空心苋质量标准初步研究

曾祥燕，颜萍花，唐玉荣，蔡毅（广西中医药大学，广西 南宁　530001）

空心苋质量标准初步研究

曾祥燕，颜萍花，唐玉荣，蔡毅
（广西中医药大学，广西 南宁530001）

摘要：［目的］对空心苋质量标准进行初步研究。［方法］通过生药学鉴别研究，并按照2010年版《中华人民共和国药典》附录方法对空心苋的水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物含量等进行测定。［结果］建立了空心苋的生药学鉴别方法，初步拟定其水分不得超过15%，总灰分低于23%，酸不溶性灰分小于4%，水溶性浸出物含量大于30%。［结论］所建立的方法可为空心苋药材质量标准的制定提供实验依据。

关键词：空心苋；质量标准；生药学

空心苋，又名空心蕹、水花生、过塘蛇、水马齿苋、肥猪菜、喜旱莲子草、空心莲子草等，来源于苋科植物空心苋Alternanthera philoxeroides（Mart）Griseb的全草，具有清热、凉血、解毒功效，内服可用于乙脑、流感初期、流行性出血性结膜炎、肺结核咯血，外用可治湿疹、带状疱疹、疔疮、毒蛇咬伤等疾病［1］。现代研究表明空心苋含有甾醇、三萜、皂苷和黄酮类等化学成分［2-5］，并具有抑菌、抗病毒、抗甲型H3N2流感病毒和抗呼吸道合胞病毒等药理作用［6-11］。本文通过对其进行生药学初步研究，旨为其质量标准的建立提供实验依据。

1　试药与仪器

1.1试药空心苋采于广西各地，经广西中医药大学蔡毅教授鉴定为苋科植物空心苋Alternanthera philoxeroides（Mart）Griseb.的全草；薄层层析硅胶G（化学纯，青岛海洋化工公司）；其余试剂均为化学纯；水为纯净水。

1.2仪器Leica Miccrosystems（德国莱卡仪器公司，型号: DFC500）；Leica光学显微镜（德国莱卡仪器公司，型号: DM2500）；自动轮转切片机（德国莱卡仪器公司，RM2145）；上皿电子天平（上海精科天平，型号:FA1104）；超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司，型号:KQ5200B）。

2　生药学鉴别

2.1药材性状鉴别全草长短不一，扁茎圆柱形，有纵直条纹，表面黄棕色；茎节处簇生白色绒毛和棕褐色须状根；断面中空。叶对生，皱缩卷曲，两面均具疏生短毛。偶见头状花序单生与叶腋，具总花梗；花白色。气微，味微苦涩。

2.2显微鉴别

2.2.1茎横切面类圆形。表皮细胞1列，类长方形，排列紧密，外被角质层，可见气孔及非腺毛；厚角细胞2～3列，成不连续的环状。皮层由4～10列薄壁细胞组成，细胞类圆形或椭圆形，排列疏松。维管束外韧型，8～15个，大小不等，排列成环。韧皮部狭窄，由韧皮薄壁细胞和筛管组成，外侧可见纤维束。形成层明显，束间形成层内方有1～6列厚壁的木化细胞，与木质部外侧的木化细胞连接成环状。木质部由木薄壁细胞和导管等组成，管径较大，近圆形，内侧的木薄壁细胞壁未木化。髓部宽广，细胞较大，常形成空腔。皮层和髓部散在有异形细胞，内含草酸钙簇晶。见图1、图2。

图1　空心苋茎横切面详图

图2　空心苋茎横切面放大示意图

2.2.2叶横切面上表皮细胞1列，类圆形或长方形，外被角质层；下表皮细胞较小，可见气孔及非腺毛。栅栏细胞圆柱形，1～2列，不通过主脉；海绵细胞3～4列，排列疏松；两组织间散在有异形细胞，内含草酸钙簇晶。主脉处有3个外韧型维管束，木质部在上方，韧皮部在下方。上下表皮内具1~数列厚角细胞。见图3。

图3　空心苋叶横切面详图

2.2.3叶表面片上表皮细胞垂周壁平直或微波状，可见直轴式气孔及两种多细胞非腺毛，一种短小，似蚕形；另一种较长，约由3～5个细胞构成，具疣状突起。下表皮细胞垂周壁波状弯曲，气孔较多，亦见两种非腺毛。见图4。

图4　空心苋叶表面图

2.2.4全草粉末特征非腺毛易见，一种似蚕形，约由6～8个细胞构成，微弯曲，壁薄，粗短，先端钝圆或钝尖，长62～117μm，直径18～38 μm，内含浅棕色物；另一种非腺毛细长，约由3～5个细胞构成，长160～380 μm，先端渐尖，近基部短小，近顶端细胞长大，壁增厚，具疣状突起。气孔为直轴式。大量草酸钙簇晶散在，直径为46～100 μm。亦见草酸钙方晶，直径为19～100 μm。导管为螺纹导管和梯纹导管，壁多木化。纤维束碎片易见。见图5。

图5　空心苋粉末显微特征图

2.3薄层鉴别

2.3.1薄层色谱条件的筛选

2.3.1.1提取溶剂的选择取对照药材（KXX-1）适量，分别加入乙酸乙酯、甲醇、50%乙醇、水等4种不同极性的溶剂进行提取，最终以乙酸乙酯提取液所得薄层色谱图斑点最明显。

