细胞块切片免疫组化染色在胸腔积液病理诊断中的应用价值

李中祥

(太康县人民医院 病理科 河南 周口 475400)

胸腔积液主要来源于非小细胞肺癌、肺腺癌和恶性胸膜间皮瘤等，传统胸腔积液的诊断主要采用细胞涂片检查。但单纯应用细胞涂片进行检查，无法对转移性癌和浆膜腔原发性间皮性肿瘤进行区别。胸腔积液细胞免疫组化染色检测是近年来应用在鉴别转移性癌和间皮性肿瘤方面具有极高敏感度的检测方法。本文选取80例恶性胸腔积液患者作为研究对象，采用细胞免疫组化染色检测，具体报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 以太康县人民医院2013年10月至2014年10月80例胸腔积液患者为研究对象，其中观察组40例，男22例，女18例，年龄14～76 岁，平均年龄(40.2±3.1)岁;对照组40例，男20例，女20例，年龄12～73 岁，平均年龄(41.1±3.3)岁。80例送检样本均为胸腔积液;观察组40例均制作细胞块，对照组40例均进行常规细胞涂片。本次研究均经过患者或患者家属签署知情同意书，且两组患者在年龄、性别等一般资料方面比较，差异无统计学意义(P ＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 标本采集 清晨收集患者新鲜胸腔积液50 ml，分3～5个试管进行离心，以3 000 r/min 的转速离心10～15 min;离心结束后用移液枪将上清液吸出，从沉渣中取部分行常规细胞涂片学检查;余下所有沉渣加入2.5 ml 戊二醛进行固定，再以3 000 r/min的转速离心5 min，离心后用移液枪将上清液吸出，将沉渣取出用滤纸包好，行常规脱水后用石蜡包埋切片，应用HE 染色。

1.2.2 免疫组化 采用Maxvision 快捷S－ P 法进行染色，Maxvision 试剂盒和DAB 显色试剂均购于福建迈新有限公司，CEA、CK7、Wr－l 等抗体均购于自基因公司，染色过程中严格按照试剂盒说明书进行。

1.3 诊断标准 阳性:CK7、CEA 在胞浆或胞膜上呈现棕黄色;WT－1 在胞核呈现棕黄色颗粒;Calretinin 在胞浆、胞膜或胞核上呈现黄色;间皮细胞或腺癌细胞达10%以上。

1.4 统计学方法 采用SPSS 17.0 统计学软件进行数据处理分析，定性资料的组间比较采用χ2检验，P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

观察组和对照组患者胸腔积液的阳性检出率分别为100.0%、76.0%，细胞块切片结合免疫组化阳性率明显高于常规细胞学涂片，差异有统计学意义(P ＜0.05)。抗体表达分析显示，CK7、MOC－31、CD15、TTF－1、BerEP4、CEA 是肺腺癌较为特异性的抗体，而Calretinin、Desmin、CK5/6、WT－1 是间皮性肿瘤较为特异性的抗体，各抗体在腺癌细胞和间皮性肿瘤细胞均有交叉表达。见表1。

表1 两组患者病理诊断结果对比(n)

3 讨论

胸腔积液在细胞病理学诊断中始终具有至关重要的临床意义。由于转移性癌和浆膜腔原发性间皮性肿瘤的细胞形态比较相似，所以细胞涂片法无法对其进行准确区分，而病理结果是临床治疗方案选择的关键。胸腔积液细胞块切片在适当的抗体组合下与免疫组化染色相联合，可有效鉴别肺腺癌和恶性间皮病变。免疫组化染色法是利用已标记的特异性抗体来检测细胞内未知抗原。并通过酶所产生的着色反应来显示细胞的活性、定位及其分布。此方法操作易于掌握，阳性物质定位准确、特异性强。同时，细胞块的应用弥补了传统细胞涂片方法单一的缺点，使细胞标本得以保存，具有了连续切片的性质，更利于进行多项检查。该组研究结果显示，细胞块切片结合免疫组化阳性率明显高于常规细胞学涂片，差异有统计学意义(P ＜0.05)。CK7、MOC－31、CD15、TTF－1、BerEP4、CEA 是肺腺癌较为特异性的抗体，而Calretinin、Desmin、CK5/6、WT－1是间皮性肿瘤较为特异性的抗体，说明细胞块切片联合免疫组化染色可显著提高胸腔积液诊断的阳性率，为临床治疗提供一定的参考依据。

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