淡竹叶黄酮对大鼠心肌缺血-再灌注损伤作用研究

汪新亮

(湖北科技学院 药学院，湖北 咸宁 437100)



淡竹叶黄酮对大鼠心肌缺血-再灌注损伤作用研究

汪新亮

(湖北科技学院 药学院，湖北 咸宁 437100)

目的：探讨淡竹叶黄酮对大鼠心肌缺血-再灌注损伤模型的机制作用。方法：将30只SD级大鼠随机分为竹叶黄酮组、假手术组及缺血再灌注组，各10只；竹叶黄酮组小鼠注射淡竹叶黄酮，缺血再灌注组及假手术组小鼠注射等分量生理盐水，连续1周，末次冠脉结扎手术前2h给予SD大鼠腹腔注射给药，左冠状动脉前降支中上1/3处作为SD大鼠结扎部位，结扎手术完成后1h剪开结扎线，用止血钳将大鼠胸腔夹闭，再灌注2h。检测所有小鼠CK水平和血清LDH，采用TTC染色法对心肌梗死面积进行测定，检测心肌组织中MDA(丙二醛)、SOD(超氧化物歧化酶)的含量。结果：与缺血再灌注组和假手术组比较，淡竹叶黄酮组小鼠的SOD超氧化物歧化酶活性明显增强，心肌梗死面积显著减小，SD大鼠丙二醛及血清LDH和CK含量明显下降。结论：淡竹叶黄酮对大鼠心肌缺血-再灌注损伤有一定保护作用，其机制可能与增强心肌抗氧化能力及稳定心肌细胞定位和增加超氧化物歧化酶活性有关。

淡竹叶黄酮；心肌缺血-再灌注损伤；作用；机制

随着我国科学技术的不断进步，临床医疗水平不断提升，冠状动脉再通术的先进医学疗法在临床中应用逐渐成熟，如冠状动脉旁路移植术、冠状动脉介入术及药物溶栓术等，能对缺血受损心肌进行及时再通，大大降低现阶段急性心血管不良事件的病死率及致残率，为急性心血管疾病患者带来新的曙光。早期再灌注治疗缺血心肌疾病能够将梗死面积降至最小，还能够令缺血心肌再次恢复生机，在实际治疗过程中，冠状动脉闭塞一定时间再进行灌注会给患者心肌细胞造成一定损伤，心肌梗死后4h对血管进行再通难以收获到预期的效果，还加快心肌细胞的死亡速率。目前，随着心细血管分子生物学研究的深入，已逐步证实心肌细胞凋亡与心肌缺血再灌注有着密切关系，细胞凋亡现象存在于缺血再灌注损伤过程，进而导致不可逆转性细胞凋亡速度加快，且缺血再灌注损伤的持续时间长短直接影响心肌细胞凋亡数量。冠状动脉再通严重并发症为心肌缺血再灌注损伤，在心肌缺血再灌注过程中易导致再灌注性心律失常、冠状动脉无复流及心肌顿抑和心肌细胞死亡等形式的心肌损伤性改变[1]。

1 实验部分

1.1 材料

1.1.1 动物 SD大鼠50只(除试验用30只，20只备用)，雄性，体重285～355g，由相关机构实验动物中心提供。

1.1.2 试剂与药品 TTC(氯化三苯基四氮唑)；含90.3%的淡竹叶黄酮，采用生理盐水进行稀释；超氧化物歧化酶活性(SOD)试剂盒，丙二醛(MDA)试剂盒，血清LDH测试盒，CK测试盒，考马斯亮兰蛋白试剂盒。

1.2 入选标准

1.2.1 选取标准 SD大鼠基本健康条件符合实验标准且得到科学证实，对研究SD大鼠进行相关传染疾病测试；大鼠精神状态良好，具有足够活动能力，能正常进食，且大鼠生命强弱程度及其他标准具有统一性[2]。

1.2.2 排除标准 基本健康条件不符合实验标准，具有微型或中型甚至重型传染疾病，体重较其他SD大鼠超重，生命迹象微弱。

1.3 操作方法

1.3.1 分组 将30只SD级大鼠随机分为竹叶黄酮组、假手术组及缺血再灌注组，各10只。竹叶黄酮组SD大鼠注射30mg·kg-1·d-1的淡竹叶黄酮，缺血再灌注组及假手术组SD大鼠注射30mg·kg-1·d-1的生理盐水，连续1周。在末次冠脉结扎手术前2h给予SD大鼠腹腔注射给药。

1.3.2 制备大鼠心肌梗死模型 对SD大鼠腹腔注射10%的水合氨醛麻醉剂(0.3mL/100g)，在无菌条件下切开气管且插管，采用专用动物呼吸机对其进行呼吸，维持频率60次/min，潮气量3mL。

1.3.3 结扎 对大鼠胸部去毛且消毒，在左冠状动脉前降支中上1/3处作为SD大鼠结扎部位，切开皮肤2cm，在第四第五助钝性分离肌层，将胸腔打开，剪开SD大鼠心包，轻压右侧胸腔，将心脏挤出，在预定位置进行结扎，若左心室出现室壁变白现象，则说明结扎成功[3]。

1.3.4 术后处理 结扎手术完成后1h剪开结扎线，用止血钳将大鼠胸腔夹闭，再灌注2h，检测CK水平和血清LDH，采用TTC染色法对心肌梗死面积进行测定，检测心肌组织中MDA(丙二醛)、SOD(超氧化物歧化酶)的含量。

2 结果

测试数据显示：与缺血再灌注组和假手术组比较，淡竹叶黄酮组小鼠的SOD超氧化物歧化酶活性明显增高，SD大鼠丙二醛及血清LDH和CK含量明显下降[4]。见图1。

图1 各组小鼠生化指标比较

3 讨论

实验结果表明：淡竹叶黄酮对大鼠心肌缺血-再灌注损伤有一定保护作用，其机制可能与增强心肌抗氧化能力及稳定心肌细胞定位和增加超氧化物歧化酶活性有关。因此，实验明确淡竹叶黄酮对抑制心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡的作用机理，为预防治疗冠心病、改善再灌注损伤心肌功能提供相应具体数据，在一定程度上有助于降低临床死亡率及致残率，进而提高患者的生活质量，但具体淡竹叶黄酮对人体心肌血管疾病的作用机制，还需临床进一步研究。

[1] 邵莹,吴启南,周婧,等.淡竹叶黄酮对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用[J].中国药理学通报,2013(2):241-247.

[2] 王健.冠心舒通胶囊对大鼠心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡影响的实验研究[J].辽宁中医药大学,2013(1):201-206.

[3] 杨明,朱姝,隋殿军,等.蜂胶总黄酮对大鼠心肌缺血-再灌注损伤诱导细胞凋亡的影响[J].中国药理学通报,2011(5):551-554.

[4] 李庆林,王成永,彭代银,等.黄蜀葵花总黄酮对心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究[J].中国实验方剂学杂志,2012(2):39-42.

(责任编辑：李岚春)

2014-11-26

汪新亮(1976-)，男，湖北科技学院讲师，研究方向为中药化学。

R285.5

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1673-2197(2015)06-0029-02

10.11954/ytctyy.201506012