一例猪沙门氏杆菌病的诊断和防治

周 飞

(河南省济源市动物卫生监督所,河南济源 454650)

一例猪沙门氏杆菌病的诊断和防治

周 飞

(河南省济源市动物卫生监督所,河南济源 454650)

猪沙门氏菌病又称仔猪副伤寒,是由猪霍乱和猪伤寒沙门氏杆菌引起的仔猪腹泻性传染病。本病多发生于1～4月龄的仔猪,4月龄以上的仔猪很少发生此病。该病一年四季均有发生,但冬春季节发病较多,一般呈散发性或地方流行性,在多雨潮湿气候多变季节发病较多。主要经消化道传播,交配或人工授精也可以传播本病,根据临床诊断剖检特点可分为急性型、亚急性型和慢性型［1］。为了进一步做该病的防治工作,作者对送检的疑似猪沙门氏菌病的猪,进行病原菌的分离鉴定、生化试验、动物试验和药敏试验等。

猪沙门氏杆菌病;诊断;防治

1 材料与方法

1.1 试验地点、时间

本试验研究于2014年3月至5月间在河南农业大学牧医工程学院传染病实验室进行。

1.2 实验动物

试验用健康小白鼠由河南农业大学牧医工程学院动物房提供。

1.3 主要试剂、药品

1.3.1 主要试剂 甲基红（M-R）试剂、二乙酰（V-P）试剂、吲哚试剂、硝酸盐还原试剂、溴甲酚紫酒精溶液、a-萘酚酒精溶液、氢氧化钾、柠檬酸钠、硫酸镁、溴麝香草酚蓝酒精溶液、对位氨基苯磺酸、醋酸溶液、a-萘胺、酚红溶液等。

1.3.2 主要培养基 伊红美兰琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基、普通琼脂培养基、SS琼脂培养基、由杭州天和微生物制剂有限公司提供；鲜血琼脂培养基，由郑州安图绿科生物工程有限公司生产；普通肉汤，以上培养基均的按常规方法配制。糖类生化管、硫化氢生化管、枸橼酸盐生化管，由杭州天和微生物试剂有限公司提供。

1.3.3 主要药敏纸片 标准药敏纸片均在有效期内，由北京天坛药物生物技术开发公司提供。

1.4 主要仪器设备

电热恒温隔水式培养箱（PYX-DHS-BS-II），上海跃进医疗器械厂生产；超净工作台，苏州安泰空气技术有限公司生产；冰箱、电炉、高压锅、天平、烧杯、培养皿、量筒等由河南农业大学传染病实验室提供。

1.5 操作过程和方法

1.5.1 常规观察法（包括临床观察和剖检变化）。

1.5.2 染色镜检与形态观察 在无菌条件下，分别取病死猪的心、肝、脾、肺等病变部位，做一组织抹片，经革兰氏染色，镜检观察。

1.5.3 病原菌的分离和培养 在无菌条件下，取病死猪的心、肝、脾、肺等，无菌剪取组织块，置于温箱37℃培养18～24h。经显微镜初步选取目的菌，按常规操作在血液琼脂平板、麦康凯琼脂平板、伊红美兰琼脂平板上划线37℃培养18～22h后观察培养特性，并选取典型疑似菌落，接种于普通肉汤中，经37℃培养18～24h后无杂菌生长者，置4℃冰箱保存备用。

1.5.4 细菌的生化试验 取经过纯化的分离菌株，分别接种于蔗糖、山梨醇、葡萄糖、甘露糖、乳糖、麦芽糖、枸橼酸盐、硫化氢、硝酸盐还原等生化管中，37℃培养18～24h后，观察其生化反应的特性。

1.5.5 致病性试验 取纯化鉴定后的菌株，接种于普通肉汤培养基中，经18～24h培养，取培养物腹腔注射于体重15～17g的健康小白鼠，试验分两组，每组4只小鼠，每只接种0.2 ml，同时每组设对照2只，对照组腹腔注射灭菌过的盐水0.2 ml。观察发病和死亡情况、剖检变化，并对小白鼠的肝脏进行病原菌的再分离。

1.5.6 药敏试验 采用纸片扩散法。将上述经过分离鉴定的纯菌株采用常规药敏片法进行药敏试验，即将其接种于普通营养琼脂平板上，取无菌生理盐水0.1ml滴入平板中，涂布均匀，加入药敏纸片，置37℃培养24h，观察抑菌圈的大小并记录结果，判断标准是直径在10mm以下的为耐药，直径在10～15mm的为中度敏感，直径在大于15mm的为高度敏感。

