乳香醋制工艺的正交优化及验证试验研究△

牛超，张会敏

(1.济南市第八人民医院，山东 济南 250014；2.山东省中医药研究院，山东 济南 250014)

·中药工业·

乳香醋制工艺的正交优化及验证试验研究△

牛超1，张会敏2*

(1.济南市第八人民医院，山东 济南 250014；2.山东省中医药研究院，山东 济南 250014)

目的：优选乳香最佳醋制工艺，制定乳香醋制规范。方法：以内在质量和传统外观质量为指标，采用L9(34)正交试验，对炒制时间、炒制温度、投料量、用醋量4个因素进行考察。结果：醋制乳香最佳工艺为取乳香300 g，于140 ℃不停翻炒9 min，至表面微熔时，喷淋5%米醋15 mL，再翻炒1 min，至醋液被吸尽，呈油亮光泽时，迅速出锅，放凉。结论：优选得到的乳香醋制工艺合理可行，可用于制定乳香醋制工艺规范，指导醋乳香的规范化生产。

乳香；醋制工艺；正交试验；乙酸辛酯

乳香为常用树脂类中药，具有活血化瘀、消肿止痛、祛腐生肌的功能[1]，临床用药多为醋炙品。研究表明乳香中的主要有效成分为挥发油类，乙酸辛酯占乳香挥发油的主要成分[2-4]。目前，虽然对乳香炮制工艺研究的报道较多，但多数文献单独以挥发油、树脂、树胶的变化或镇痛试验等作为优选指标，存在很多缺陷。《中华人民共和国药典》2010版[1]、《全国中药炮制规范》及全国大多数地方规范中都将醋制法作为乳香炮制方法之一，但各地对醋制乳香质量要求不一，炒制程度各异，没有全国统一使用的详细工艺参数。醋制乳香的质量主要受投料量、炒制温度、炒制时间、用醋量等因素的影响。本研究以传统外观质量和内在质量为指标，用正交设计法考察以上诸因素对醋制乳香质量的影响，确定醋制乳香的最佳工艺参数。

1 仪器与试药

1.1 仪器

HP-6890气相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司)；FID检测器；毛细管色谱柱H PINNOWAX(30 m×0.53 mm，1.0 μm)；AG245电子天平(METTLER TOLEDO)；CYY-600自控温燃油炒药机(台州市春江制药有限公司)；中药炮制控温炉(哈尔滨市测电器厂)；红外温度仪ST80(美国雷泰)。

1.2 试药

乙酸辛酯、茴香醛(中国食品药品检定研究院，批号分别为111671-200401，110838-200504)；无水乙醇(色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司，批号：20070103)；米醋(北京龙门和田宽食品有限公司，其总酸量不低于39.5 g·L-1)；乳香(埃塞俄比亚)。

2 方法与结果

2.1 乳香醋制工艺正交试验设计

用炮制控温炉反复多次预试，同时测试、记录炒制时间、炒制温度、投料量、加醋量等参数水平。在此基础上，选择了影响乳香醋制工艺和质量的4个考察因素，以传统外观质量标准及挥发油含量、乙酸辛酯含量作为评价指标，以综合评分的方法，进行4因素、3水平的L9(34)正交试验，对结果进行方差分析，优选出科学、合理的乳香醋制工艺，见表1。

表1 乳香醋制工艺因素水平表

2.2 醋制乳香质量评价指标评定

为全面客观反映乳香醋制工艺中各个因素对醋乳香质量的影响，本试验以传统外观质量和乳香的主要有效部位及指标性成分(挥发油、乙酸辛酯)的含量作为评价指标，采用综合质量评分法对各样品进行评价。

外观质量评定依据：主要凭借评审专家或同行的实践经验，根据醋炒样品的外观颜色、气味、质地、炮制过程中烟雾对人的刺激性等指标进行评分，以百分计。

内在质量评定依据：醋制乳香一是为了去油，二是为了减毒增效。乳香挥发油是乳香的主要成分之一，具有较好的镇痛作用，但毒性比较大[6]，醋制不仅能减少和掩盖挥发油的刺激性和不良气味，消除对胃肠道的恶心呕吐等副作用，还能引药入肝经。乙酸辛酯是乳香挥发油的主要成分，占乳香挥发油40%左右。故本文选用挥发油、乙酸辛酯作为内在质量评价指标。

内在质量评分：本试验平行进行3次，每次得到1组数据，每组中最低者定为20分，最高者定为100分。其他以下式计分：得分=20+80×(含量-最低含量)/(最高含量-最低含量)。以相同方法计算挥发油、乙酸辛酯含量得分。

综合质量评分：传统外观质量和内在质量评价对醋乳香有同等重要的意义，因此传统外观评分的加权系数为0.5，挥发油含量及乙酸辛酯含量的加权系数均为0.25。综合评分以下式计算：综合质量评分=传统外观评分×0.5+挥发油×0.25+乙酸辛酯×0.25。

2.3 挥发油含量测定

取样品20 g，精密称定，照《中华人民共和国药典》2010版一部(附录ⅩD甲法)中乳香“含量测定”项下方法对醋乳香样品进行测定。

2.4 乙酸辛酯含量测定

具体方法参照文献[5]。

2.5 乳香醋制工艺优选的正交试验结果

根据正交设计法要求，按照因素水平表的设计制备了9种醋制乳香样品。本试验平行进行3次。严格按照此标准对正交试验得到的炮制品进行评分，见表2～3。

表2 各醋制样品外观质量得分及挥发油、乙酸辛酯含量测定结果(n=3)

