茯苓对正常小鼠胃肠功能的影响△

冉小库，孙云超，刘霞，陈静，李斌，窦德强

(辽宁中医药大学 药学院，辽宁 大连 116600)

·基础研究·

茯苓对正常小鼠胃肠功能的影响△

冉小库，孙云超，刘霞，陈静，李斌，窦德强*

(辽宁中医药大学 药学院，辽宁 大连 116600)

目的：采用不同模型考察茯苓对正常小鼠胃肠功能的影响。方法：采用炭末法和营养型半固体糊两种方法，考察茯苓不同给药时间对小鼠胃残留率和小肠推进率的影响。结果：茯苓水煎液对正常小鼠的胃残留、小肠推进具有抑制作用。结论：茯苓水煎液对正常小鼠胃肠运动有抑制作用，而且采用多次给药的营养半固体糊方法评价茯苓对小鼠胃肠功能影响较佳。

茯苓；胃排空；小肠推进

茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poriacocos(Schw.)Wolf的干燥菌核，味甘、淡，性平，归心、肺、脾、肾经，具有利水渗湿、健脾、宁心的功能[1]。作为药食两用的中药，茯苓在中国已有2000多年的使用历史，在春秋末期的诗经中早有记载，20世纪20年代以来，我国茯苓就畅销东南亚、日本、欧美，享誉海外，经久不衰[2]。有些国家还将茯苓作为海军的食物及滋补品，用以健脾去湿，安神壮体。有关茯苓健脾作用的研究多是采用脾虚泻下模型[3]。近期我们对茯苓的性味组分拆分和镇静、增强学习记忆作用进行研究[4]。茯苓对正常动物胃肠功能影响的研究未见报道，本文研究茯苓对正常小鼠胃排空、小肠推进的作用，为进一步阐明茯苓的健脾作用以及茯苓在食品、保健品中的应用提供理论基础。

1 材料

1.1 动物

昆明种小鼠，体重18～22 g，雌雄各半，大连医科大学动物中心，合格证号：SCXK(辽)2008-0002。

1.2 药物与试剂

茯苓于2012年11月购自云南向辉生物科技有限公司，经辽宁中医药大学药用植物教研室王冰教授鉴定为多孔菌科真菌茯苓Poriacocos(Schw.)Wolf的干燥菌核。

吗丁啉(西安杨森制药有限公司，批号：120913731)；0.9%氯化钠溶液(黑龙江科伦制药有限公司，批号：12060201-2)；活性炭(沈阳新兴试剂厂，生产日期：2011年6月19日)；阿拉伯树胶粉(天津市科密欧化学试剂有限公司，批号：20120410)；其他试剂均为分析纯。

1.3 仪器

RE-85Z型旋转蒸发器、SHZ-DⅢ型循环水真空泵、HH-S型水浴锅(巩仪市予华仪器责任有限公司)；FA-1004电子天平(上海精科天平厂)。

1.4 药物制备

1.4.1 茯苓水煎液的制取 按《中国药典》中茯苓用量为本实验设计的1倍剂量。称取茯苓生药200 g，10倍量水充分煎煮2次，趁热抽滤，合并上清液，浓缩为1.25 g·mL-1(10倍)的茯苓水煎液，备用。

1.4.2 阳性药配制 取吗丁啉10 mg，加1%聚山梨酯-80适量配成0.5 mg·mL-1溶液。

1.4.3 营养性半固体糊的制备 制备方法参照文献方法[5]，具体如下：羧甲基纤维素钠10 g，溶于250 mL蒸馏水中，分别加入16 g奶粉、8 g糖、8 g淀粉和2 g活性炭末，搅拌均匀，配制成300 mL约300 g的黑色半固体糊状物。

1.4.4 5%炭末混悬液配制 称量阿拉伯树胶3.5 g，加水至30 mL，煮沸至溶液透明，再称量活性炭末1.75 g，加入上述溶液中，煮沸3次，待溶液凉后，加水定容至35 mL，即得[6]。

2 方法

2.1 小鼠胃肠运动的评价模型研究

2.1.1 茯苓水煎液单次给药模型 昆明小鼠50只随机分为空白组，茯苓水提液低剂量组(0.1倍)、中剂量组(1倍)、高剂量组(10倍)，阳性药吗丁啉组，每组10只。各组分别灌胃给药0.2 mL·(10 g)-1，再进行胃残留率和小肠推进率实验。

