桂枝茯苓复方中桂枝挥发油提取及其包合工艺研究

路 丽，关琴笑，赵 路，容悦莹，梁生旺，王淑美

(广东药学院 中药学院，广东 广州 510006)



桂枝茯苓复方中桂枝挥发油提取及其包合工艺研究

路 丽，关琴笑，赵 路，容悦莹，梁生旺，王淑美*

(广东药学院 中药学院，广东 广州 510006)

目的：优选桂枝茯苓复方中挥发油提取及其β-环糊精包合的最佳工艺。方法：采用正交试验法，以挥发油提取率为评价指标，加水量、浸泡时间、蒸馏时间为考察因素筛选桂枝茯苓复方中挥发油最佳提取工艺；以挥发油包合率为评价指标，挥发油与β-环糊精的投料比、包合温度、包合时间为考察因素优选其β-环糊精最佳包合工艺。结果：桂枝茯苓复方中挥发油最佳提取工艺为取药材适量，加8倍量水，浸泡4h，蒸馏提取5h；其最佳包合工艺为：挥发油与β-环糊精的投料比为1∶6(mL∶g)，包合温度为70℃，搅拌包合2h。结论：该实验优选的挥发油提取及包合工艺稳定可行。

桂枝茯苓复方；挥发油；提取；包合；正交试验设计

桂枝茯苓复方是由桂枝、茯苓、桃仁、赤芍、牡丹皮五种药味组成，具有活血、化瘀、消徵之功效[1]。用于妇人瘀血阻络所致块、血瘀经闭、行经腹痛、产后恶露不尽；子宫肌瘤、慢性盆腔炎包块、子宫内膜异位症、卵巢囊肿上述证候者。复方中君药桂枝主要含有挥发油类成分，临床及药理研究表明，挥发油具有重要的生理活性。因此，本研究采用正交试验设计对其挥发油提取工艺进行优化。但因挥发油具有易氧化、易挥发的特性[2]，故采用β-环糊精包合挥发油，正交试验优选出最佳包合工艺，从而增加挥发油的稳定性。

1 仪器与材料

1.1 仪器

挥发油提取器；BSZZ4S型电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)；FN202-2型电热干燥箱(长沙仪器仪表厂)；DK-S26型电热恒温水浴锅(上海精宏试验设备有限公司)；6202小型高速粉碎机(北京环亚天元机械技术有限公司)。

1.2 试药

桂枝药材购自广州致信中药饮片有限公司，经广东药学院刘基柱教授鉴定为：樟科植物肉桂(CinnamomumcassiaPresl)的干燥嫩枝；β-环糊精(天津市光复精细化工研究所，纯度≥99%)；屈臣氏蒸馏水；其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 桂枝挥发油提取工艺

2.1.1 挥发油的制备 按处方比例称取桂枝200g，根据正交试验设计表，加入规定量的水，浸泡一定时间，按《中国药典》2010版一部附录XD中的甲法进行挥发油的提取。回流提取到规定时间，收集挥发油，精密称定。

2.1.2 挥发油提取正交试验设计[3-4]通过预试验，本实验选取挥发油体积为评价指标，采用L9(34)正交试验优选提取工艺。选择浸泡时间(A)、蒸馏时间(B)、加水量(C)3个因素，每个因素3个水平的试验方案。因素水平设计见表1，正交试验结果见表2，方差分析见表3。

表1 提取工艺的因素水平

表2 提取工艺正交试验结果

表3 提取工艺的方差分析结果

注：F0.05(2,2)=19.00；F0.01(2,2)=99.00。

以挥发油体积为评价指标进行直观分析和方差分析，根据表3方差分析结果，对挥发油提取结果进行直观分析，比较3个因素的极差，Rc>Rb>Ra，故影响因素的大小顺序为C>B>A。由上述方差分析结果可知，因素C(加水量)各水平间有显著性差异，并结合各水平的挥发油含量以及实际生产，优选出最佳挥发油提取工艺为A2B2C2，即：药材加8倍量水，浸泡4h，蒸馏提取5h。

2.1.3 验证试验 称取桂枝200g，3份，按最佳提取工艺条件进行3次验证试验。提取挥发油体积分别为1.21mL、1.23mL、1.19mL。结果表明，该提取工艺重复性好且稳定可行。

2.2 桂枝挥发油β-环糊精包合工艺

2.2.1 包合物的制备 饱和水溶液法：精密称取β-环糊精一定量，置于250mL锥形瓶中，加蒸馏水适量，加热使溶解，制成饱和水溶液。冷却至规定温度，置磁力搅拌器上恒温搅拌，精密量取和称定挥发油适量，用无水乙醇按1∶3稀释，缓慢将其滴入含β-CD的饱和水溶液中，恒温搅拌一定时间，冷却至室温，置冰箱4 ℃冷藏24h，抽滤，包合物用少量水冲洗，再用乙醚冲洗3次，每次10mL，40℃减压干燥5h，即得包合物。

2.2.2 桂枝挥发油包合工艺正交试验设计[5-6]通过预实验，确定挥发油包合工艺的主要影响因素有：挥发油∶β-环糊精(mL∶g)、包合温度、包合时间，每个因素确定3个水平，采用L9(34)正交试验表，以包合物得率为评价指标，优选其最佳包合工艺。因素水平见表4。