2.3.1.2提取方法的选择取对照药材（KXX-1）适量，分别考察冷浸12 h、超声提取30 min、水浴回流30 min等3种不同提取方法，结果表明3种方法所得薄层色谱图基本一致，其中以超声提取30 min最为省时简便，故选定为提取方法。

2.3.1.3药材取样量的选择取对照药材（KXX-1）粉末3份，分别为0.5 g、1 g、2 g，分别加入乙酸乙酯各20 ml，超声提取30 min制备供试品溶液。结果表明，药材取样量为0.5～2 g时，均可检视到3个斑点。但取样量为0.5 g时，主斑点显色不够清晰，取样量为2 g时，主斑点略有拖尾；只有取样量为1 g时，主斑点较集中且明显，故药材取样量采用1 g。

2.3.1.4展开剂的选择分别以对环己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（9∶3.5∶1∶0.5）、环己烷-三氯甲烷-甲醇-甲酸（9∶3.5∶1∶0.5）、环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（12∶3.5∶2.5∶1∶0.5）等展开系统进行试验，结果显示以环己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（9∶3.5∶1∶0.5）作为展开剂时，展开效果较好，斑点集中且分离较好，Rf值适中。

2.3.1.5显色剂的选择考察了10%磷钼酸硫酸乙醇，10%硫酸乙醇溶液、5%香草醛浓硫酸溶液等显色系统，其中以10%磷钼酸硫酸乙醇为显色剂所得色谱图斑点清晰，稳定。

2.3.1.6温湿度的选择试验中考察了不同温湿度对薄层色谱的影响，结果表明在室温（30℃）下，相对湿度在50%～88%内，均可使主斑点分离较好，斑点显色集中、清晰，且比移值变化不大。

2.3.2薄层鉴别方法取样品粉末1g，加入乙酸乙酯20ml，超声处理30min，蒸干浓缩至1ml，照薄层色谱法（《中华人民共和国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验［12］附录26，吸取供试品溶液和对照药材溶液各2 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，在T=30℃，RT=62%条件下，以环己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（9∶3.5∶1∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸硫酸乙醇，置于105℃下烘烤，斑点显色清晰，结果见图6。

图6　空心苋薄层色谱图

3　检查项目

3.1浸出物测定

3.1.1浸出方法的选择分别考察不同方法（冷浸法及热浸法）及不同溶剂（水、不同浓度乙醇溶液）对空心苋浸出物的浸出效果，结果见表1。

表1　空心苋浸出物方法学考察（%）

结果显示:采用热浸法，以水为溶剂提取所得浸出物含量最高。

3.1.2样品测定按《中华人民共和国药典》2010年版一部附录XA水溶性浸出物项下热浸法［12］550对15批空心苋进行测定，结果见表2。

3.2水分、总灰分及酸不溶性灰分的测定按《中华人民共和国药典》2010年版一部附录IXH、IXK方法测定［12］附录26，结果见表2。

表2　空心苋水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物测定结果（%）（n=3，RSD＜3%）

表2结果显示:空心苋水分为6.32%～12.72%，总灰分为11.55%～21.96%，酸不溶性灰分为0.43%～3.06%，浸出物为31.11%～46.16%。

4　小结

4.1空心苋的主要鉴别特征为:全草长短不一，茎节处簇生白色绒毛或棕褐色须状根；叶对生，皱缩卷曲，两面均有疏生短毛。茎横切面维管束外韧型，8～15个；束间形成层内方有1～6列厚壁的木化细胞，与木质部外侧的木化细胞连接成环状；髓部宽广，常裂成空腔；皮层和髓部散在有异形细胞，内含草酸钙簇晶。全草粉末中可见草酸钙簇晶、方晶和两种多细胞非腺毛。药材粉末以乙酸乙酯提取，用环己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（9∶3.5∶1∶0.5）展开，所得斑点清晰，分离度较好。上述鉴别特征明显、稳定，可作为药材真伪鉴别的依据。

4.2根据15批药材的测定结果，初步拟定空心苋药材水分不得超过15%，总灰分低于23%，酸不溶性灰分小于4%，水溶性浸出物含量大于30%。目前对空心苋的的质量标准研究仍处于真伪鉴定为主，其优劣的控制方法尚需进一步研究、完善。

4.3文中数据显示总灰分含量很高，考虑到有可能是药材中泥土、沙石所引起，需进行酸不溶性灰分测定。结果表明空心苋中含有大量草酸钙簇和方晶，并非含大量泥土、沙石，表明采集的药材样本均合格。因此，为了准确控制药材质量，确保临床用药质量，总灰分及酸不溶性灰分的测定亦具有一定意义。

参考文献

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［12］国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部［S］.北京:中国医药科技出版社，2010.

（编辑陈明伟）

中图分类号：R282.2

文献标识码：A

文章编号：2095-4441（2015）02-0071-04

收稿日期:2015-04-20

基金项目:广西自然科学基金创新研究团队项目（编号:2011GXNSFF018006）；《广西壮药质量标准（第三卷）》质量评价与标准研究项目（编号:MZY2013045）

通信作者:蔡毅，E-mail:Caiyi118@163.com