姜黄素肠道修复剂对鸡球虫病疫苗免疫效果的影响

刘丽丹，吴松明，廖贵城，唐建红，翁亚彪，2∗

姜黄素肠道修复剂对鸡球虫病疫苗免疫效果的影响

刘丽丹1，吴松明1，廖贵城1，唐建红1，翁亚彪1，2∗

（1.佛山市正典生物技术有限公司，广东佛山528138；2.华南农业大学兽医学院，广州510642）

为研究姜黄素肠道修复剂对鸡球虫病疫苗免疫效果的影响，在球虫疫苗免疫时加入姜黄素肠道修复剂，通过观察测定免疫组鸡群的精神状况、首免卵囊排泄量、疫苗反应期的肠道病变记分和增重以及免疫后21 d攻虫的保护效果进行综合评价。结果显示：在免疫期，姜黄素实验组鸡只的精神状况良好，首免卵囊量排泄正常，疫苗反应期的肠道病变记分和增重比未加姜黄素实验组的要好些；21 d攻虫后，姜黄素实验组的相对增重高于未加姜黄素实验组，但差异性不显著（P＞0.05），而且姜黄素实验组的肠道病变记分和粪便记分均低于未加姜黄素实验组。试验表明，姜黄素在球虫疫苗免疫过程中能够修复肠道损伤、提升肠道健康，对球虫疫苗免疫具有较好的辅助性作用。

姜黄素；肠道修复剂；鸡球虫病活疫苗；免疫效果

鸡球虫病是集约化养鸡场中流行普遍，发病率高，危害严重的疾病之一［1］。鸡球虫病长期依赖于抗球虫药物的防控，随着国家对药物残留严格控制以及药物耐药性问题加剧，鸡球虫疫苗逐渐取代抗球虫药物成为防控该病的主要手段［1－2］。国内市面上销售的鸡球虫病疫苗产品有佛山市正典生物技术公司生产的正典球苗

（SCOCVAC）和先灵葆雅公司生产的COCCIVAC，

前者是早熟弱毒虫株疫苗，后者是强毒株疫苗［3－5］。而且强毒疫苗较弱毒疫苗更容易出现疫苗反应，这是由于鸡球虫繁殖力很强，在鸡群接种鸡球虫疫苗后，1个疫苗虫株的卵囊就可能产生数万甚至数十万的后代卵囊，当这些卵囊孢子发育后再次重复感染鸡只，刺激鸡体产生坚强的抗球虫免疫力的同时，对肠黏膜也会造成一定的损伤，这时鸡群表现一定程度的疫苗反应［6］。在疫苗反应期时，当环境中肠道细菌或病毒增多，会加剧肠道损伤，从而表现出不同程度的肠道症状，如饲料粪、番茄粪、水粪甚至血便等［6］。姜黄素是一种用于养鸡中的肠道调理中药，可保护正常细胞免受各种不良因素的损伤，具有良好的抗炎、抗纤维化、抗氧化、调节免疫功能等药理活性［7－8］。本实验是在使用鸡球虫病活疫苗的过程中添加姜黄素，研究姜黄素对鸡球虫病活疫苗首免、疫苗反应程度，肠道健康以及免疫效果的影响。

1 材料和方法

1.1 试验材料 鸡球虫病四价活疫苗：佛山市正典生物技术有限公司生产；鸡球虫强毒卵囊：柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫强毒株、巨型艾美耳球虫强毒株和堆型艾美耳球虫强毒株，均由佛山市正典生物技术有限公司保存；姜黄素：广州双燕生物科技有限公司提供。

1.2 试验动物 1日龄岭南黄鸡180羽：购自广东省农业科学院畜牧研究所种鸡场。

1.3 试验分组与处理

1.3.1 试验分组 3日龄岭南黄鸡180羽，随机分成3组，每组60羽鸡，分别为空白组、姜黄素实验组和未加姜黄素实验组，分别在分隔成约2.7m2（1.8m×1.5m）的相等饲养面积的地面上隔离饲养，以谷壳为垫料，厚度为4 cm，免后足11 d换垫料，所有试验组饲喂的饲料不添加任何抗球虫药物。

1.3.2 试验组处理 除空白组，各试验组鸡在4日龄时进行接种免疫，每组鸡按每羽鸡1羽份接种鸡球虫活疫苗。姜黄素实验组：按照鸡球虫病四价活疫苗使用指南操作来免疫鸡群；未加姜黄素实验组：与姜黄素实验组使用相同的免疫方法和免疫剂量；姜黄素实验组鸡群从3日龄开始，将姜黄素按0.5 g／kg饲料，每天拌料至试验结束。