表4 包合工艺因素水平

2.2.3 挥发油包合物得率测定 按《中国药典》2010版一部附录XD挥发油测定法中的甲法进行提取，将制得的干燥包合物精密称定，置于500mL圆底烧瓶中，加水200mL，水蒸气蒸馏5h，待冷却后，读取挥发油体积，精密称定。按下式计算挥发油包合物得率，包合物得率(%)=包合物得量(g) /[挥发油重(g)+β-CD重(g) ]×100%，空白回收率(%)=M收集挥发油量(mg) /M加入挥发油量(mg)×100%。见表5。

表5 包合工艺正交试验结果

方差分析表明，三个因素对包合物得率影响程度由大到小排列顺序为：A>B>C，即挥发油与β-CD的投料比对评价指标的影响最大，包合温度影响最小。最终确定最佳包合工艺条件为A2B2C2，即：桂枝挥发油与β-CD的投料比为1∶6(mL∶g)，包合温度为70℃，搅拌包合2h。

表6 包合工艺的方差分析结果

注：F0.05(2,2)=19.00；F0.01(2,2)=99.00。

2.2.4 验证试验 取挥发油及β-CD适量，按最佳包合工艺条件进行3次验证试验。挥发油包合得率分别为63.18%、61.24%、59.97%。结果表明，该包合工艺重复性好且稳定可行。

3 讨论

本研究运用正交试验设计进行挥发油提取工艺的研究，确定挥发油最佳提取工艺：加8倍量水，浸泡4h，蒸馏提取5h。试验结果表明该工艺稳定可行，挥发油得率较高。并进行挥发油包合试验，确定了挥发油最佳包合工艺为：桂枝挥发油与β-CD的投料比为1∶6 (mL∶g)，包合温度为70℃的条件下包合2h。

桂枝中的挥发油为镇静、镇痛、解热作用的有效成分，但易挥发且遇光、热不稳定。在传统工艺中，含挥发油的固体制剂多是将挥发油单独提取后，用易挥发的溶媒(乙醇)稀释后，喷洒或兑于浸膏中，其热稳定性差，无法保证制剂在有效期内的质量和临床疗效[7]。通过β-环糊精包合技术，液态的桂枝挥发油成为稳定的固态，增强了其稳定性，同时由于β-CD的特性，提高了制剂的生物利用度。

[1] 国家药典委员会. 中国药典(一部)[S].北京：中国医药科技出版社，2010：984.

[2] 傅亮，饶小勇，黄恺，等. 四逆泡腾片中挥发油提取及包合工艺[J]. 中国实验方剂学杂志，2012，18(4)：5-9.

[3] 杨敏，许汉林，潘洪林. 莪术挥发油的提取及包合工艺研究[J]. 时珍国医国药，2008，19(6)：1404-1405.

[4] 严建业，王元清，喻林华，等. 八角茴香挥发油的提取与β-环糊精包合研究[J]. 中成药，2010，32(2)：316-318.

[5] 李钟，林秀旎，胡海容. 广藿香和佩兰挥发油提取和包合工艺的研究[J]. 中成药，2009，31(4)：632-633.

[6] 贾晓斌，高成林，陈彦，等. 小儿腹泻暖脐散中挥发油的提取及其β-环糊精包合物的制备研究[J]. 中成药，2009，31(12)：1852-1854.

[7] 王锐，刘晓莉，葛斌，等. 消乳增胶囊挥发油提取及其β-环糊精包合工艺研究[J]. 中成药，2013，35(3)：619-621.

(责任编辑：宋勇刚)

Study on the Technological Process of the Extraction and the β-Cyclodextrin Inclusion of the Volatile Oil in Guizhifuling Compound

Lu Li，Guan Qinxiao，Zhao Lu，Rong Yueying，Liang Shengwang，Wang Shumei*

(Guangdong Parmaceutical University, Guangzhou 510006, China)

Objective:To study the extraction and β-cyclodextrin inclusion of volatile oil in Guizhifuling compound.Methods:The extraction technology of volatile oil from Guizhifuling compound was optimized by orthogonal test design with the yield of volatile oil as evaluation index and with the amount of water, soaking time and extraction time as factors. Inclusion process of β-CD was optimized by volatile oil rate as evaluation index and with the ratio of volatile oil to β-CD, inclusion temperature and mixing time as factors. Results:The optimal preparation process for extraction was established as follows: assign 8 times water into mixture of crude drugs, soaking 4h with water and distillating for 5h. The suitable inclusion condition was established as follows: the proportion of volatile oil and β-CD was 1∶6 (mL∶g), the inclusion temperature was 70 ℃ and mixing time was 2h. Conclusion:This method established for the extraction of volatile oil and β-cyclodextrin inclusion process was steady and feasible.

Guizhifuling Compound; Volatile Oil; Extraction; Inclusion; Orthogonal Test Design

2014-08-25

国家自然科学基金项目(81073024)

路丽(1990-)，女，广东药学院硕士研究生，研究方向为中药质量控制。

王淑美(1966-)，女，博士，广东药学院教授，硕士生导师，研究方向为中药质量控制。E-mail：shmwang@sina.com

R284.2

A

1673-2197(2015)01-0020-03

10.11954/ytctyy.201501011