不同途径注入大肠埃希菌致家兔热症蒙医未熟热期、成熟热期模型研究△

额尔敦朝鲁 加曼·沙俄 纪月龄 李 立 杨玉秋 胡玉荣 赵福全 王高娃 高玉峰 包春生

(1.内蒙古民族大学附属医院，内蒙古 通辽 028007;2.内蒙古民族大学蒙医药学院，内蒙古 通辽 028000)

蒙医将温热病症按其发热过程分若干阶段进行辨证、分期论治［1］，其中，未熟热期、成熟热期是热症最常见的阶段即证期。未熟热期是温病的初始阶段，大多数感染性疾病早期均出现未熟热期，未熟热期因疾病和治疗干预等或治愈或转变为多个不同的证期，其每个证期症候、治疗方

法、预后均不同，因此未成熟热证期是热症诊疗的关键时段。成熟热期为单纯热，因易于诊断并可进行单纯的清热治疗，因此使未熟热证转变为成熟热证是临床治疗的主要原则。为以现代方法研究这一病机理论，作者在前期研究基础上采用家兔不同途径注射大肠埃希菌致发热的方法［2］建立蒙医未熟热证期转变成熟热证期的模型，对比观察和分析模型动物的体温和症状变化，探讨该模型能否应用于蒙医温病研究，报道如下。

1 资料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物: 选用日本大耳白兔体重在2.0 ～2.5kg，雌雄兼用，雌兔不孕，购于吉林大学实验动物中心。许可证号: SCXK-吉20130002。将基础体温在38.5 ～39.5 ℃之间的日本大耳白兔随机分为脑刺痛组、腹刺痛组、黏热症组和空白组各8 只。

1.1.2 药品和仪器: 大肠埃希菌购于卫生部药品生物制品检定所，菌号44825 -3。IL -1、IL -6、TNF -α 试剂盒购于上海沪尚生物科技有限公司。全自动多功能酶标仪: 芬兰Thermo，型号MK3;细菌标准比浊仪: 法国生物梅里埃公司，型号DENSIMAT。

1.2 方法

1.2.1 家兔基础体温的测定: 采用人工测肛温法［3］，实验前将家兔固定，安静1h 后，每隔1h 测体温3 次，取3 次体温平均值为基础体温。

1.2.2 模型的建立: 脑刺痛组采用小脑延髓池法［4］，固定家兔，模型组家兔每只经小脑延髓池注射8 ×107个/mL［5］的大肠埃希菌溶液;腹刺痛组采用腹腔多点注射法，仰卧位固定家兔，模型组家兔每只腹腔内分4 个点注射3 ×108个/mL［5］的大肠埃希菌溶液1mL;“黏”热症组采用耳缘静脉注射法，模型组每只家兔耳缘静脉注射8 ×107个/mL［6］大肠埃希菌溶液。每种模型试验空白组按同一途径注射等量的生理盐水。注射完毕开始测体温、观察家兔症候表现，此期间家兔处于自由饮水、进食状态。

1.2.3 观测指标: 体温观察: 采用人工测肛温法，每隔20min 测体温、连续测体温至12h、计算TRI12，绘出体温曲线。①发热高峰值;②体温反应指数(Temperature Response Index，TRI)，计算出12h 体温反应指数(TRI12)。

1.2.4 观察未成熟热、成熟热期证候 观察证候包括: 一般活动、精神，饮食水量，被毛，出汗，是否寒战，心率，心跳，呼吸，眼及眼结膜，耳及部部血管及脉搏、舌、尿、便等。

2 结 果

2.1 家兔体温变化: 表1，图1 可见各模型组体温曲线有明显的上升阶段，高热阶段，呈现高热持续的平台，空白组则体温处于正常范围波动状态。

表1 各组家兔发热高峰值(℃)、TRI12(cm2)

2.2 模型家兔症候表现

2.2.1 脑刺痛组: 经小脑延髓池注射大肠埃希菌稀释液之后约60min 后体温快速上升，并且出现精神稍差，活动量减少;被毛时而耸立，时而寒战;呼吸浅快，心跳加速;耳时凉时热;耳部血管时而纤细时而饱满;舌无明显改变;不进食水。其中5 只于180min 时上述证候消失，2 只于120min 消失，1 只持续到400min。实验期间排尿排便的4 只家兔，尿色黄浑浊，粪便颜色变浅，质地无改变;2 只家兔有扭头静卧的现象，以上症候均符合人体疾病蒙医温病未成熟热期临床表现［6］，注射大肠埃希菌稀释液约200min 后多数家兔出现精神倦怠乏力，被毛杂乱，寒战消失;呼吸深快，心跳加速不明显;耳灼热，耳廓深红，耳部血管充盈，触之脉搏紧实有力;舌无明显改变;不进食水;实验期间排尿排便的5 只家兔，尿色深黄、有沉渣、气味臭;粪便颜色浅，质地干硬，臭味大。此阶段约持续至900min。以上症候符合人体疾病温病成熟热期临床表现［7］。

