河北省蛋鸡群ALV p27抗原ELISA检测

张香斋，张艳英，张召兴，史秋梅，贾青辉，李蕴玉，李佩国

（河北科技师范学院河北省预防兽医重点实验室，河北昌黎066600）

河北省蛋鸡群ALV p27抗原ELISA检测

张香斋，张艳英，张召兴，史秋梅，贾青辉，李蕴玉，李佩国

（河北科技师范学院河北省预防兽医重点实验室，河北昌黎066600）

禽白血病（Avian Leukusis，AL）是由反转录病毒科禽白血病/肉瘤病毒群病毒引起的禽类多种肿瘤性疾病的总称，可引起感染鸡免疫抑制和多组织器官发育迟缓、萎缩以及肿瘤等，造成鸡的生产性能下降甚至死亡，由鸡分离的ALV划分为A、B、C、D、E、J六个亚群。自2002年蛋鸡群发现禽白血病以来，全国各地频发，特别是自2009年以来，湖北、山东等地鸡白血病疑似病例频发，鸡群ALV的感染率高达60%，病死率高达50%以上［1］。崔治中报道，目前A/B亚群、J亚群ALV在中国均存在普遍感染［2］，尤其是致病力较强的J亚群ALV肿瘤发病率较高，对中国养禽业造成了巨大危害。目前没有疫苗和有效药物可预防和治疗该病，因此，控制AL的主要方法是通过病原检测，淘汰阳性鸡，净化种群。为此，作者对在河北省不同地区蛋种鸡场、商品蛋鸡场和疑似禽白血病的蛋鸡场分别采集样品，进行p27抗原检测，以了解河北省蛋鸡ALV感染及流行现状，为禽白血病的净化提供参考。

1 材料与方法

1.1 样品采集河北省唐山、保定、石家庄、邢台、邯郸等地区11个种鸡场种蛋2 847枚，9个商品代蛋鸡场商品蛋1 656枚。从秦皇岛卢龙、昌黎、山海关和沧州泊头等地11个养鸡场分别采集疑似禽白血病的病死鸡肿瘤组织（肝脏、脾脏、肾脏）39份。

1.2 试剂禽白血病p27抗原ELISA检测试剂盒，购自美国IDEXX公司。

1.3 试验方法参照试剂盒说明书进行。

2 结果与分析

2.1 种鸡场检测结果11个种鸡场检测结果显示，有54.5%的鸡场检测出ALV p27抗原阳性样本，以保定地区鸡场阳性率最高，达100%（2/2），石家庄、唐山、邯郸、邢台等地鸡场阳性率分别为66.7%、50.0%、33.3%、0；个体阳性率差异较大，其中石家庄1号鸡场个体阳性率高达66.9%（453/677），保定1号、石家庄3号、保定2号、唐山1号、邯郸2号场阳性率分别为15.2%、13.3%、1.6%、1.3%、1.1%，其余5个种鸡场未检测到阳性样品（表1）。

表1 种鸡场检测

2.2 商品代蛋鸡场检测结果由表2可见，9个商品代鸡场中有4个鸡场检出p27抗原阳性样本，阳性率达44.4%，其中保定地区鸡场阳性率最高，达100%（2/2），邢台和石家庄地区鸡场阳性率分别为50.0%、33.3%，邯郸地区未检出；从个体阳性率分析，保定地区1号场最高，达16.8%（31/ 184），邢台2号、保定2号和石家庄1号场分别为3.3%、2.2%和1.1%，而其他场均未检测到阳性样品。

2.3 病死鸡肿瘤组织检测结果由表3可见，11个疑似AL蛋鸡场中39份被检样品中有32份ALV p27抗原阳性，检出率为82.1%。

表2 商品代蛋鸡场检测

表3 病死鸡肿瘤组织样品检测

3 讨论

目前，国内外已经建立了许多禽白血病的检测方法，如酶联免疫吸附试验（ELISA）、PCR、RT-PCR、原位杂交（ISH）、间接免疫荧光（IFA）等，其中ELISA方法具有操作简便，成本相对较低，所需时间短等特点。奚德华等［3］报道，ELISA是适合规模化检测且便于推广应用的检测方法，该方法更适合作为养殖企业观察鸡群感染ALV程度的监测工具以及净化时的批量检测工具。崔治中等［4］、秦爱建等［5］以及陈福勇等［6］均利用ELISA方法检测p27抗原或各亚群抗体进行流行病学调查。本研究选用ELISA方法对河北省蛋鸡场p27抗原进行流行病学调查。

