联合检测GADA、ZnT8A和IA-2A对1型糖尿病的诊断价值

乔献伟

（河南省南阳市第一人民医院检验科，河南 南阳 473000）

联合检测GADA、ZnT8A和IA-2A对1型糖尿病的诊断价值

乔献伟

（河南省南阳市第一人民医院检验科，河南 南阳 473000）

目的 评价胰岛细胞GADA、ZnT8A、IA-2A三种自身抗体在1型糖尿病患者中的诊断价值。方法 1型糖尿病患者78例，其中男性50例，女性28例，发病年龄20～41岁；2型糖尿病患者80例，其中男性51例，女性29例，平均年龄40～70岁；105例健康者血清，采用免疫印迹法检测血清GADA、ZnT8A、IA-2A三种自身抗体。结果 1型糖尿病患者中，GADA、ZnT8A、IA-2A三种自身抗体阳性率分别为53.1%、24.1%、23.7%。1型糖尿病患者中，三种抗体阳性率均高于2型糖尿病患者和健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05）。三种抗体之间在1型糖尿病患者中阳性率有差异，提示1型糖尿病患者不同自身抗体出现在病程的不同阶段。结论 GADA、ZnT8A、IA-2A的检测对1型糖尿病的诊断具有一定价值，联合检测三种抗体具有互补性，可提高1型糖尿病诊断的灵敏度。

GADA；ZnT8A；IA-2A；1型糖尿病

近年的流行病学显示[1]，我国患糖尿病的人数约1亿，且发病率不断上升。目前糖尿病已严重危害人类健康，依其病因学可分为1型和2型。1型糖尿病发病原因是由于胰岛素的合成和分泌减少；2型糖尿病以胰岛素抵抗为主，同时伴有胰岛素分泌不足。明确地分型有利于疾病的治疗和预防。1型糖尿病是由于自身免疫介导的β细胞破坏，1型糖尿病患者体内在出现临床症状前，存在多种自身抗体，如：如谷氨酸脱羧酶自身抗体（GADA）、锌转运体8抗体（ZnT8A）、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体（IA-2A）等。现虽有文章报道胰岛相关抗体检测的临床意义，但由于研究样本含量多少不一，且在不同人群中检出率有差异。因此，本研究检测1型和2型糖尿病患者血清中GADA、ZnT8A、IA-2A的检出率与正常人群中检出率之间的差异，同时，比较1型和2型糖尿病患者血清中GADA、ZnT8A、IA-2A的检出率的差异，进一步揭示与胰岛相关的自身抗体检测对鉴别诊断1型糖尿病的意义。

1　材料与方法

1.1研究对象：研究对象为我院2011年3月至2013年8月收住我院的78例1型糖尿病。入选病例中，男性50例，女性28例；发病年龄20～41岁，平均年龄28.4岁，均符合1999年WHO糖尿病诊断标准，有酮症倾向者，并且依赖胰岛素治疗。2型糖尿病患者为同期我院门诊与住院患者80例，该组患者平均年龄51.4岁（40～70岁），其中男性51例，女性29例。入选病例均符合1999年WHO糖尿病诊断标准；初次确诊糖尿病距今3年内；排除继发性糖尿病半年内无酮症或酮症酸中毒发生。正常人群即健康组为同期在我院进行体检的健康者105例，男性69例，女性36例；平均年龄37.8岁（20～65岁）。

1.2标本留取：空腹抽取静脉血2 mL，排除样本中的可能含有溶血和高脂血，最迟2 h血清可分离完毕。

1.3检测方法：用免疫印迹法检测。使用免疫印迹试剂盒（深圳伯劳特生物制品有限公司）进行检测，其原理是抗原抗体反应，将GADA、ZnT8A、IA-2A特异性抗原包被硝酸纤维膜上，与被检样品中特异性的IgG抗体反应，形成抗原抗体复合物，之后与有抗人IgG的免疫酶试剂反应，依据显色条带进行判断结果。

