一例猪伪狂犬病的诊治

吴文阳 福建省厦门市同安区汀溪镇综合服务中心 361100

猪伪狂犬病（Porcine Pseudorabies，PR）是由猪伪狂犬病病毒 （Porcine Pseudorabies Virus，PRV）引起的一种传染病，主要表现妊娠母猪产死胎、木乃伊胎和流产以及新生仔猪出现神经症状、呕吐、腹泻等症状。伪狂犬的净化工作在国外已经取得很好的效果，美洲和部分欧洲国家已经消灭该病。我国自20世纪70年代开始引进Bartha-K61株，疫情一度得到较好的控制，且有些规模化的猪场已逐步净化该病。近年来，猪伪狂犬病卷土重来，给养殖户造成了较大的经济损失，已被视为最严重的疫病之一。2015年3月下旬，厦门市某猪场先后出现妊娠母猪流产及新生仔猪口吐白沫、体温升高等症状。根据流行病学、临床症状、病理变化和实验室检查，确诊为猪伪狂犬病。

1 发病情况及临床症状

该猪场饲养母猪230余头，公猪5头。2015年3月19日下午9头妊娠母猪突然流产，20日上午2窝新生仔猪出现口吐白沫，体温升高至41℃，精神沉郁、食欲不振、咳嗽、呼吸急促、站立不稳、头往后仰、四肢划动等症状，新生猪出现神经症状的病死率近80%，经抗生素治疗后效果不显著，疫情仍然得不到控制。

2 剖检病变

剖检5头新生猪，扁桃体肉眼可见充血、水肿、坏死，肾脏有点状出血，肠系膜淋巴结、下颌淋巴结、腹股沟淋巴结均有充血、肿大，肝脏表面出现坏死灶，脑部有充血现象，其他脏器未见明显变化。

3 实验室检查

将病料送福建省农科院进行检测，采用PCR或RT-PCR方法对猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒进行检测。

3.1 病料采集 淋巴结、肝脏、肾脏分别采自4头发病的哺乳仔猪。

3.2 病料处理 取4份病死猪的淋巴结、肝脏、肾脏，分别剪碎并在液氮中迅速研磨，用PBS溶液以1∶10进行稀释，研磨后的匀浆分别倒入4管5 mL无菌收集管中，做好标记，冻存于-70℃冰箱中。

3.3 核酸的提取及PCR和RT-PCR检测 将研磨好的4份病料于-70℃和室温之间冻融3次，12 000 r/min离心15 min，吸取200μL上清液，根据生工生物工程（上海）股份有限公司提供的Ezup柱式病毒核酸抽提试剂盒说明书提取核酸。反转录体系 Tota1RNA 4 μL、5×TransScriptTM A11-in-One SuperMix for PCR 4 μL、Rnase-free Water 12 μL，反应条件：25 ℃ 10 min，42 ℃ 30 min，85 ℃ 5 min。

PCR反应体系：Premix Taq 10?L，上下游引物各1μL，cDNA模版3μL，无菌去离子水5μL，混匀后进行扩增，扩增条件为：95℃预变性5 min，95 ℃变性 30 s，50～55 ℃复性 30 s，72 ℃延伸 30 s，35个循环；72℃终延伸7 min。1%琼脂糖凝胶电泳观察结果。

4份病料PCR及RT-PCR检测结果表明，猪伪狂犬病病毒均为阳性，猪圆环病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合症病毒均为阴性，

4 诊 断

根据发病情况、临床症状、剖检病变和实验室检查结果确诊为猪伪狂犬病。

5 综合防治

1）对全场母猪和哺乳仔猪紧急接种某进口的伪狂犬病基因缺失疫苗，同时加强饲养管理，7 d后，疫情得到较好控制。

2）对于该病要做到“防重于治”，可以从以下几个方面着手。首先，猪场应做好生物安全措施，保持圈舍的干燥整洁，定期开展消毒等常规工作。工作人员进入猪场要穿工作服工作鞋，圈舍门口消毒池经常更换不同的消毒药水，谨防耐药和失效，猪舍用具定期消毒，做好灭鼠灭猫工作。其次，做好疫苗免疫接种，根据自场情况制定一套符合自场的免疫程序。建议全场母猪一年免疫4次，保证母源抗体对哺乳仔猪的被动免疫。小猪在40～50日龄免疫，若伪狂犬病压力较大的猪场，哺乳小猪可以选择出生时增加滴鼻免疫1次。最后，有条件的话，最好在种猪群中开展伪狂犬病净化工作，及时淘汰阳性猪群。对于新进种猪，则要进行伪狂犬野毒抗体检测，确保引进伪狂犬野毒为阴性的种猪。

6 体 会

1）该场暴发猪伪狂犬病主要原因可能有以下几点，一是当前国内流行变异伪狂犬病毒，造成猪场对伪狂犬病毒的防控压力增大；二是该场饲养管理等技术比较薄弱，环境消毒不到位，忽视灭鼠灭猫工作；三是该场疫苗免疫比较混乱，疫苗免疫程序不够合理，种猪尤其是后备母猪免疫没有到位，同时也未进行疫苗免疫抗体检测，不知疫苗免疫效果。四是该场从未开展过伪狂犬病的净化工作，估计种猪携带伪狂犬病毒比较严重。

2）我省是猪伪狂犬病疫区，此类病案时有发生，给广大养殖户带来较大的经济损失。为此，宣传和普及科学预防猪伪狂犬病具有现实意义。