三七总皂苷对动脉粥样硬化患者血管炎症因子及颈动脉内膜中层厚度和斑块的影响*

江小萍曾凡鹏刘首明林小鸳冯素莲沈祖泓

（广东省清远市中医院，广东清远511500）

·研究报告·

三七总皂苷对动脉粥样硬化患者血管炎症因子及颈动脉内膜中层厚度和斑块的影响*

江小萍曾凡鹏刘首明林小鸳冯素莲沈祖泓

（广东省清远市中医院，广东清远511500）

目的观察三七总皂苷对高脂血症的动脉粥样硬化（AS）患者血清炎症因子和颈动脉内膜中层厚度（CIMT）及斑块的影响。方法将71例CIMT≥0.9 mm和（或）有颈AS斑块的高脂血症患者按随机数字表法分为三七总皂苷组和阿托伐他汀组，采用酶联免疫法及彩色超声显像仪，观察两组患者用药前后超敏C反应蛋白（hs-CRP）、低密度脂蛋白（LDL-C）、人可溶性CD40配体（sCD40L）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达及CIMT和斑块以及实验室生化指标的变化。结果两组患者服药前hs-CRP、MMP-9、sCD40L、IL-6、TNF-α水平、CIMT和斑块积分比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；两组患者服药12周hs-CRP、MMP-9、sCD40L、IL-6、TNF-α水平较各自服药前明显降低（P＜0.05），CIMT和斑块积分较服药前明显降低（P＜0.05），两组服药前后比较差异有统计学意义（P＜0.05）；两组患者用药过程中出现的不良反应比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论三七总皂苷能保护高脂血症的AS患者血管内皮功能，抑制颈动脉内膜增厚及动脉粥样硬化斑块增大，延缓AS的进展，其机制与其降低血清hs-CRP、LDLC、sCD40L、MMPs、IL-6、TNF-α水平有关。

动脉粥样硬化三七总皂苷可溶性CD40配体

动脉粥样硬化（AS）是一种与炎症和免疫反应密切相关的疾病，炎症可致血管内皮损伤、动脉中膜平滑肌细胞增生，最终导致动脉内膜脂纹、纤维斑块和（或）粥样斑块形成［1］。sCD40L作为一种新的炎症标志物，与CD40结合后介导免疫应答，参与AS的形成、引发内皮功能障碍，在AS的发生和发展起重要作用［2］。基质金属蛋白酶（MMPs）是AS斑块中炎症细胞的产物，亦与AS的发生、发展密切相关［3］。因此，控制炎症反应、保护血管内皮功能有可能成为治疗AS的新途径。三七总皂苷（tPNS）作为临床的常用处方药广泛应用于AS、高脂血症及冠心病等血管性疾病的治疗中，具有良好的调脂、抗氧化、抑制炎症反应、抗血小板聚集作用［4］。本研究旨在观察tPNS对高脂血症的颈AS患者血管内皮的保护及血管炎症的抑制作用，探讨中医药治疗早期AS的方法，分析其抗AS的可能机制。现报告如下。

1　资料与方法

1.1病例选择符合《中国成人血脂异常防治指南》［5］的诊断标准。纳入标准：血脂异常、颈动脉内膜中层厚度≥0.9 mm和（或）有颈AS的患者。排除标准：已知或在随访期间发生患严重肝肾疾病、内分泌代谢疾病、结缔组织疾病和肿瘤的患者。

1.2临床资料选取2012年10月至2013年12月在本院住院的血脂异常患者75例，其中4例患者失访，剩余71例。将入选的71例患者按随机数字表法分为三七总皂苷组36例，男性21例，女性15例；平均年龄（64.81±12.41）岁；体质量指数（24.52±4.12）kg/m2；吸烟指数（313.55±298.15）；高血压22例，糖尿病6例。阿托伐他汀组35例，男性20例，女性15例；平均年龄（64.29±13.46）岁；体质量指数（25.11±3.18）kg/m2；吸烟指数（325.13±273.80）；高血压23例，糖尿病6例。两组患者临床资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经本院伦理委员会批准。