XUBR等［7］首次报道了国内蛋鸡骨髓细胞瘤型J亚群禽白血病病例。杨凤等［8］报道山东各品系蛋鸡群p27抗原阳性率达19.36%。白海瑛［9］、杨峰等［10］分别报道，贵阳、北京等地鸡场禽白血病平均感染率分别为27.2%和2.39%。张淼洁等调查的4个地区进口鸡群中均存在ALV感染［11］。本研究表明，河北省蛋种鸡场阳性率较高，达54.5%（6/11），且不同地区间鸡场阳性率和个体阳性率差异均较大，其中保定地区鸡场阳性率最高（100%），石家庄1号场的鸡个体阳性率高达66.9%（453/677），河北省商品代鸡场阳性率高达44.4%（4/9），保定1号场个体阳性率最高达16.8%（31/184）。不同地区、不同鸡场间存在较大差异，可能由于不同地域鸡场引种来源不同、鸡场管理水平不同等原因所致。

罗明星等［12］报道，贵州省某鸡场肝脏样本的禽白血病病原核酸检出率达到91.6%。张康等［13］（2013）对华东北部地区禽肿瘤病进行流行病学调查发现，禽白血病在临床上感染率较高。本研究检测的秦皇岛及沧州等地蛋鸡场的39份疑似AL病死鸡肿瘤组织（肝脏、脾脏、肾脏）p27抗原阳性率为82.1%（32/39），与上述不同地区的报道基本一致。

4 小结

本研究从种鸡场、商品代蛋鸡场和疑似病料组织中均检测到ALV p27抗原阳性样品，且种鸡场阳性率高，表明河北省蛋种鸡禽白血病感染情况比较普遍，感染率较高，潜在的流行威胁不容忽视，应加强种群净化，达到有效防制本病地目的。

［1］高玉龙，邵华斌，罗青平，等.2009年我国部分地区禽白血病分子流行病学调查［J］.中国预防兽医学报，2010，32（1）：32-35，43.

［2］崔治中.鸡白血病及其鉴别诊断和预防控制［J］.中国家禽，2010，32（8）：1-12.

［3］奚德华，梁有志，尹丽萍，等.规模化种禽场禽白血病检测方法的比较及初步应用［J］.中国家禽，2014，36（3）：4-17.

［4］崔治中，郭惠君，孙淑红.鸡白血病的流行现状和防制对策［J］.中国兽药杂志，2009，43（10）：37-41.

［5］秦爱建.鸡白血病检测技术研究［J］.中国家禽，2010，32（7）：34-35.

［6］陈福勇.鸡白血病流行病学调查和防控措施应用［J］.中国家禽，2010，32（7）：32-33.

［7］Xu B R，DongW X，Yu CM，etal.Occurrence of avian leukosis virus subgroupJ in commercial layer flocks in China［J］.Avian Pathol，2004，33（1）：13-17.

［8］杨凤，孙洪磊，倪伟，等.山东不同品系蛋鸡禽白血病流行病学调查［J］.畜牧兽医学报，2011，42（5）：698-703.

［9］白海瑛，殷洪波，曹红.某种鸡场禽白血病血清学调查［J］.黑龙江畜牧兽医，2008（3）：83.

［10］杨峰，方英，高明琴，等.贵阳地区禽白血病的血清学调查［J］.贵州畜牧兽医，2013，37（3）：25-26.

［11］张淼洁，张硕，顾小雪，等.2009-2010年中国部分地区进口鸡群禽白血病流行病学调查［J］.中国畜牧兽医，2012，39（2）：200-203.

［12］唐德宏，刘琴，孙玮玮，等.泰安地区不同海蓝褐商品蛋鸡群禽白血病的血清学检测［J］.中国家禽，2011，33（15）：63-64-67.

［13］张康，龚振华，刘坤，等.华东北部地区禽肿瘤性传染病流行病学调查［J］.中国动物检疫，2013，30（8）：55-57.

S852.65+9.3

B

0529-6005（2015）12-0046-02

2014-04-28

河北省蛋鸡产业技术体系建设专项（2014553957）；河北省高校百名优秀创新人才支持计划Ⅱ（13R2-112）；秦皇岛市农业科学院资助项目（2015-15）

张香斋（1970-），女，教授，硕士，主要从事禽类疫病研究，E-mail：zhangxiangzhai@163.com

李佩国，E-mail：lpeiguo@163.com