黔东南州2015年“两节”期间禽流感监测分析

赵孝木 汪忠荣莫兴虎 杨先富 袁晓娟

廖 飞 吴通奎 姜 艳 杨 梅 黄功明

(黔东南州动物疫病预防控制中心,贵州凯里 556000)

黔东南州2015年“两节”期间禽流感监测分析

赵孝木 汪忠荣*莫兴虎 杨先富 袁晓娟

廖 飞 吴通奎 姜 艳 杨 梅 黄功明

(黔东南州动物疫病预防控制中心,贵州凯里 556000)

目的:了解禽流感病毒H5与H7亚型在不同场所外环境的分布状况,切实做好“两节”期间禽流感防控工作。方法:从养殖场、活禽交易市场、散养户、环境采集样品进行检测。结果:荧光RT-PCR复核,764份样品,H5亚型阳性数19份,阳性率为2.49%,H7亚型阳性数为零。H5亚型阳性分别来自交易市场和禽宰杀点。结论:黔东南州部分交易市场和禽宰杀点存在着H5亚型禽流感病毒,接触禽类内脏及活禽交易市场和家禽屠宰点是感染禽流感的高危因素,应加强环境卫生整治,落实环境消毒,以减少H5亚型禽流感传播至人的风险。

禽流感;血凝抑制试验;荧光RT-PCR试验

禽流感（AI）是由甲型禽流感病毒（AIV）任何一种血清亚型毒株引起各种家禽及野生禽类发生疫病的传染性疾病，目前已知能感染人的有H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3 亚型毒株。禽类作业环境可以增加感染禽流感病毒的危险性，禽类从业人群为感染禽流感的高危职业人群。为摸清黔东南州涉禽的不同场所免疫抗体合格率、H5和H7亚型病原污染情况，在全州开展禽流感免疫抗体和禽流感病原监测，努力确保2015年“两节”期间不发生重大动物疫情，切实维护公共安全。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 诊断试剂

禽流感H5亚型血凝抑制抗原与阴、阳性血清（厂家：青岛易邦生物工程有限公司，批号：2013002、2013002、2013002）；禽流感H7亚型血凝抑制抗原与阴、阳性血清（厂家：哈尔滨维科生物技术开发公司，批号：2014001、2014002、2014002）；禽流感H5亚型RT-PCR诊断试剂盒（厂家：北京世纪元亨动物防疫技术有限公司，批号AIVH520140807P），禽流感H7亚型RT-PCR诊断试剂盒（厂家：北京世纪元亨，批号AIVH720141007P），禽流感H7亚型抗原检测卡（厂家：上海容晖生物科技有限公司，批号：GA14050404），以上试剂均由贵州省动物疫病预防控制中心提供。禽流感H5亚型抗原检测卡（批号：20140104）购买于深圳康百得生物科技有限公司。

1.1.2 样品采集

按照NY/T765-2004《高致病性禽流感样品采集、保存及运输技术规范》进行。2101份样品分别采集自黔东南州辖区内养殖场、活禽交易市场、散养户、禽宰杀点。

1.2 方法

1.2.1 禽流感抗体检测

依据《高致病性禽流感防治技术规范》（GB19442－2004）用血凝抑制试验（HI）对血清样品进行H5和H7禽流感抗体检测，严格按照诊断试剂说明书的要求进行操作，以完全抑制4个血凝单位抗原的血清最高稀释倍数作为HI滴度。