姜黄素实验组和未加姜黄素实验组于免后足5～8 d，免后足13～16 d，分别计克粪卵囊数值（OPG值）。在免疫接种后第13天和第20天称量3个组的鸡重量，计算平均体重和增重；免疫后的第13～16天，每天从试验组随机抽取4只鸡，剖检肠道，记录肠道病变记分及肠内容物情况，观察疫苗反应程度；免疫后第21天，分别从姜黄素实验组和未加姜黄素实验组以及阳性对照组各组随机取8只鸡，共分为3个攻虫组，另取8只空白组鸡作为阴性对照组，每组鸡称重后，分别对姜黄素实验组和未加姜黄素实验组以及阳性对照组经口灌服混合强毒株卵囊（每只鸡灌服10万个柔嫩艾美耳球虫强毒株卵囊、5万个毒害艾美耳球虫强毒株卵囊、5万个巨型艾美耳球虫强毒株卵囊和3万个堆型艾美耳球虫强毒株卵囊），攻虫后第6天结束试验，评价疫苗免疫保护效果。

1.3.3 评价指标 对试验组免疫的临床状况，克粪卵囊值、肠道病变记分和内容物、鸡群增重情况、免疫保护效果等各项指标进行观察和评价［9］。利用SPSS 18.0数理统计软件和Excel软件对两个试验之间相对增重的差异性进行比较。

2 结果与分析

2.1 临床状况 整个试验过程中，免疫组鸡健康状况良好，食欲正常，无鸡球虫病引起的鸡只死亡。疫苗反应期，姜黄素实验组和未加姜黄素实验组鸡有零星的饲料粪和番茄粪，但姜黄素实验组的饲料粪和番茄粪数量要少于未加姜黄素实验组。攻虫后各组鸡都出现了不同程度的临床症状。阳性对照组鸡精神沉郁，食欲减退，羽毛无光泽，消瘦、脱水等症状明显；免疫组的鸡反应轻微，仅有1～2只表现精神不佳，食欲较差，消瘦等症状。

2.2 卵囊OPG值 于免疫后第5～8天和第13～16天，每天从每个免疫组挑取粪便，用麦氏计数板法检测鸡群的卵囊OPG值，结果如表1所示。免疫后第5～8天，卵囊排泄高峰期都在第6天。免疫后第13～16天，未加姜黄素实验组卵囊排泄高峰期出现在第14天高峰，而姜黄素实验组卵囊排泄高峰期是在第15天。

表1 免疫后第5～8天和第13～16天的卵囊OPG值个／羽

2.3 疫苗反应期［6］

2.3.1 肠道剖检 免疫后第13～16天，未加姜黄素实验组和姜黄素实验组的肠道浆膜和粘膜均无明显的病变，仅有轻微的肠道反应。在免疫后15天，剖检肠道发现未加姜黄素实验组小肠中段肠内容物呈水样。免疫后第16天，未加姜黄素实验组小肠中段，肠外观苍白，内容物水样，黏膜层较粗糙；而姜黄素实验组肠道较健康，与空白组外观接近。

2.3.2 肠道病变记分 在免疫后第13～16天，姜黄素实验组和未加姜黄素实验组的肠道病变记分见表2。

表2 免疫后第13～16天疫苗反应十二指肠、小肠中段和盲肠病变记分结果

2.3.3 鸡群增重情况 免疫后第13天和免疫后第20天增重情况如表3所示。免疫后第13天和免疫后第20天，未加姜黄素实验组和姜黄素实验组之间的增重均无显著性差异（P＞0.05），而且均与空白组接近。但姜黄素实验组要稍好于未加姜黄素实验组，说明姜黄素对免疫球虫疫苗的鸡群增重有一定促进作用。

表3 免疫后第13天和第20天增重情况

2.4 免疫效果 免疫后第21天，使用强毒混合株卵囊攻虫。攻虫后6天，发现未加姜黄素实验组和姜黄素实验组的均能耐受强毒株的攻击，详细病变记分如表4所示。从肠道病变记分和增重来看，未加姜黄素实验组要稍差于加姜黄素组，但无显著性差异（P＞0.05），这可能跟姜黄素具有肠道炎症抑制作用有一定的联系。

表4 免疫后21天攻虫后增重、粪便记分、肠道病变记分以及鸡死亡率情况表

3 讨论与小结

3.1 姜黄素对球虫疫苗首免的影响 对姜黄素实验组和未加姜黄素实验组免疫后的第5～8天也即首免监测发现，加有姜黄素的组别的卵囊排泄量要低于未加姜黄素实验组，但其卵囊排泄量是《正典球苗使用指南》中卵囊监测的范围内。鸡球虫病活疫苗疫苗是由药物敏感性早熟系虫株组成，对常见的抗球虫药物敏感。尽管试验中的姜黄素首免监测的卵囊量较少，但属正常范围，这表明了该肠道修复剂不会明显抑制球虫的增殖和影响鸡群首免的建立。