2.2.2 腹刺痛组: 在腹腔注射大肠埃希菌细菌后约40min后体温快速上升，并且出现精神差，活动减少，被毛直耸，寒战，呼吸浅快，耳凉，耳部血管纤细，舌无明显改变，进食水差。其中6 只家兔于130min 时消失，1 只家兔于80min 时上述证候消失，1 只家兔持续到200min。在实验中3 只家兔尿色无改变，粪便颜色无改变，质地有的稀薄，以上症候符合人体疾病蒙医温病未成熟热期临床表现［7］。注射大肠埃希菌细菌约140min 后多数家兔出现精神萎靡不振，静卧不动，被毛杂乱无光，呼吸频率快，心跳加速，耳热，耳廓赤红，耳部血管充盈，触之脉搏紧实有力，舌紫红，不进食水;在实验中5 只家尿色赤黄、有沉渣、气味骚臭，粪便颜色发黑，质地稀薄，臭味大，此阶段约持续至380min。以上症候符合人体疾病温病成熟热期临床表现［7］。

2.2.3 黏热症组: 经耳缘静脉注射大肠埃希菌细菌后约60min 后体温快速上升，精神差，活动较前增多，寒战，体表凉，被毛耸立，呼吸较前加快，心跳快;耳发凉，耳部血管纤细触不到动脉搏动;舌发白;不进食水，尿无色透明，便硬，气味少。上述证候约持续到200minm。以上症候符合人体疾病蒙医温病未成熟热期临床表现［7］。注射大肠埃希菌细菌约200min 后多数家兔出现萎靡不振，体表热，被毛杂乱，结膜充血，不再寒战;呼吸加快，心跳较之前加快，触之耳热，耳部脉搏紧实有力，耳廓深红，耳部血管充盈，舌发红，鼻尖湿润，自动少量饮水，进食少;实验期间排尿排便的家兔，尿色深黄、气味骚臭;粪便颜色浅，质地干硬，臭味大。此阶段约持续至450min。以上症候符合人体疾病温病成熟热期临床表现［7］。

2.2.4 空白组: 注射等量生理盐水后未发现异常症状，实验过程体温波动未超过0.4℃，精神状态良好，体表温度正常，舌紫红色，呼吸心跳平稳，色泽正常，脉搏可触及，尿稍清亮，粪便稍黄。

4 组家兔在不同阶段在一般活动、精神，饮水，被毛，鼻尖出汗，是否寒战，喷嚏，呼吸，眼及眼结膜充血，耳部血管及耳部脉搏、舌、尿、便等方面表现出不同的症状变化。

表3 3 组家兔证期及症状对比

3 讨 论

蒙医温病学是研究发热性疾病的学科，它把蒙医温病的病因归结为疫、骚、伤、毒四大类，把发热过程归结为8 个阶段即未熟热、成熟热、空虚热、隐伏热、澡浊热、散播热、陈旧热和寒热间期等［1］。现代医学感染性疾病属蒙医疫原性温病。未熟热证期是疾病初期临床表现发热伴有寒战，热型不规则，常于傍晚时体温升高，全身关节、肌肉、骨骼酸痛，乏力、口苦等症状以及体现赫依、稀拉、巴达干共同病因的舌、脉、尿特征性表现的阶段。由于未熟热证期为疾病初始阶段，且为此阶段可转变为空虚热、隐伏热、澡浊热、散播热等证期［1］而导致疾病迁延不愈，蒙医视未成熟热证期为治疗温病的关键点。蒙医温病机制研究尚未见他人报道，作者在前期内毒素致蒙医“黏”性脑刺痛症未熟热证至成熟热证期模型研究的基础上［2］进行了大肠埃希菌不同途径给药致不同病症的未熟热证至成熟热证期模型。结果显示: 与空白组比较，3 个模型组发热高峰值、TRI12 均有显著升高、有显著性差异(P＜0.05)，其发热高峰值较空白组升高1.3 ～2.0℃，各模型组家兔发热过程相当并与人体感染性发热疾病的发热程度相近，体温达到40.5℃～41℃。各模型组注射大肠埃希菌溶液后体温逐渐上升，并出现精神萎靡，活动量减少，闭眼，打喷嚏，蜷缩不动，被毛直耸，寒战，呼吸浅快，心跳快，耳时凉时热，耳部血管时而纤细时而饱满，有的耳下垂、抽搐，舌苔浅白，进食水差等同样的症状。脑刺痛组出现抽搐，尿色黄、浑浊，粪便颜色变浅等表现，其它两组未见此类表现。以上完全符合人体疾病未熟热证期的诊断要点。继以上症状阶段之后，3 组模型均出现精神倦怠乏力，被毛杂乱，寒战消失;呼吸深快;眼红，结膜充血，舌紫红，鼻尖湿润，耳灼热，耳廓深红，耳部血管充盈，触之脉搏紧实有力;尿色赤黄、有沉渣、气味骚臭，粪便颜色发黑，质地稀薄，臭味大，不进食、有饮水等共同的症状。此类症状符合人体疾病成熟热证期诊断要点。3 组模型发热程度基本一致，差距＜0.5℃。注入细菌后起始发热时间相近，腹刺痛组于40 min 始出现发热，较其它3 组滞后20 min。发热持续时间各异，脑刺痛组持续时间长900 min，腹刺痛、黏热证各为380 min、450 min。未熟热证期持续时间脑刺痛组较短，占总的发热时间的16.6%，腹刺痛、黏热证各占41.6%、56%。

综上，大肠埃希菌不同途径给药致热症引起的蒙医未熟热证期、成熟热证期的家兔模型症状易于观察，证期表现迥异易于观察和鉴别，发热持续时间、各证期持续时间较长，能够满足相关研究内容的实施所需，认为此3 种热症及证期模型符合蒙医疾病特征及演变规律，可作为相关机理及药效研究模型使用。

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