，5μm）色谱柱；以磷酸盐缓冲液（0.05mmol·L-1磷酸氢二钠溶液中，加入0.05 mmol·L-1磷酸二氢钾溶液，调节pH值至7.6～7.8）-乙腈（85∶15）为流动相；流速：1.0mL·min-1；柱温：25℃；进样量：10.0μl；UV检测波长为254nm。

2 结果与讨论

2.1 配伍溶液中主要降解产物的定性分析

照上述LC-MS方法测定，注射用盐酸头孢替安配伍溶液放置1h后，共检出4个主要降解产物，见图1，其可能结够和降解途径推测见表1。其中降解产物1与购得的1-（2-二甲基氨基乙基)-5-巯基-1,2,3,4-四氮唑（DMMT）对照品比较，其色谱保留行为与质谱碎片信息均一致；而降解产物4与实验室合成并经结构确认的去四唑头孢替安内酯的色谱保留行为和质谱碎片信息均一致。

图1 LC-MS条件下的总离子流图（ESI+）Fig.1 MS full scan（ESI+）

表1 各降解产物结构和降解途径推测Tab.1 Proposed structure and degradation pathway of each degradation product

2.2 配伍溶液中主要降解产物的定量分析

照上述HPLC方法测定，DMMT、去四唑头孢替安内酯及配伍溶液中降解产物色谱图详见图2～4。

精密称取DMMT对照品溶液，置100 ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，逐级稀释，溶液浓度为1.93μg·mL-1时，S/N=8.96，得其定量限为2.15μg·mL-1；同法得到去四唑头孢替安内酯的定量限为8.32μg·m-1。两种杂质对照品溶液在8h内稳定性良好。

测定结果表明：注射用盐酸头孢替安配伍溶液室温放置8h，DMMT的量增加明显，百分含量由约0.03%增加至约0.15%（外标法）；去四唑头孢替安内酯的量由约0.1%增加至约0.3%（外标法），杂质总量由0.03%增加至约0.15%（面积归一化法）。

Determination of degradation products of cefepime hydrochloride for injection after compatibility*

YU Jia1，YANG Li-hong1*，LIU Li-na2，ZHANG Xin2
（1.Heilongjiang Institute for Food and Drug Control,Harbin 150088,China；2.Heilongjiang Institute of Technology,Harbin 150050,China）

The degradation products of cefotiam hydrochloride for injection were determined when mixed with 0.9%NaCl injection．LC-MS and RP-HPLC method have been applied for qualitative and quantitative analysis of the degradation products with 0.02mol·L-1ammonium acetate-acetonitrile and phosphate buffer solution-acetonitrile as mobile phase.Two main degradation products were identified as DMMT and detetrazolium cefotiam hydrochloride lactone.At room temperature for 8 hours after the compatibility,the amount of DMMT increased obviously,percent content by about 0.03%increase to about 0.15%,detetrazolium cefotiam hydrochloride lactone amount by about 0.1%increase to about 0.3%,total impurities is increased from 0.03%to about 0.15%.Conclusion:The compatibility of Cefotiam hydrochloride for injection with 0.9%NaCl injection are incompatible and should be used promptly to ensure the safety of clinical use.

LC-MS；cefepime hydrochloride for Injection；compatibility；determination of degradation products

图2 RP-HPLC条件下DMMT色谱图Fig.2 Chromatogram of DMMT

O657.7

A

10.16247/j.cnki.23-1171/tq.20150432

2015-02-27

黑龙江省自然科学基金项目（项目批准号：H201452）

于佳（1983-），女，主管药师，理学硕士，主要从事药品检验和药品质量标准的研究。

杨利红（1968-），女，主任药师，理学博士，主要从事药品检验和药品质量标准的研究。