1.2.2 禽流感快速检测卡检测

操作和结果判断按试剂盒说明书进行。

1.2.3 禽流感核酸检测

采用荧光定量RT-PCR试验对快速检测卡检测出的阳性样品和可疑样品进行复核。操作参照试剂盒说明书进行，结果判定按《高致病性禽流感防治技术规范》执行。

2 结果

2.1 禽流感抗体检测

来自不同采集点的样品H5亚型抗体合格率不同（表1），养殖场的合格率最高91.67%，散养户的合格率最低76.25%。

表1 禽流感血清样本抗体检测结果

2.2 禽流感快速检测卡检测

不同来源样品H5亚型和H7亚型禽流感病原检出率不同，其中禽宰杀点阳性率最高，阳性率为4.40%，详见表2。

2.3 禽流感核酸检测

用荧光定量RT-PCR对阳性样品和可疑样品进行复核，结果：H5亚型活禽交易市场3份阳性，禽宰杀点16份阳性；H7亚型全部为阴性，详见表3。

3 分析与讨论

禽流感免疫是防止禽流感发生和流行的主要方法，本次对黔东南州内多家种禽场、商品养禽场、活禽交易市场和散养家禽进行了免疫抗体检测，对免疫抗体合格率不达标的及时进行补免，保证“两节”期间在本辖区内不发生重大动物疫病。从检测结果看，散养户免疫合格率相对比较低76.25%。

禽流感病毒根据病毒表面血凝素（HA）抗原和神经氨酸酶（NA）抗原的不同，可分为不同血清型，感染人的禽流感病毒亚型主要为H5N1、H9N2、H7N7、H7N9，其中感染H5N1的患者病情重，病死率高。但目前人感染禽流感病例仍处于偶发、散发状态，其感染来源的调查很难。2005年我国报告首例人禽流感病例，贵州省于2009年首次报告人禽流感病例，到2015年2月贵州省共报告7例人禽流感病例。本次调查通过对涉禽场所的监测，目的是进一步确定感染禽流感的高危因素，为确定感染来源与制定防控措施提供依据。监测结果显示：19份禽流感H5亚型阳性样品分别来自活禽交易市场和禽宰杀点，说明黔东南州部分交易市场和禽宰杀点被禽流感H5亚型病毒污染，应加强环境卫生整治，落实环境消毒，以减少H5亚型禽流感传播至人的风险。

近年来，黔东南州虽然没有发生禽类禽流感疫情和人感染禽流感病例，但黔东南州疾病预防控制中心和动物疫病预防控制中心在活禽交易市场和禽宰杀点先后都检出禽流感H5亚型核酸阳性，此外相关报道在该州野鸟粪便中也检测出禽流感H7亚型核酸阳性，说明该州在流通环节和野鸟栖息地存在禽流感疫情发生的风险。其相关部门要加强农贸市场规范化管理，严格执行卫生清洁、环境消毒和定期休市制度，加大综合治理力度，改善家禽销售和宰杀环境卫生状况；动物卫生监督部门要按照禽流感防控相关规定，加强检疫监管，严把市场准入关，堵住疫源；加强禽流感防控知识的宣传，增强防护意识。从事家禽贩运、交易、屠宰的从业人员以及经常购买禽类的群众感染禽流感的风险较高，应加强对他们的健康教育宣传，增强个人防护意识，尽可能减少感染机会；农业和卫生部门要建立和完善禽流感等重大疫病防控技术支撑体系，定期对流通环节进行监测，为禽流感防控工作决策提供科学依据。

表2 禽流感快速检测卡检测结果

表3 禽流感荧光RT-PCR检测结果

[1] 韦小琼.人禽流感研究进展及其对策策略[J].右江民族医学院学报，2006，28（5）：860-862.

[2] 柳洋，王玉林，鲁恩洁，等.2005年广州市职业人群H5N1、H9N2血清学监测[J].华南预防医学，2005，33（1）：27-28.

[3] 向妮娟，周蕾，怀扬，等. 2005-2009 年中国人禽流感（H5N1）病例流行病学特征分析[J].实用预防医学，2010，17（6）：1070-1073.

[4] 邓茂铭，王定明，周俊，等.1例人感染高致病性禽流感病例流行病学调查[J].预防医学论坛，2010，16（4）：332-335.

[5] 杨金芝，梁永奎，李娜，等.贵阳市首例人禽流感病例的流行病学调查[J].现代预防医学，2013，40（1）：13-15.

[6] 徐茂文，文明，熊朝丽，等.贵州省部分地区禽流感H7N9 型病毒核酸调查[A]. 中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会论文集[C].2013：751-754.

赵孝木（1966-），男，汉，贵州省正安县人，本科，兽医师，主要从事动物疫病防控研究。

汪忠荣（1978-），女，兽医师，硕士，主要从事动物疫病诊断与防治研究。