2.1.2 茯苓水煎液连续给药模型 昆明小鼠50只随机分为空白组，茯苓水提液低剂量组(0.1倍)、中剂量组(1倍)、高剂量组(10倍)，阳性药吗丁啉组，每组10只。各组连续灌胃给药或0.9氯化钠溶液0.2 mL·(10 g)-1，7 d后进行胃残留率和小肠推进率实验。

2.2 胃残留率及小肠推进率测定方法(营养型半固体糊法)

末次给药后30 min，各组小鼠灌胃半固体糊0.4 mL·(10 g)-1，20 min后脱颈椎处死动物，开腹，结扎胃贲门和幽门[7]。取胃用滤纸拭干后称全重，然后沿胃大弯剪开胃体，洗去胃内容物后用滤纸拭干，称胃净重，胃全重和胃净重差值为胃内残留物重，其与所给糊重的比为胃内残留率。同时迅速取出小肠，轻轻剥离后直铺于白纸上，测量幽门至回盲肠部全长及幽门至黑色半固体糊前沿的距离。以幽门至黑色半固体糊前沿的距离占幽门至回盲肠部全长的百分率为小肠推进率。

2.3 小肠推进率测定方法(炭末法)

给药后30 min，各组小鼠灌胃5%炭末混悬液，0.2 mL·(10 g)-1，20 min后脱颈椎处死动物，开腹，结扎胃贲门和幽门，同时迅速取出小肠，轻轻剥离后直铺于白纸上，测量幽门至回盲肠部全长及幽门至黑色半固体糊前沿的距离。以幽门至黑色半固体糊前沿的距离占幽门至回盲肠部全长的百分率为小肠推进率。

2.4 统计方法

3 结果

3.1 茯苓水煎液单次给药对胃残留率和小肠推进率的影响(营养型半固体糊法)

由表1可知，与空白组比较，茯苓低剂量组(0.1倍)胃残留率差异有统计学意义(P<0.01)，表明茯苓0.1倍剂量有抑制胃排空作用，而茯苓中、高剂量虽然较空白组胃排空率增高，但并没有统计学意义。与空白组相比，茯苓低、中、高剂量组的小肠推进率差异都有统计学意义(P<0.05)，表明茯苓水煎液对正常小鼠的小肠抑制作用明显。

表1 茯苓水煎液单次给药对胃残留率和小肠推进的影响 (%)

注：与空白组相比，*P<0.05，**P<0.01；下同。

3.2 茯苓水煎液单次给药对小肠推进率影响(炭末法)

由表2可知，与空白组比较，茯苓水煎液0.1倍、1倍、10倍剂量组对小鼠小肠推进率差异有统计学意义(P<0.05)，即说明茯苓水煎液各剂量均有抑制小肠推进的作用。

营养型半固体糊法和炭末法测小肠推进率结果相同，说明实验结果具有准确性，营养型半固体糊法不仅可以测量小肠推进而且还可以反映胃残留率情况，因而在接下来实验中选用营养型半固体糊法对胃残留率和小肠推进进行实验。

表2 茯苓水煎液单次给药对小肠推进的影响

3.3 茯苓水煎液连续给药对胃残留率和小肠推进率影响(营养型半固体糊法)

由表3可知，与空白组比较，茯苓水煎液低、中剂量组对小鼠胃残留量差异有统计学意义(P<0.05)，而茯苓高剂量组对小鼠胃残留量差异无统计学意义(P>0.05)，即说明茯苓水煎液低、中剂量组有抑制胃排空的作用，随着剂量的增大作用有所降低，茯苓高剂量组对胃排空抑制作用不明显。与空白组比较，茯苓水煎液低、中、高剂量组小肠推进率的差异有统计学意义(P<0.01)，表明茯苓低、中、高剂量均对小鼠小肠推进有明显抑制作用。

表3 茯苓水煎液连续给药对胃残留率和小肠推进率影响 (%)

