付殿彬,刘 佳,李丽静
(长春中医药大学,吉林 长春 130117)
镇痛散部分药效学研究
付殿彬,刘 佳,李丽静*
(长春中医药大学,吉林 长春 130117)
目的:研究镇痛散的部分药效学。方法:通过热板镇痛实验、扭体实验和耳肿胀实验,研究镇痛散的镇痛及抗炎作用。结果:实验表明镇痛散能延长小鼠的痛阈值,减少小鼠的扭体次数,抑制小鼠耳肿胀度。结论:镇痛散具有镇痛和抗炎作用。
镇痛散;药效学;实验研究
散剂是指将一种及多种药物或药物提取物经合理配方,精细粉碎,混和均匀而制成的粉末状药剂,是一种古老的剂型,我国最早医药典籍《黄帝内经》中就有记载。历代医家应用很多,因疗效确切,一直沿用至今。
镇痛散为我院自制制剂,由三七、元胡、冰片、大黄等十味中药组成,具有行气、活血、生肌、化瘀、止痛等作用。本制剂将中药材醇提水煎提取物干燥至恒重,利用超微粉碎机粉碎成细粉,与血竭、冰片细粉及适量糊精混合均匀,制得。本试验中主要对镇痛散药效进行验证,具体报道如下。
1.1 实验动物
ICR小鼠,体重(20±2)g,实验用饲料为鼠专用饲料,所有实验动物及饲料均购于吉林大学白求恩医学院实验动物中心,合格证号:0008217。
1.2 仪器
YLS-6A智能热板仪(山东省医学科学院设备站)。
1.3 药品及试剂
镇痛散,由三七、元胡、冰片、大黄等十味中药组成;醋酸;二甲苯。
2.1 对小鼠热板痛阈的影响
在室温22℃下,调节热板恒温装置,使温度控制在(55±0.5)℃。雌性小鼠,体重(20±2)g,每次放1只在热板上,小鼠从放在热板上至出现舔后足所需时间(s)作为该鼠痛阈值。舔后足时间<5s或>30s或跳跃者,弃之不用。
将合格的48只小鼠随机分为4组,每组各12只,即模型组、镇痛散高剂量组(60g生药/kg)、镇痛散中剂量组(30g生药/kg)、镇痛散低剂量组(15g生药/kg)测其正常痛阈值(即用药前痛阈值)[1]。灌胃给药,模型组给以相应体积的蒸馏水,每天1次,连续3天,分别于给药后0.5、1.0、1.5、2.0h测定小鼠痛阈值。如60s仍无反应,将小鼠取出以免烫伤,其痛阈值以60s计算[2]。见表1。
组别痛阈值(s)0.5h1.0h1.5h2.0h模型组(n=12)14.05±4.87016.62±2.24314.44±2.95621.02±3.321高剂量组(n=12)20.38±7.33721.93±5.592▲22.95±7.030▲▲27.31±5.988▲中剂量组(n=12)18.96±3.370▲22.09±5.048▲23.15±4.762▲▲▲26.79±6.779▲低剂量组(n=12)15.67±2.63620.92±3.899▲18.16±2.584▲21.21±5.550
注:与模型组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01,▲▲▲P<0.001。
结果显示,与模型组比较,给药0.5h后中剂量组有显著差异(P<0.05);给药1.0h后,高剂量组、中剂量组和低剂量组均有显著差异(P<0.05);给药1.5h后,高剂量组、中剂量组有极显著差异(P<0.01),低剂量组有显著差异(P<0.05);给药2.0h后,高剂量组和中剂量组均有显著差异(P<0.05)。结果表明镇痛散具有明显的镇痛作用。
2.2 对醋酸致小鼠扭体的影响
实验控温(20±1)℃,雌性小鼠40只,体重(20±2)g,分组同上,分别灌胃给药,模型组给以相应体积的蒸馏水,每天1次,连续3天,于末次给药后1h,每只小鼠腹腔注射0.6%的醋酸溶液0.2mL,观察给予醋酸后15min内小鼠的扭体反应(腹部收缩内凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行)次数[4],并计算扭体反应抑制率[2]。结果见表2。
扭体反应抑致率(%)=(模型组扭体均数-药物组扭体均数)/模型组扭体平均值×100%[3]
组别扭体次数(次)扭体反应抑制率(%)模型组(n=10)30.13±9.717-高剂量组(n=10)17.88±5.222▲▲40.66中剂量组(n=10)22.38±5.70625.72低剂量组(n=10)21.00±4.567▲30.30
结果显示,与模型组比较,高剂量组有极显著差异(P<0.01),中剂量组无显著差异,低剂量组有显著差异(P<0.05)。结果表明:镇痛散高剂量组和低剂量组具有明显镇痛作用。
2.3 对小鼠耳廓炎症的影响
雄性小鼠40只,体重(20±2)g,分组同上,分别灌胃给药,模型组给以相应体积的蒸馏水,每天1次,连续3天,于末次给药后1h,将0.02mL二甲苯涂于小鼠右耳廓两面致炎;0.5h后,将小鼠颈椎脱臼致死,沿耳廓基线剪下两耳,用6mm打孔器分别在同一部位打下圆耳片,精密称重,并计算肿胀度和肿胀抑制率。见表3。
肿胀度=左耳片重-右耳片重
肿胀抑制率(%)=(模型组耳肿率-实验组耳肿率)/模型组耳肿率×100%
组别肿胀度(g)肿胀抑制率(%)模型组(n=10)0.0089±0.00168-高剂量组(n=10)0.0060±0.00123▲▲32.58中剂量组(n=10)0.0066±0.00196▲▲25.84低剂量组(n=10)0.0069±0.00120▲22.47
实验中模型组小鼠右耳明显红肿,厚度增加,两耳片差异较大,与模型组比较,高剂量组、中剂量组均有极显著差异(P<0.01),低剂量组有显著差异(P<0.05);结果表明镇痛散具有抗炎作用。镇痛散的部分药效学研究结果表明,镇痛散具有镇痛、抗炎作用。
热板镇痛试验中,由于雄性小鼠受热后阴囊触及热板,也可能出现反应(舔后足),因此试验中选择雌性小鼠。室温15~20℃,小鼠的痛反应波动不大,若室温过低,动物反应迟钝,室温过高,动物则反应较敏感;小鼠扭体预试验中,发现雄性小鼠的试验结果波动性较大,而雌性小鼠的试验结果较好,因此试验选择雌性小鼠。
[1] 黄民,张春晓,刘永峰,等.可卡因对大鼠痛阈和缰核痛相关神经元放电的影响[J].中国应用生理学杂志,2006,22(2):172-173.
[2] 陈小野,张宇鹏,蒋小丽,等.热板法、醋酸扭体法疼痛模型寒、热属性的初步研究[J].浙江中医学院学报,2005,29(4):46-52.
[3] 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,2001:882-883.
[4] 刘和莉,李月玲,薛永志.不同温度和醋酸浓度对小鼠扭体疼痛模型的影响[J].包头医学院学报,2006,22(2):137-138.
[5] 朱禧星.实用内科学[M].上海:上海医科大学,1995:413.
(责任编辑:李岚春)
2014-11-20
付殿彬(1986-),男,长春中医药大学硕士研究生,研究方向为中药复方药效物质基础及机制。
李丽静(1970-),女,博士,长春中医药大学副教授,硕士生导师,研究方向为中药复方药效物质基础及机制。E-mail:lilijing66@163.com
R285.5
A
1673-2197(2015)06-0034-02
10.11954/ytctyy.201506015