L-FABP和NAG在重症急性胰腺炎合并急性肾损伤中的早期诊断价值

柯贵宝，刘 哲，徐云滢，向 谦，蒲 红，邓茂林

(成都大学附属医院内科，四川 成都 610081)

L-FABP和NAG在重症急性胰腺炎合并急性肾损伤中的早期诊断价值

柯贵宝，刘 哲，徐云滢，向 谦，蒲 红，邓茂林

(成都大学附属医院内科，四川 成都 610081)

目的：探讨肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)和N-乙酰-β-D氨基葡萄糖酐酶(NAG)在急性重症胰腺炎(SAP)合并急性肾损伤(AKI)患者中的早期诊断价值。方法：收集15例健康体检者作为正常对照，将161例急性胰腺炎(AP)患者分为轻度(MAP)、中度(MSAP)、重度(SAP)3组，其中SAP 组又分为AKI和非AKI亚组。分别采用酶联免疫分析法(ELISA)和终点法测定正常对照组及AP患者发病后4～24 h的尿液L-FABP、NAG水平。结果：SAP组中AKI亚组的L-FABP和NAG水平明显高于非AKI亚组(P<0.01)。结论：尿L-FABP和NAG可以作为检测SAP合并 AKI的早期生物标记物。

重症急性胰腺炎；急性肾损伤；肝型脂肪酸结合蛋白；N-乙酰-β-D氨基葡萄糖酐酶

急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)是重症急性胰腺炎 (severe acute pancreastitis，SAP)常见的并发症之一，其发生率仅次于肺功能障碍，一旦发生急性肾衰竭(acute renal failure，ARF)，会导致其他脏器衰竭的发生率明显升高，患者的病死率高达71%～84%。传统的诊断指标如血清尿素和肌酐不能早期反映肾小球滤过率的下降，且受影响的因素较多。近年来发现的一些新型的生物学标志物如：肝型脂肪酸结合蛋白(Liver-type fatty acid binding protein，L-FABP)和N-乙酰-β-D氨基葡萄糖酐酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase，NAG)等能在早期反映肾功能的变化。本实验主要探讨L-FABP和NAG在SAP并发AKI的早期诊断价值。

1 资料和方法

1.1 一般资料 前瞻性收集2012年5月至2014年2月期间我院健康体检者及住院患者的尿液共176例。正常对照组15例为我院门诊健康体检者。161例急性胰腺炎(acute pancreastitis，AP)患者均为我院住院患者，其中：男113例，女48例；年龄24～68岁，平均50.2岁。将急性胰腺炎患者分为4组：轻度急性胰腺炎(mild acute pancreatitis，MAP)组(MAP组)、中度急性胰腺炎(moderately severe acutepancreatltls，MSAP)组(MSAP组)、重度急性胰腺炎非AKI亚组(NO-AKI组)和重度急性胰腺炎AKI亚组(AKI组)。所有入选患者均签署知情同意书。AP诊断符合中华医学会消化病学分会胰腺疾病学组的诊断标准[1]。根据AKI诊断标准[2]，设计AP合并AKI诊断标准：尿量减少[尿量<0.5 mL/(kg·h)]超过6 h；或血清SCr水平较前升高>50%；或SCr升高绝对值>25 μmol/L。排除标准：住院治疗时间超过发病时间24 h，既往有慢性肾脏疾病，本次发病前有AIDS、肿瘤、严重感染、严重创伤及手术后的患者均不纳入本研究。

1.2 标本采集和主要试剂 收集健康体检者和入选患者发病后4～24 h内的清洁中段尿液20 mL，离心后取上清液置-80℃冰箱保存待测。记录入院患者的24 h尿量，每12～24 h监测一次SCr变化。尿L-FABP采用ELISA法检测，试剂盒购自美国RD公司。尿NAG采用终点法检测，试剂盒购自浙江夸克生物科技有限公司。

1.3 尿L-FABP和NAG检测 尿L-FABP用ELISA试剂盒进行检测，操作严格按说明书进行，结果除以尿肌酐值进行校正。尿NAG检测采用Olympus AU5400自动生化分析仪。

1.4 统计学处理 采用SPSS17.0软件进行统计分析，多样本均数比较采用单因素方差分析。

2 结 果

2.1 AKI发生情况 本实验中，MAP、MSAP、SAP患者分别为94例、38例、29例。29例SAP患者有17例发生AKI，约占SAP患者的58.62%，其中4例AKI患者依据尿量减少标准诊断，另13例患者依据SCr变化诊断AKI，其SCr升高达到AKI诊断标准的时间约在发病后60～72 h。MAP和MSAP患者无AKI发生者。

2.2 尿L-FABP和尿NAG表达 结果详见表1。

表1 各组尿L-FABP、尿NAG水平比较

注：1)与AKI组比较P<0.01

AKI组L-FABP水平明显高于NO-AKI组、MSAP组、MAP 组、正常对照组(P<0.01)；NO-AKI组、MSAP组、MAP组及正常对照组之间两两比较无显著性差异(P>0.05)。AKI组NAG水平明显高于NO-AKI组、MSAP组、MAP组、正常对照组(P<0.01)；NO-AKI组、MSAP组、MAP组及正常对照组之间两两比较均无显著性差异(P>0.05)。