连续多次给药方法更符合茯苓的临床应用和中药的特点，应该更能够反应茯苓的实际临床作用。

4 讨论

单次给药茯苓水煎液，低剂量抑制胃排空；连续给药茯苓水煎液，低、中剂量抑制胃排空，茯苓高剂量对胃排空抑制作用不明显。说明低剂量茯苓水煎液对胃排空抑制作用稳定明显，连续给药随着剂量的增加抑制排空效果减弱。单次给药茯苓水煎液低、中、高剂量对小肠推进有明显抑制作用，而连续给药茯苓水煎液低、中、高剂量均对小肠有极明显作用，说明茯苓水煎液对抑制小肠推进作用确切，在一定时间内给药时间延长作用效果越明显。一般中药临床上需要连续多次给药，才能体现中药的作用。所以茯苓多次给药对胃肠功能的作用更能够反应其临床功效。

脾“主运化，水谷精微”，为“后天之本，气血生化之源”。《注解伤寒论》曰：“脾，坤土也。脾助胃气消磨水谷，脾不转，则胃中水谷消磨。”说明中医脾的功能主要是影响物质消化和吸收，这与现代科学的胃肠功能有着密切的联系。

茯苓具有利水渗湿、健脾、宁心的功能，能健脾渗湿而止泻，尤宜治脾虚湿盛泄泻，说明茯苓具有健脾利水的作用。采用脾虚模型研究表明茯苓具有健脾作用，其中茯苓三萜类有效改善脾虚表观症状[8]，另有研究表明茯苓水煎液具有抑制脾虚模型大鼠小肠推进功能[9]。

胃肠运动在食物消化吸收中起着重要作用，既能运送食物、研磨食物，使食物与消化液充分混合，使食物转变成易溶解和可被吸收的形式；又能使食物与消化管壁紧密接触，以便吸收。茯苓为四君子汤中的一味主要中药，四君子汤对胃肠运动的作用，报道颇不一致，大多数学者认为四君子汤抑制胃肠运动，使食物在肠道停留时间延长，利于食物的消化吸收[10]。但究竟四君子汤中哪味中药发挥抑制作用未见报道。本实验研究表明茯苓对正常小鼠的胃肠运动具有抑制作用，说明茯苓能抑制正常动物的胃肠排空，在一定程度上增加胃肠道与食物接触时间，有利于吸收。但一个有趣的现象是，无论采用何种模型方法，茯苓低、中、高剂量抑制胃肠食物排空的功效相当，抑制胃排空和小肠推进都未大幅度改变，即茯苓对胃肠运动的抑制作用达到一定阈值后不再增高。这说明长时间服用茯苓不会造成胃肠运动过慢，影响食物排泄。本实验对动物的粪便进行观察，没有发现特别干燥的粪便，说明即使茯苓抑制胃肠蠕动也不至于引起便秘。一般来说胃肠运动过快或过慢均不利于食物的消化吸收，胃肠运动过快，食物在肠道停留时间过短，不利于消化吸收；胃肠运动过慢，缺乏动力，不仅不利于食物的运送、研磨，而且不利于食物与消化液的混合、肠壁的接触，从而影响消化吸收[11]。

茯苓作为药食两用资源，既能健脾，又能渗湿，是一种较为常用的中药。有关茯苓对正常动物和脾虚动物胃肠功能抑制作用的活性组分还有待于进一步研究。

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EffectofPoriaonGastrointestinalFunction

RANXiaoku，SUNYunchao，LIUXia，CHENJing，LIBin，DOUDeqiang*

(CollegeofPharmacy，LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Dalian116600，China)

Objective：To study the effect of Poria cocos on gastrointestinal movement by different methods.Methods：Methods of charcoal powder and nutritional semisolid paste were applied to examine the effect of Poria on the gastrointestinal functions of healthy mice.Results：The water decoction of Poria can distinctively inhibited the gastric residual ratio and propulsion ratio of small intestine of mice.Conclusion：The Poria could inhibit the gastrointestinal movement and the semisolid paste model is much more suitable for the evaluation of effect of Poria on the gastrointestinal functions.

Poriacocos；gastric emptying；intestinal propulsion

2014-12-12)

国家重点基础研究计划(973计划)项目(2013CB531803)，2013辽宁省高等学校创新团队课题(LT2013020)

*

窦德强，博士，教授，研究方向：中药化学和新药研发；Tel：(0411)85890186，E-mail：deqiangdou@126.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.7.010