3.2 姜黄素对疫苗反应期的影响 肠炎是鸡养殖场常见的疾病之一，其中以坏死性肠炎是最易发生且危害最大［10－3］。在免疫后的13～16天，鸡群可能会出现疫苗反应情况，在此期间如有其他不良的影响因素如应激、病原菌继发感染，就可能引起肠炎的发生［6］。而姜黄素具有抑制多种炎症因子的作用，能够明显减轻肠组织的损伤，减弱坏死性肠炎炎症反应，对急性、亚急性和慢性肠炎均有药效作用。其作用机理是通过减少中性粒细胞浸润，抑制脂质过氧化物反应。在姜黄素对新生大鼠坏死性肠炎的试验指出，姜黄素能够降低促炎因子TNF－α和炎性介质COX－2的表达，同时增加抑炎因子IL－10的表达，进而达到抑制坏死性肠炎的作用［13］。在本次实验中，疫苗反应期的姜黄素实验组的十二指肠、小肠中段、盲肠病变记分均低于未加姜黄素实验组。剖检肠道发现，姜黄素实验组的肠道粘膜层正常与空白对照组较接近；而未加姜黄素实验组肠道苍白，有轻微肠炎症状，个别鸡肠道含较多饲料样或水样内容物。在免疫后第13天和第20天对未加姜黄素实验组和姜黄素实验组的鸡群相对增重与空白对照组无显著差异（P＞0.05），但姜黄素实验组增重情况均要好于不加药组。因此，从试验结果来看，姜黄素在疫苗反应期对鸡群肠道健康有一定的改善和修复作用。

3.3 姜黄素对疫苗免疫效果的影响 免疫21天后，对未加姜黄素实验组和姜黄素实验组使用强毒株攻虫后发现，免疫组鸡均能抵抗强毒株的攻击，无鸡只死亡，肠道病变记分和粪便记分均较低，且相对增重与阳性对照组间差异性显著（P＜0.05），与空白对照组的增重差异不显著（P＞0.05）；姜黄素实验组的肠道病变记分和粪便记分比未加姜黄素实验组的要低，增重情况也好于未加姜黄素实验组，但两组之间的增重无显著差异（P＞0.05）。综合免疫效果来看，使用姜黄素后肠道粘膜完好程度和粪便样式都趋于正常，进而体现出较好的增重情况，同时鸡群也表现出良好的免疫保护效果。

从本试验可以看出，姜黄素是一种良好的肠道剂，具有较好的肠道修复作用，对球虫疫苗的免疫建立没有影响，能够改善肠道健康状况，在一定程度上抑制炎症的发生，还可对球虫疫苗免疫起辅助性作用。因此，在实际生产中针对某些地区或某个免疫阶段，在使用球虫疫苗过程中肠炎压力较大时，可使用肠道修复剂预防或辅助治疗肠炎。

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（编辑：李文平）

Effects of Intestinal Repair Agent－curcum in on Coccidiosis Vaccination

LIU Li－dan1，WU Song－ming1，LIAO Gui－cheng1，TANG Jian－hong1，WENG Ya－biao1，2∗
（1.Foshan Standard Biotech Co.，Ltd，Foshan，Guangdong 528138，China；2.College of Veterinary Medicine，South China Agricultural University，Guangzhou 510624，China）

In order to study effects of intestinal repair agent－curcumin on immunization chickens，curcumin was included in one experiment group during coccidium immunization.Chicken mental condition，oocysts output，intestinal lesion scores and weight gain in vaccine reaction period，and immunity to coccidium after 21stwere evaluated.Results showed that in drug and immunization group chicken mental condition was very well，also the oocysts output was normal，the intestinal lesion scores of vaccine reaction period were lower than those in immunization group，and weight gains of vaccine reaction period were higher than that in immunization group.After 21stimmunization，the two groups were challenged by virulent strains，and results showed thatweight gains of drug and immunization group were higher than those of immunization group，which was not significant（P＞0.05）.What’smore，the intestinal lesion and feces scores were lower than those of immunization group.Therefore，curcumin，kind of intestinal repair agent，has the effects of repairing intestinal injury，improving intestinal health，and assisting anti－coccidial immunity.

curcumin；intestinal repair agent；coccidiosis live vaccines；immunization effects

2014－10－16

A

1002－1280（2015）02－0022－05

S855.9

鸡球虫病药敏虫株七价活疫苗的研制及其应用研究（2011C01）

刘丽丹，硕士，从事兽医寄生虫研究工作。

翁亚彪。E－mail：ybweng＠qq.com