表3 乳香醋制工艺方差分析表

注：r=0.959(校正r=0.941)

正交试验结果表明，在本试验条件下，4个因素都有显著的影响，再将4个具有显著影响的因素进行两两比较检验，选择Duncan法计算，得到醋制乳香的最佳工艺参数组合为A2B2C3D2，即300 g乳香，于140 ℃时不停翻炒9 min，至表面微熔时，喷淋5%米醋15 mL，再翻炒1 min，至醋液被吸尽，呈油亮光泽时，迅速出锅，放凉即得。在上述因素中，炒制时间和炒制温度对醋炒乳香的影响最大，其次是加醋量与投料量。

3 验证试验

对正交试验优选出的最佳工艺参数进行验证试验，结果见表4。

表4 乳香醋制验证试验结果

4 讨论

4.1 指标的选择

因乳香中的主要成分挥发油、树脂、树胶均有较好的活血化瘀、镇痛作用，故对乳香的炮制贵在适中，尽量减少破坏与损失，单独以挥发油、树脂、树胶的变化或镇痛试验作为优选指标不妥，笔者根据传统经验及《中华人民共和国药典》2010版一部乳香项下规定，采用乳香炮制品外观质量与内在质量相结合的“综合质量评分”为指标，对诸因素水平下加工的醋炒乳香进行打分，测定其挥发油及乙酸辛酯的含量，并对数据进行统计学处理，确定出醋制乳香的最佳工艺参数。3批验证试验结果表明，确定的工艺条件操作简便，合理可行，能制备出质量可控的醋制乳香，可用于指导醋制乳香的规范化生产。

4.2传统外观质量评价指标是长期实践经验总结，是目前单一化学成分和化学部位不能替代和阐释的评价指标，传统外观质量和内在质量具有同等重要意义，故综合质量评分将传统外观质量和内在质量评价赋以相同加权系数。此外，现代药理研究显示，不同化学成分的药理作用不同，侧重点不同，难分轻重，故赋以相同加权系数。本研究根据全国中药炮制规范、各地炮制规范等相关评定标准以及老药工炮制经验进行现场评分，然后进行化学成分的测定。将外观得分及化学成分含量测定结果按照“综合质量评分”公式计算，再进行方差分析，优选的结果与外观质量评分最高者一致，说明本文中“综合质量评分”方法具有一定的科学性、合理性。

4.3设备与工艺参数的关系问题

目前全国使用的炒药设备种类较多，有沿用传统型的，有改进传统型的，也有现代新研制的。各种设备大小不同，加热用热源也不同，因而各种设备的炒制时间、投料量均有较大差别。另外，研究发现在炒制温度恒定时，投料量与炒制时间应呈正相关关系，即外观质量标准相同时，投料越多，炒制时间应越长。本研究优选出的工艺参数可为其他设备参数设置提供参考。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：207.

[2] 刘青，于宗渊.气相色谱法测定乳香挥发油中乙酸辛酯的含量[J].时珍国医国药，2007，18(6)：1416.

[3] 卢兖伟，王琦，李胜群，等.气质联用法分析炮制对乳香挥发油的影响[J].中成药，1996，18(11)：20-22.

[4] 宋光林，郭峰，曾广铭，等.乳香中乙酸辛酯含量的测定[J].贵州科学，2008，26(1)：57-60.

[5] 张会敏，王萌，郭长强.全国5个不同地区乳香醋炙前后乙酸辛酯的含量变化[J].长春中医药大学学报，2011，27(1)：10-12.

[6] 殷玉生，刘产明.乳香炮制方法的探讨[J].中药通报，1986，11(10)：22-24.

OptimizationandValidationofStir-bakingwithVinegarTechnologyforOlibanumbyOrthogonalTest

NIUChao1，ZHANGHuimin2*

(1.TheEighthPeople'sHospitalofJinan，Jinan250014，China；2.ShandongAcademyofChineseMedicine，Jinan250014，China)

Objective：To optimize the stir-baking with vinegar technology for Olibanum by orthogonal test，and establish a manufacturing practice.Methods：The intrinsic quality and traditional appearance were chosen as indexes.The four factors of the stir-baking time，stir-baking temperature，adding weight and vinegar volume were investigated by L9(34)orthogonal test.Results：The optimal technology was as follows：Take Olibanum 300 g at 140 ℃ constantly stir fry for 9 minutes，when the surface is micro welding，spraying 15 mL 5% vinegar，then stir fry for 1 minutes，until vinegar is soaked and Olibanum appears to have glossy sheen，then put it out of the pot quickly，cool down.Conclusion：The optimal stir-baking with vinegar technology for Olibanum is reasonable and feasible.It can be used for manufacturing practice and guide the standardized production for Olibanum stir-baking with vinegar.

Olibanum；stir-baking with vinegar technology；orthogonal test；octyl acetate

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.3.014

2014-07-09)

《山东省中药饮片炮制规范》——醋乳香

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张会敏，硕士，研究方向：中药化学、中药炮制；E-mail：huiminzhang@163.com