油葵饼粕中绿原酸的乙醇浸提研究

朱浙辉　巩发永

摘 要：为了优化油葵饼粕中绿原酸的醇提工艺，探讨浸提时间、浸提温度、固液比对绿原酸提取率的影响。结果表明：在试验条件限定的范围内，对浸提率影响的主次顺序为温度>固液比>时间。根据各因素不同水平下的绿原酸提取率可知，浸提时间30 min、温度60℃、固液比1：40最合适。

关键词：绿原酸 油葵饼粕 乙醇 浸提

中图分类号：Ts275 文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2015）07（a）-0123-02

绿原酸是一种有着广泛生物活性的苯丙素类化合物，有一定的抗菌、抗病毒、降压降脂、抗衰老和抗肿瘤等生物活性、药理作用[1-3]，在食品生产、日用化妆等行业还可作为酚型抗氧化剂使用，有较高的应用价值[4]。国外提取绿原酸，原料多为咖啡豆、金银花等，价格偏高，资源也较少[5]。油葵（油用向日葵）是我国重要的油料作物，绿原酸含量较高，约为2.0%～3.5%[1，6]。从油葵饼粕中提取绿原酸可以增加油葵的综合利用价值，促进油葵产业的发展。

1 实验部分

1.1 仪器设备

TU-1901紫外可见分光光度计（北京普析通用）；BS224S电子分析天平（德国赛多利斯）；TE601-L电子天平（德国赛多利斯）；SHZ-III循环水真空泵（上海亚荣）；恒温水浴锅（上海一恒）；ELIX5纯水机（美国Millipore）；WK-150小型超微粉碎机（青州市精诚机械）；Research Plus单道可调量程移液器（德国Eppendorf）；浸提设备和常规玻璃仪器。

1.2 材料试剂

油葵籽脱脂饼粕（产地四川，干燥脱脂粉碎备用）；绿原酸标准品（25%，金银花提取物）；95%乙醇（分析纯）。

1.3 试验方法

1.3.1 波长扫描

波长的选择：精密称取0. 0200g绿原酸标准品，用95%乙醇定容至50 mL，作为储备液，浓度为0.4 mg/mL。从中准确吸取1.0 mL定容至25 mL。用紫外分光光度计对溶液进行光谱扫描，根据波长扫描图确定最高吸收峰对应的波长值为328 nm。

1.3.2 标准曲线

从储备液中分别移取1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL用95%乙醇定容于25 mL容量瓶中，得到浓度分别为0.016mg/mL、0.024、0.032、0.040、0.04、0.056 mg/mL的标准溶液。以空白作参比，于波长328 nm处测定标液系列吸光度。并以吸光度X为纵坐标，绿原酸浓度Y为横坐标，由计算机生成标准曲线并得出相关系数为R2=0.9984，得到回归方程为Y=9.1975X-0.0045。

1.3.3 样品分析

称取5.0 g样品，加入一定量乙醇溶液在设定条件下提取、过滤，得到滤液并定容至100 mL，用移液器精密吸取50 μL，按1.3.2方法测定，并按照公式计算试验后绿原酸提取率：绿原酸提取率=×100%

1.3.4 乙醇浸提的单因素试验

单因素试验，分别以浸提时间、固液比、浸提温度这三个因素的五个水平进行试验设计，从而确定各因素在试验条件下的最佳浸提水平，确定固液比和温度，时间设为15、20、25、30、35 min；确定时间和温度，固液比设为1：30、1：40、1：50、1：60、1：70；确定时间和固液比，温度设为40、50、60、70、80 ℃。

1.3.5 正交试验设计

在提取条件单因素试验的基础上，对浸提时间、固液比、浸提温度进行试验设计，因素情况见表1。

2 结果与讨论

2.1 单因素提取设定对绿原酸提取情况的影响

2.1.1 浸提时间设定试验

由图2可明确看出，在一定的固液比和浸提温度条件下，且在一定的范围内，绿原酸提取率和浸提时间呈正相关，并在浸提30min后达到最大值，之后随着时间的延长溶解已趋饱和。在一定时间内，增加浸提时间，绿原酸含量呈正相关比例增加；不过随着时间的继续增加，绿原酸会氧化分解，不适合继续操作。

2.1.2 固液比设定试验

由图3可看出，在相同的浸提温度和浸提时间下，在一定范围内，绿原酸提取情况与固液比呈正相关，且在固液比为1：40时，绿原酸提取达到峰值，以后随着固液比的增加提取率变化不大，且继续提高固液比，提取液蒸发比例高，会导致溶剂成本增加。

2.1.3 浸提温度设定试验

由图4 可看出，在相同的浸提时间和固液比下，在一定范围内，绿原酸的提取率与浸提温度呈正相关，且在浸提温度在60℃时达到最大值，随着温度继续增加提取率有所下降，提取率受温度影响显著。升高温度，分子热运动加快，溶解度增加。不过绿原酸具有热敏性，高温会导致其发生分解，并造成有机溶剂快速挥发。

2.2 正交试验结果比较

正交试验安排及结果见表2，各设定因素对绿原酸提取情况影响的主次顺序为温度﹥固液比﹥时间，其最优组合是A3B2C1，即浸提时间30 min、温度60℃、固液比1：40最合适。

3 结语

在乙醇浸提单因素设定试验的数据上，通过正交试验设计优化浸提条件为：时间30 min、温度60℃、固液比1：40。该方法具有操作比较简单、提取时间较短、浸提条件温和等特点。从油葵饼粕中提取绿原酸，很好的解决了油葵的综合利用问题，创造出附加产值，具有应用前景。

参考文献

[1] 刘军海，裘爱泳.绿原酸的提取分离及含量测定[J].中国油脂，2005（3）：54-56.

[2] 向智男，宁正祥.金银花中绿原酸的提取及纯化方法比较[J].林产化学与工业，2006（1）：116-120.

[3] 陈晓娟，周春山.酶法及半仿生法提取杜仲叶中绿原酸和黄酮[J].精细化工，2006（3）：257-260.

[4] 田江惠，麻成金，等.葵花籽绿原酸超声波辅助提取研究[J].食品与发酵科技，2009（1）：27-29.

[5] 彭密军，周春山，钟世安，等. 制备型高效液相色谱法分离纯化绿原酸[J]. 中南大学学报（自然科学版）， 2004（3）：408-412.

[6] 陈少洲，吕飞杰，台建祥.葵粕中绿原酸的研究进展与应用前景[J].食品与发酵工业，2002（11）：51-54.