3 讨 论

AP是指多种病因导致的胰酶在胰腺内被激活后引起胰腺组织自身消化、水肿、出血、坏死的炎症反应，若发展为SAP，常累及肾脏，发生AKI甚至多脏器功能衰竭，病死率极高。故早期发现并防治AKI的进展，对SAP患者的预后具有重要意义。SAP伴AKI主要表现包括无尿、少尿和血清肌酐升高，目前主要依据SCr来诊断AKI，但SCr反应较慢，常在肾脏受损后约72 h才能诊断出AKI[3]。本研究中，通过SCr依据诊断为SAP伴AKI的患者，均在AP发病2 d后。故如果依据SCr标准来诊断SAP伴AKI，将不利于患者肾功能的恢复。

近年来，已有大量报道提示[4-5]，尿L-FABP、尿NAG可作为AKI的早期生物标志物。研究提示，肾脏受损伤因素影响后4～24 h，L-FABP和NAG水平明显增高[6-7]；故本研究收集AP发病后4～24 h的尿液来检测L-FABP和NAG，明确L-FABP和NAG能否作为SAP合并AKI检测的早期生物标志物。

脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein ，FABP)是在人体脂肪酸代谢活跃的组织中大量表达的细胞质蛋白，相对分子质量为14 000。肾脏中有2种类型，心脏型(H-FABP，表达于远端肾小管)和肝脏型(L-FABP，表达于近端肾小管)，在近端肾小管游离脂肪酸与上皮细胞胞浆FABP结合，进而转运到线粒体或过氧化物酶体进行β-氧化代谢。L-FABP与Cys C一样，相对分子质量很小，所以能被肾小球滤过，又像其他小分子蛋白那样在近端小管被重吸收。本研究结果提示L-FABP在NO-AKI组、MSAP组、MAP组及正常对照组之间两两比较均无显著性差异(P>0.05)，而在AKI组则明显高于NO-AKI组(P<0.01)，提示尿L-FABP可以作为检测SAP合并AKI早期的生物标志物。

NAG是近端肾小管溶酶体酶，是肾小管损害敏感和持久的指标，在糖尿病肾病、慢性肾小球疾病、肾毒性物质损伤、移植肾功能延迟恢复等都可观察到尿NAG增高。尿NAG增高也是危重患者AKI的敏感指标，可早于血清肌酐升高12～96 h。AKI的患者尿NAG越高，预后越差[8]。本研究结果提示NAG在NO-AKI组、MSAP组、MAP组及正常对照组之间两两比较均无显著性差异(P>0.05)，而在AKI组则明显高于NO-AKI组 (P<0.01)，提示尿NAG可以作为检测SAP 合并AKI早期的生物标志物。

总之，对于既往无慢性肾脏疾病、无恶液质、发病前无严重感染的患者，尿L-FABP和尿NAG对SAP合并AKI的早期诊断具有重要意义。

[1]中华医学会消化病学分会胰腺疾病学组.中国急性胰腺炎诊治指南(2013)[J].中华消化杂志，2013，33(4)：217-222.

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[3]BAGSHAW S M,BELLOMO R,DEVARAJAN P,et al.Review article: Acute kidney injury in critical illness[J].Can J Anaesth,2010,57(11):985-998.

[4]韦莉，王敏，施瑞华，等.24h尿NAG与尿NAG/肌酐比值在IgA肾病早期肾损害检测中的临床意义[J].南京医科大学学报:自然科学版，2013，33(3)：396-397.

[5]刘艳，刘丹，黄泽智.血清α1-MG、β2-MG、Hs-CRP和尿NAG联合检测对早期肾损害诊断的临床应用研究[J].国际检验医学杂志，2012，33(20)：2544-2545.

[6]吴卫华.尿NAG检测在造影剂肾病早期诊断中的应用[J].检验医学，2012，27(4)：318-320.

[7]刘红，岳华，赵红娟，等.尿NAG、mALB、β2-MG、α1-MG检测对早期肾损害的诊断价值[J].西部医学，2011，23(2)：239-241.

[8]LIANGOS O,PERIANAYAGAM M C,VAIDYA V S,et al.Urinary N-acetyl-beta-(D)-glucosaminidase activity and kidney injury molecule-1 level are associated with adverse outcomes in acute renal failure[J].J Am Soc Nephrol, 2007,18(3):904-912.

The Diagnostic Value of L-FABP and NAG in Adult Severe Acute Pancreatitis with Acute Kidney Injury

KE Guibao,LIU Zhe,XU Yunyin,XIANG Qian,PU Hong,DENG Maolin

(Department of Internal Medicine,Affiliated Hospital of Chengdu University,Sichuan Chengdu 610081,China)

Objective:To investigate whether human urinary L-FABP and NAG should be regarded as early predictive markers in SAP with AKI.Methods:161 cases of acute pancreatitis(AP) were divided into the mild acute pancreatitis(MAP) group; moderately severe acute pancreatitis(MSAP) and SAP group;and the latter were divided into non-AKI subgroup and AKI subgroup. L-FABP was measured by using sandwich ELISA and NAG levels was measured by using End-point method.Results:The urinary L-FABP and NAG levels in AKI subgroup were significantly higher than those in the non-AKI subgroup(P<0.01).Conclusion:The urinary L-FABP and NAG levels can be used as early potential markers in SAP with AKI.

severe acute pancreatitis;acute kidney injury;liver-type fatty acid binding protein;N-acetyl-β-D-glucosaminidase

四川省卫生厅科研课题项目资助(100074)，成都大学附属医院科研课题项目资助(201317)

柯贵宝，gbke@outlook.com

R657.51 <[文献标志码]A class="emphasis_bold">[文献标志码]A DOI:10.11851/j.issn.1673-1557.2015.04.008[文献标志码]A

10.11851/j.issn.1673-1557.2015.04.008

A DOI:10.11851/j.issn.1673-1557.2015.04.008

http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1688.R.20150721.1717.042.html

2014-07-07)