2 结果

2.1 临床检察结果

2.1.1 临床观察 发病猪均在2月龄左右，病猪主要表现为：病初部分仔猪便秘，接着下痢，粪便呈灰白色，后腹泻呈淡绿色，恶臭，混有血液、坏死组织或纤维碎片，便秘与下痢交替反复，食欲减退，体温升高至40.5～41.5℃，呈稽留热，畏寒、喜钻垫草或挤在一起。病猪消瘦、呼吸困难、精神沉郁、食欲减少、被毛粗乱、皮肤苍白、眼角有粘性或脓性分泌物，有恶臭，一周后猪耳朵未端、腹部等出现紫斑。病程多数为2～3周，部分症状较轻仔猪病程更长，表现出生长发育不良，被毛粗乱、污秽、偶有下痢，其中部分病情恶化死亡，病死率25～50%。

2.1.2 剖检变化 剖检病死猪3头，均可见病猪尸躯消瘦，肺脏可见点状出血；脾脏增生性肿大呈暗蓝色，切面隆起呈蓝色、坚硬似橡皮；肝脏出血呈红色，有出血点；胃底部和幽门部黏膜增厚红肿、有小出血点；肠系膜淋巴结索状肿胀充血，各脏器浆膜、膀胱粘膜以及肾脏皮质有出血点；十二指肠粘膜充血，大肠黏膜有卡他性炎症，盲肠、结肠的肠壁增厚，有浅平溃疡和坏死，其中一头病猪肠道黏膜表面上覆盖一层弥漫性坏死性物质（假膜），呈淡绿色糠麸样，剥开见底部红色，边缘有不规则的溃疡面，周围呈堤状隆起，这是典型的副伤寒滤泡溃疡。

2.2 实验室诊断结果

2.2.1 直接涂片染色镜检和细菌形态观察 取具有典型病变的病死猪的肝、脾、肺等病变组织涂片、干燥、固定，革兰氏染色镜检，可见到呈革兰氏阴性的小杆菌，无芽孢，无荚膜，多单个存在。

2.2.2 细菌分离培养结果 该菌经37℃培养24h后，在普通琼脂培养基上生长良好，形成中等大小、圆形、表面光滑、无色半透明、湿润、边缘整齐的粘液型菌落。肉汤中生长旺盛，均匀混浊。在麦康凯琼脂培养基上形成无色、圆形、光滑、湿润、边缘整齐、微隆起半透明菌落。在伊红美兰琼脂培养基上形成无色、圆形、光滑、湿润、边缘整齐的半透明菌落。在SS琼脂培养基上形成淡黄色、圆形、光滑、湿润的小菌落。三糖铁琼脂斜面：斜面为红色，底部变黄色并产气。

2.2.3 致病性试验结果 接种分离菌的8只小鼠均在24h后，出现精神萎靡、食欲不振。48h后有死亡，取死亡小鼠进行剖检，可见其肝脏有出血、白色坏死，心脏有出血点，腹腔积液，并可从肝脏、心血、腹水中分离到与原分离菌染色特征、生化特征一致的细菌。接种生理盐水的对照组小鼠全部健活。

2.2.4 药敏试验结果 将分离鉴定的纯菌株采用常规纸片扩散法进行药敏试验，结果如表1。

表1 沙门氏菌药敏试验结果

3 分析与讨论

（1）根据本次发病情况、临床症状观察、病理剖检变化以及实验室检测结果，可确诊该猪场本次疫情主要是猪沙门氏菌病，病原菌为猪霍乱沙门氏杆菌。

（2）病因分析：根据该场发病情况，半月前从外地购买仔猪，突然发病，整窝发病，死前没有任何症状，治疗不当，部分猪形成僵猪，原因有：

外地购猪，仔猪经过长途运输、饥饿、疲劳、驱赶等各种应激反应，再加上饲喂不及时，日喂量不足等，猪抵抗力降低，加之这些猪未经仔猪副伤寒免疫，病猪也没有及时隔离，通过饮水，用具等在短短的几天内波及全群，呈暴发性流行。没有坚持自繁自养的原则，仔猪是从农村乡镇猪市收购而来，猪群生长状况、免疫情况参差不齐，有些猪未注射仔猪副伤寒疫苗，并且没有采取隔离、消毒等防疫措施，带进病原。