1.3治疗方法71例患者均予饮食治疗和改善生活方式等处理，对高血压、糖尿病患者予降压、降糖治疗。三七总皂苷组予三七总皂苷100 mg，口服，每日3次；阿托伐他汀组予阿托伐他汀20 mg，口服，每日1次。两组疗程均为12周。停用阿托伐他汀警戒值［5］：血清总胆固醇（TC）＜2.6 mmol/L；服药期间出现肌痛同时肌酸激酶（CK）正常高限5倍、天门冬酸氨基转移酶（AST）正常高限3倍、肌酐221 mmol/L等严重副作用需停药。

1.4观察指标记录入选患者服药前、服药12周后血常规、肝肾功能、CK、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、三酰甘油（TG）、血清总胆固醇（TC）和血糖（GLU）、糖化血红蛋白（HbA1C），采血前72 h禁酒及高脂饮食，空腹12 h取静脉血。观察用药后反应：胃肠道反应、肝肾功能、出血情况及其他副作用。超敏C反应蛋白（hs-CRP）检测：采用免疫透射比浊法检测，全自动生化分析仪测定超敏C反应蛋白。入选患者均在人院后48 h内抽取空腹静脉血5 mL，3000 r/min离心10 min分离血清，置于-20℃冰箱内保存。采用酶联免疫吸附法检测氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）、人可溶性CD40配体（sCD40L）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）。ELISA试剂盒购自生工生物工程（上海）股份有限公司，操作步骤和反应条件均严格按照试剂盒说明书进行和设定。检测患者颈动脉内膜中层厚度（CIMT）：由经验丰富的医生对所有患者进行颈动脉超声检查。采用美国通用彩色多普勒超声诊断仪（GE Vivid7），周围血管探头频率为7.5～10 MHz，于采血前后24 h内测量双侧颈总脉、颈内动脉和颈动脉分叉处IMT及动脉硬化斑块。CIMT＜0.9 mm定义为内膜中层厚度正常，0.9 mm≤CIMT＜1.3 mm为内膜中层增厚，以内膜局限性突出管腔、内膜厚度≥1.3 mm为斑块形成指标。颈动脉粥样硬化斑块积分方法：测定双侧颈总动脉、颈内动脉和颈动脉分叉处斑块面积，将斑块面积相加即为其斑块总积分。

1.5统计学处理采用SPSS17.0统计分析软件。计量资料以（±s）表示，采用t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1两组患者治疗前后血清hs-CRP、MMP-9、sCD40L、IL-6、TNF-α水平、CIMT和斑块总积分以及生化指标比较见表1。结果示两组患者服药前、服药12周hs-CRP、MMP-9、sCD40L、IL-6、TNF-α水平、CIMT和斑块积分比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；两组患者服药12周HDL-C、CK、GLU、HbA1C较本组服药前无明显变化（P＞0.05）；LDL-C、TG、TC和hs-CRP、MMP-9、sCD40L、IL-6、TNF-α水平均较本组服药前明显降低（P＜0.05），CIMT和斑块积分较服药前明显降低（P＜0.05），两组服药后比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2两组患者不良反应情况比较结果为三七总皂苷组无不良反应出现，阿托伐他汀组出现谷丙转氨酶升高1例、天门冬氨酸氨基转移酶升高1例。