1.4统计学处理：使用SPSS15.0软件进行统计分析，组间进行t检验，当P<0.05时，为差异具有统计学意义。

2　结 果

1型糖尿病组、2型糖尿病组和健康组GADA、ZnT8A、IA-2A检测阳性率比较显示：1型糖尿病组，三种抗体的阳性率依次为GADA＞ZnT8A＞IA-2A。1型糖尿病组中GADA、ZnT8A、IA-2A抗体检出率明显高于2型糖尿病组，P＜0.05。1型糖尿病组、2型糖尿病组GADA、ZnT8A、IA-2A检测均显著高于健康组（P＜0.05），见表1。

表1　1型糖尿病组、2型糖尿病组和健康组GADA、ZnT8A、IA-2A检测阳性率比较[n（%）]

3　讨 论

糖尿病是一种常见的慢性病，研究发现胰岛β细胞与糖尿病的发生关系密切，胰岛自身抗体作为胰岛β细胞免疫损伤，能够区别1型和2型糖尿病[2]。胰岛素自身抗体主要有GAD-Ab、ICA等。GAD65-Ab在糖尿病患者的病程发展稳定性较好，对于糖尿病的免疫治疗具有重要意义[3]。

Xiang等[4]研究发现ZnT8是1型糖尿病的又一主要自身抗原，其抗体在诊断和预防1型糖尿病方面，具有重要意义。ZnT8含369个氨基酸，属于CDF（阳离子扩散易化）家族，编码基因SLC30A8（染色体8q24.11）[5]。ZnT8 mRNA主要表达在胰岛细胞上，由激光共聚焦显微分析，提示ZnT8定位于胰岛β细胞分泌囊膜上。当前国际研究一致认为ZnT8通过影响锌离子浓度，从而在胰岛素合成与分泌中发挥重要作用[6]。

IA-2是又一个重要的胰岛细胞自身抗原，它的抗原决定簇局限于胞内结构域中，是以前发现的胰岛细胞40×103胰蛋白消化片段抗原的前体。IA-2自身抗体（IA-2A）不但是1型糖尿病诊断分型的一个依据，还在高危个体的预测筛查方面起积极作用[7]。

关于1型糖尿病GADA、ZnT8A、IA-2A的阳性率文献报道不一，本研究结果显示GADA、ZnT8A、IA-2A、联合检测的阳性率为分别为52.6%、24.4%、23.1%、65.4%，与国内外多数同类研究基本一致。

胰岛细胞抗体阳性的1型糖尿病患者需要尽早注射胰岛素治疗。多种抗体阳性的患者则更需要尽早注射胰岛素治疗。因此，选择适当的胰岛细胞自身抗体的联合检测，可以提高1型糖尿病的诊断率。对胰岛细胞抗体阳性的1型糖尿病患者，尽早采用胰岛素治疗保护胰岛功能，同时预防一些并发症是非常重要的。

总之，由于研究样本的不同差异，从而引起抗体阳性率发生变化，其统计学结果也不同，若要明确各型糖尿病与抗体之间的具体关系，还需要更大的样本进行实验，同时需要更加深入的基础研究。

[1] Yang W,Lu J,Weng J,et al.Prevalence of diabetes among men and women in China[J].N Engl J Med,2010,362(12):1090-1101.

[2] 董喜环.自身抗体在成人隐匿性自身免疫性糖尿病中的诊断价值[J].中国现代医生,2009,47(15):49-50.

[3] 姜海红,刘海彤,习迎斌,等.初发2型糖尿病检测胰岛自身抗体的临床意义[J].中国医疗前沿,2009,4(19):28-29.

[4] Xiang J,Li XY,Xu M,et al.Zinc transporter-8 gene (SLC30A8) is associated with type 2 diabetes in Chinese[J].J Clin Endocrinol & Metab,2008,93(10): 4107-4112.

[5] Gohlke H,Fen'aft U,Koczwara K,et a1.SLC30A8(ZnT8)Polymorp hism is Associated with Young Age at Type l Diabetes Onset[J]. Rev Diabet Stud,2008,5(1):25-27.

[6] Janet MW,Ong M.Identification ofa Major Humoral Epitope in.S1c30A8(ZnT8)[J].Ann N Y Acad Sci,2008,1150:252-256.

[7] 周薇,杜静,陆红,等.胰岛细胞自身抗体对1型糖尿病诊断价值的研究[J].国际检验医学杂志,2012,33(14):1690-1691.

R587.1

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1671-8194（2015）35-0062-02