抗凝剂EDTA导致血小板假性减少现象的分析

仝德胜，杨静，沈国强

(1、江苏省血吸虫病防治研究所，江苏 无 锡214064；2、无锡市第九人民医院，江苏 无 锡214062)

血小板计数是临床上最常规的实验项目，是血常规的检测指标之一，其结果的准确性直接影响到对患者的诊断和治疗。随着血细胞分析仪的广泛推广和使用，EDTA-K2作为血细胞分析的较为理想的抗凝剂已被广泛使用，但EDTA可导致个别人血液中血小板发生聚集引起假性血小板减少(EDTA-PTCP)，因此引起误诊的病例，这种现象现在有越来越多的报道[1-3]。近年来我们在工作中发现几例EDTA依赖性血小板减少的患者，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 选取2012年8月-2014年5月在无锡市第九人民医院住院患者8例和2014年6月在江苏省血吸虫病防治研究所健康体检人员1例，其临床症状均无皮肤紫癜、牙龈出血、鼻出血等症状。其中最早1例住院患者经输注10单位机采血小板后，隔日检测血小板，数量没有明显改变。

1.2 仪器和试剂 Sysmex XE-1800血液分析仪及原装试剂，贝克曼-库尔特Ac.T5diff AL血细胞分析仪及原装试剂；OLYMPUS显微镜，改良牛鲍氏(Neubauer)计数板，自配人工计数血小板草酸铵稀释液，BD公司生产的EDTA-K2真空采血管。

1.3 方法 第1例患者经专家会诊后重新抽取4ml静脉血分别由EDTA-K2抗凝2ml和肝素钠抗凝2ml，两份样本在Sysmex XE-1800血液分析仪分别于10min和60min各检测三次取均值，同时制备EDTA-K2抗凝血的涂片经瑞氏染色后镜检，观察血小板的形态和聚集情况。另外取患者末梢血加入草酸铵稀释液按全国临床检验操作规程操作计数血小板并制作血涂片经瑞氏染色后镜检，观察血小板的形态和聚集情况[4]。后8例都由第二日清晨抽血按上述方法检测，其中江苏省血吸虫病防治研究所体检人员1例在贝克曼-库尔特Ac.T5diff AL血细胞分析仪上检测

1.4 统计学处理 采 用SPSS 13.0统计软件，计量资料以±s表示，采用t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2008年8月第一例患者在无锡第九人民医院住院，检测发现血小板结果25×109/L,病人没有皮肤紫癜、牙龈出血、鼻出血等症状，后输入10单位机采血小板后，隔日检测血小板结果27×109/L，经会诊，手工检测血小板结果188×109/L，经EDTAK2抗凝血的血涂片由瑞氏染色镜检发现大量血小板聚集，末梢血涂片血小板散在无聚集。另外8例检测结果见表1。

使用EDTA-K2抗凝剂两次血小板计数(10min和60min)明显低于使用抗凝剂肝素钠和手工血小板计数，与后两种方法计数均存在明显差异 (P<0.05)；使用抗凝剂肝素钠检测的血小板数和手工检测血小板数之间没有明显差异(P>0.05)。

3 讨论

乙二胺四乙酸(EDTA)盐对白细胞、红细胞形态影响很小，因此国际血液学标准委员会(ICSH)推荐将EDTA-K2作为血细胞计数的首选抗凝剂。但EDTA-K2有时会引起血小板聚集，从而在血细胞分析仪上检测时出现血小板假性减少，文献报道发生率0.09%~0.21%[5-7]。其发生机制是由于EDTA-K2作为抗凝剂的前提下出现的免疫介导血液中的冷抗血小板自身抗体，使血小板发生凝聚。尽管临床发生率低，但极易延误诊断，造成不必要的治疗，增加病人的经济负担，我们遇到的第一例患者就因此为患者输入10单位机采血小板。

表1 3种检测方法测定血小板结果比较

EDTA-PTCP患者一般除原发疾病临床表现外，无皮肤黏膜紫癜、牙龈出血、鼻出血、胃肠道和泌尿系统出血和临床表现。因此为排除EDTA-K2致血小板假性减少，有文献报道，应重新采样在EDTA-K2抗凝管中加入丁胺卡那霉素或使用枸橼酸钠抗凝管来解决，另外肝素钠也可以作为解决血小板假性减少的抗凝剂使用，我们在实际工作中就是采用此方法，从结果上看，基本可以解决这个问题[8，9]。当然，为排除因血小板假性减少而发生误诊，检验医生与临床医生应及时沟通，及时询问病史。EDTA-K2致血小板假性减少的血小板计数和实际值相差很大，因此对临床上无出血表现而血小板计数明显减少患者，应引起临床和检验医生注意，要考虑EDTA-K2致血小板假性减少可能性，及时手工计数血小板或更换抗凝剂使用仪器分析并制作血涂片进行检测[10]，避免误诊。

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