表1　两组治疗前后血脂、血糖、CK、hs-CRP、MMP-9、sCD40L、IL-6、TNF-α水平及CIMT和斑块积分比较（±s）

表1　两组治疗前后血脂、血糖、CK、hs-CRP、MMP-9、sCD40L、IL-6、TNF-α水平及CIMT和斑块积分比较（±s）

与本组治疗前比较，*P＜0.05；与对照组同时段比较，△P＜0.05。下同。

斑块积分（mm2）三七总皂苷组服药前154.31±52.18 0.94±0.38 3.34±0.785.84±1.383.9±0.885.04±1.18 5.65±0.58 21.36±5.65561.06±72.15561.06±72.15 336.35±62.783.35±0.5843.39±11.611.05±0.242.34±0.89（n=36）服药后131.90±48.52 1.15±0.32 2.91±0.62*△4.91±0.52*△2.91±0.92*△4.81±1.52 5.37±0.425.19±3.35*△206.8±51.02*△206.80±51.02*158.9±58.82*△1.71±0.52*△19.85±10.39*△0.81±0.12*△1.61±0.92*△阿托伐他汀组服药前149.73±63.51 0.99±0.41 3.41±0.815.91±1.114.21±0.915.11±1.22 5.59±0.62 23.58±6.59530.71±69.52550.71±69.52 341.95±71.183.21±0.6142.78±10.531.01±0.272.57±1.01（n=35）服药后155.79±58.67 1.09±0.47 2.79±0.67*4.79±1.27*2.79±0.87*4.79±1.27 5.29±0.475.91±2.99*218.79±48.27*215.79±48.27*159.82±61.61*1.79±0.67*20.11±11.29*0.79±0.17*1.59±0.87*组别时间CK（U/L）HDL-C（mmol/L）LDL-C（mmol/L）TG（mmol/L）TC（mmol/L）GLU（mmol/L）HbA1C（%）hs-CRP（mg/L）oxLDL（μg/L）sCD40L（pg/mL）MMP-9（ng/mL）IL-6（pg/mL）TNF-α（ng/L）CIMT（mm）

3　讨论

炎症反应贯穿于AS斑块形成、发展和破裂的全过程，hs-CRP是全身性炎症反应的非特异性的标志，可直接参与AS病变的形成、斑块破裂及血栓形成［6］。CD40属于肿瘤坏死因子受体超家族，CD40L属于TNF超家族。CD40L、CD40的相互作用贯穿AS发生发展的全过程，CD40L和CD40主要表达在AS损伤部位的巨噬细胞、血管内皮细胞、T细胞和平滑肌细胞上［7］。当内皮细胞功能损伤后CD40表达增加，与CD40L结合，可激活炎症反应、活化血小板、引发内皮功能障碍［8］，同时也促进MMP-9的产生，MMP-9可降解细胞外基质，最终加速AS的发生和发展。研究表明［9］：抑制sCD40L表达，可保护血管内皮功能、防止AS斑块的形成和发展、促进斑快的稳定。本研究结果发现：外周血清sCD40L、MMPs水平在两组用药后明显低于用药前、CIMT及斑块积分明显低于用药前，提示三七总皂苷、阿托伐他汀均可有效降低sCD40L、MMPs的表达，减轻炎症反应，保护血管内皮功能，抑制颈动脉内膜增厚及动脉粥样硬化斑块增大。

oxLDL易沉积于动脉内膜，引起血管内皮损伤、内皮细胞通透性增加、巨噬细胞的炎症反应和动脉中膜平滑肌细胞增生，最终导致动脉内膜脂纹、纤维斑块和（或）粥样斑块形成［10］。同时，oxLDL可刺激多种炎症因子如TNF-α、IL-6的表达，炎症介质共同介导单核-巨噬细胞和T淋巴细胞与内皮细胞的黏附，促进它们向血管壁的迁移，造成早期血管壁内皮细胞的损伤，加速AS炎症反应［11］。因此改善血管内皮功能及降低炎症标志物水平是预防AS的关键。本研究结果发现，两组用药后外周血清hs-CRP、IL-6、TNF-α水平、CIMI及斑块积分明显低于用药前，提示三七总皂苷可有效降低hs-CRP、IL-6、TNF-α的表达，减轻炎症反应，抑制颈动脉内膜增厚及AS斑块增大。

综上所述，本研究结果表明，长期服用三七总皂苷能有效降低AS患者血清炎症因子的表达，并能通过抑制CD40/CD40L活化，减少炎症因子的释放，从而减轻炎症反应，保护血管内皮细胞，抑制颈动脉内膜增厚及动脉粥样硬化斑块增大，延缓AS的进展。

［1］宋蕊，李婉秋，窦健霖，等.白藜芦醇可通过抑制核因子κB和丝裂原活化蛋白激酶信号通路抗兔动脉粥样硬化［J］.中华心血管病杂志，2013，41（10）：866-869.