饲养管理粗放，圈舍简陋，卫生条件差，并且圈舍拥挤，阴暗潮湿；防疫措施不力，消毒不严，病猪没有及时隔离，通过饮水、用具等很快波及全群。

治疗不当，病初按病毒病治疗，没有明显效果，以致延误病情。怀疑伤寒后虽然加入一定抗生素，但给药途径不对，未做药敏试验，造成部分猪治疗不力，形成僵猪长期排毒。

（3）猪沙门氏菌病发病原因复杂，要做该病的预防工作需要从多方面做起：

本病是由于仔猪的饲养管理和卫生条件不良促进发生和传播的，因此，预防本病的根本措施是认真贯彻“预防为主，防重于治”的方针。首先应该改善饲养管理和卫生条件，增强仔猪抵抗力，饲养用具和食槽经常洗刷，圈舍要清洁，经常保持干燥，及时清除粪便，用消毒药品对圈舍进行消毒。严把引种关、防止购进带毒后备种猪。猪场在向外引进种猪时，应先详细了解种猪来源场的情况，尤其是疫病史的调查。引进后要进行隔离观察和猪瘟等疫病的检查。经证实完全健康方可进入生产区合群。最好是本场能培育无猪瘟带毒和其他繁殖障碍疫病的种猪。

制定科学合理且符合本场的免疫程序，在注射疫苗前后3d，在猪群的饮水中添加维生素和微量元素，能产生较好的免疫应答，提高猪群抗体的免疫力。但是在疫苗免疫注射的前后一周内最好不要使用抗生素等药物。定期进行免疫效果监测，常规免疫监测种猪每年两次，肉猪每季度一次，以便掌握本场的实际情况。抓好日常预防工作，本病一年四季均有发生，在多雨潮湿气候多变季节发病较多，平时要加强疫病的防控工作，提前做好预防十分重要。疫苗预防，在本病常发区内，可对1月龄以上哺乳或断奶仔猪，用仔猪副伤寒冻干弱毒菌苗预防，用20%氢氧化铝生理盐水稀释，肌肉注射lml，免疫期9个月；口服时，按瓶签说明，服用前用冷开水稀释成每头分5～10ml，掺入料中喂服。或将每一头份疫苗稀释于1～10ml冷开水中灌服。药物预防，平常可定期对未发病的猪居中可在饲料中添加抗生素类药物预防，饲喂添加抗生素的饲料时要注意抗菌药株的出现。无论采用哪种方法，都必须坚持改善饲养管理及卫生条件相结合，才能收到满意的效果。

加强猪场的消毒工作，常规消毒为每周1～2次，保证做到立体消毒，应先从上空再到猪群再到地面，并定期更换消毒药，发生疫情时酌情增强消毒次数。真正做到全进全出，对空置栏要进行彻底消毒，产房、保育舍最好进行熏蒸消毒。净化猪场，病死猪要严格处理，不能随便乱扔。对流产、早产、产畸形死胎的母猪进行跟踪，发现是带毒猪应及时淘汰。

发现本病后应立即隔离治疗，在治疗时要考虑在发病过程中机体受损较重，不能在治疗取得一定疗效后立即停药（这在农村较常见），而应持续用药4～7d，以避免病情发生反复而导致不必要的死亡。在治疗过程中要加强护理与增加营养，以提高仔猪的抗病力，有利于康复。要对同群猪进行药物预防，坚持自繁自养的原则，防止长途运输、饥饿、疲劳、驱赶、防疫等各种应激因素的发生。如果不能避免，尽量不要让各种应激因素累加。

（4）治疗：对发病猪群注射阿米卡星30mg/kg，维生素C 2ml/头，樟脑磺酸纳2ml/头，5%葡萄糖生理盐水150ml/头，混合1次静脉注射，对严重病例静注2次，以后肌肉注射阿米卡星30mg/kg或氨苄青霉素25mg/kg交替使用，8 h注射1次，连用3d。3d后猪群明显好转。

[1] 陈溥言.兽医传染病学[M].北京：中国农业出版社，2006：119-127.

[2] 谢正，吴挹芳.现代微生物培养基和试剂手册[M].福州：福建科学技术出版社，1994：1501-1571.

[3] 徐迪诚，蔡妙英.革兰阴性杆菌新编码鉴定手册[M].哈尔滨：黑龙江科学技术出版社，1994：1637-1643.