［2］Tone A，Shikata K，Nakagawa K，et al.Renoprotecfive effects of elarithromycin via reduction of urinary MCP-1 levels in type 2 diabetic patients［J］.Clin Exp Nephrol，2011，15：79-85.

［3］张晓云，魏万林，田国祥，等.芪参益气滴丸对冠状动脉介入术后炎症因子及心脏不良事件的影响［J］.中国循证心血管医学杂志，2013，5（2）：167-169.

［4］郭钰琪，齐冬梅，郝钰，等.三七皂苷R1调节炎性T细胞亚群保护血管内皮的实验研究［J］.中国药理学通报，2012，28（2）：240-244.

［5］中国成人血脂异常防治指南制订联合委员会.中国成人血脂异常防治指南［J］.中华心血管杂志，2007，35（5）：390-419.

［6］彭隆，罗艳婷，刘金来，等.C反应蛋白对人外周血CD14+单核细胞TLR4信号转导的影响［J］.中国病理生理杂志，2011，27（1）：56-61.

［7］Durakoglugil ME，Kocaman SA，Cetin M，et al.Increased circulating soluble CD40 levels in patients with slow coronary flow phenomenon：an observational study［J］.Anadolu Kardiyol Derg，2013，13（1）：39-44.

［8］闫琰，赵革新，陈北冬，等.银杏内酯B抑制血小板CD40 Ligand表达的分子机制研究［J］.中国药理学通报，2012，28（2）：245-249.

［9］张晓云，魏万林，田国祥，等.芪参益气滴丸对冠状动脉介入术后炎症因子及心脏不良事件的影响［J］.中国循证心血管医学杂志，2013，5（2）：167-169.

［10］刘桂林，窦迎春，乔云，等.三七总皂苷对动脉粥样硬化血管内皮的保护作用［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2013，11（9）：1094-1096.

［11］Zhang B，Wu T，Chen M.The CD40/CD40L system：a new therapeutic target for disease［J］.Immunol Lett，2013，153（1-2）：58-61.

The Effect of Total Panax Notoginseng Saponins（tPNS）on Inflammatory Factor，Carotid Artery Intimal Medial Thickness（CIMT）and Atherosclerotic Plaque of Hyperlipidemia Patients with Atherosclerosis

JIANG Xiaoping，ZENG Fanpeng，LIU Shouming，et al.
Qingyuan Hospital of TCM，Guangdong Province，Guangdong，Qingyuan 511500，China

Objective：To study the effect of total panax notoginseng saponins（tPNS）on Inflammatory factor，carotid artery intimal medial thickness（CIMT）and Atherosclerotic plaque of hyperlipidemia patients with atherosclerosis.Methods：71 patients were divided random into 2 groups：TPNS group and atorvastatin group. Before and after medication，the levels of Serum hsCRP，oxLDL，sCD40L，MMPs，IL-6，TNF-α，CIMT and Atherosclerotic plaque were measured in 71 patients.Results：Before medication，the levels of Serum hsCRP，oxLDL，sCD40L，MMPs，IL-6，TNF-α，CIMT and Atherosclerotic plaque of both groups were not statistically significant.After 12 weeks′medication，the levels of Serum hsCRP，oxLDL，sCD40L，MMPs，IL-6，TNF-α，CIMT and Atherosclerotic plaque of both groups were significantly lower than those before medication.The side effects of medicine of both groups were not statistically significant.Conclusions：TPNS has a protective effect on vascular endothelium in hyperlipidemia patients with atherosclerosis.This effect is related to downregulation of serum hs-CRP，oxLDL level and the decrease of sCD40L，MMPs，IL-6，TNF-αexpression in hyperlipidemia patients with atherosclerosis.

Atherosclerosis；Total pannax notoginseng saponin（tPNT）；Soluble CD40 ligand

R543.5

A

1004-745X（2015）10-1753-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2015.10.020

2015-05-11）

广东省中医药局建设中医药强省科研基金资助项目（20121098）