5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗尖锐湿疣的疗效及其对患者病灶HPV DNA载量的影响

刘秀英

(北京市仁和医院皮肤科，北京102600)

5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗尖锐湿疣的疗效及其对患者病灶HPV DNA载量的影响

刘秀英

(北京市仁和医院皮肤科，北京102600)

目的观察5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)对尖锐湿疣患者的治疗效果，并检测病灶局部人乳头瘤病毒(HPV)6/11型DNA载量的变化。方法将2011年3月至2014年3月于我院皮肤性病科门诊接受治疗的100例尖锐湿疣采用随机数表法将患者随机分为观察组和对照组各50例，观察组给予5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗，对照组给予传统电离子手术治疗。观察两组患者治疗后的HPV6/11型DNA载量、病毒转阴、近期疗效、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)水平、复发及不良反应情况，并进行对比分析。结果治疗3个月后，观察组病毒载量为(0.2±0.6)×106copies/ml，明显低于对照组的(1.3±2.2)×106copies/ml，差异具有统计学意义(P＜0.05)；观察组的HPV DNA阴转率为89.7%，对照组为68.4%，差异有统计学意义(P＜0.05)；观察组治疗有效率为90.0%，明显高于对照组的56.0%，差异有统计学意义(P＜0.05)；治疗后3个月，观察组TNF-α水平高于对照组，而IL-6水平低于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)；观察组的复发率及不良反应发生率分别为8.0%、16.0%，明显低于对照组的30.0%、46.0%，差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论ALA-PDT能有效降低尖锐湿疣患者病灶局部HPV病毒载量，其复发率及不良反应发生率较传统治疗方法低。

尖锐湿疣；5-氨基酮戊酸；光化学疗法；人乳头状瘤病毒；DNA载量

尖锐湿疣(Condyloma acuminatum，CA)是临床常见的一种生殖器增生性改变，由人类乳头瘤病毒(Human papilloma virus，HPV)感染造成[1]，其发病率较高，在我国性传播疾病中位居第三位[2]，高危型HPV所致尖锐湿疣皮损角质形成细胞的过度增生，严重时可引发癌变，对公众健康的危害极大[3]。虽然目前临床上对CA的治疗有激光、电灼、冷冻、微波等多种方法[4-6]，但治疗后较高的复发率是困扰临床医生的主要问题之一，其复发原因与人类乳头瘤病毒潜伏感染及亚临床感染的存在、再活动密切相关[7]，降低治疗后的复发率已成为临床治疗CA的研究热点。5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)是近年来治疗CA的一种新型疗法，近年来笔者采用ALA-PDT疗法治疗CA患者，取得了较好的临床疗效，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2011年3月至2014年3月于我院皮肤性病科门诊就诊的尖锐湿疣患者100例，其中男性61例，女性39例，平均年龄(42.6±4.3)岁。纳入标准：(1)首次治疗的临床表现和组织病理均确诊为尖锐湿疣的患者；(2)单个疣体直径均≤0.5cm，疣体数量≤3个；(3)HPV6/11型DNA检测为阳性；(4)所有入组患者签署知情同意书。排除标准：(1)排除合并有淋病、HIV感染、非淋菌性尿道炎、宫颈炎及使用糖皮质激素者；(2)排除患有皮肤光过敏症及疤痕体质的患者；(3)排除严重免疫功能障碍、严重心、肝、肾等重要脏器功能障碍的的患者。将100例患者根据随机数字表法分为观察组和对照组，每组各50例。两组患者的年龄、性别、病程、疣体个数及直径等一般临床资料比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性，见表1。

表1 两组患者基线资料比较(±s)

表1 两组患者基线资料比较(±s)

组别 男/女 平均年龄(岁)病程(月)疣体个数(个)疣体直径(cm)观察组(n=50)对照组(n=50)t/χ2值P值29/2132/180.692＞0.0541.9±4.643.1±3.80.709＞0.055.7±1.36.1±1.50.902＞0.052.1±0.91.9±1.10.419＞0.052.5±0.72.4±0.60.658＞0.05

1.2 治疗方法 观察组患者给予5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗，具体方法如下：首先对疣体及周围皮常规消毒，将20%盐酸氨基酮戊酸溶液(上海复旦张江生物医药股份有限公司)滴于脱脂棉球，并均匀敷于疣体上，局部避光3 h后采用氦氖激光照射治疗(XD-635AB型光动力激光治疗仪)。治疗中出现明显疼痛者可适当降低输出功率，但不低于150 mW，同时延长照光时间。每7～10 d治疗1次，共两次。对照组：采用电离子手术去除疣体，若在随访过程中出现复发，则对复发患者进行电离子手术去除疣体或外用咪喹莫特去除疣体。

1.3 观察指标 两组患者经过末次治疗后连续随访3个月，第1个月每7～10 d随访1次，以后每月随访1次。随访期间的观察指标包括：(1)病毒检测：两组患者分别于治疗前、治疗后7～10 d和治疗后3个月采集病灶局部表皮脱落细胞HPV6/11型DNA载量检测，HPV载量＜103定义为HPV阴性，检测方法参照参考文献[8]。两组复发病患者不再进入HPV DNA载量检测的统计。为确保病灶局部表皮脱落细胞取材的一致性，固定1名护士负责所有患者的样本采集，用生理盐水浸润过的无菌棉拭子反复擦拭原病灶部位3次，用无菌生理盐水将棉拭子在无菌管中充分漂洗后弃棉拭子，做好标记，-20℃冰箱保存。(2)肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6 (IL-6)测定：患者在治疗前及治疗后3个月采用上海晶美生物工程有限公司的ELISA试剂盒检测TNF-α和IL-6水平。(3)不良反应：随访期间对患者发生的不良反应进行记录。

1.4 疗效评价 在末次治疗后第一周进行疗效评价，参照徐标等[9]的疗效标准，即痊愈(疣体完全消失)、显效(皮损直径的总和缩小在60%～99%)、进步(皮损直径总和缩小在20%～59%)、无效(皮损直径总和缩小在20%以下或增大)。有效率=(痊愈+显效)/总例数×100%。

1.5 统计学方法 应用SPSS16.0统计学软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差(±s)表示，治疗前后各观察指标比较采用t检验，率的比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组患者HPV6/11型DNA载量检测结果比较 剔除复发19例患者，最终81例患者进入病毒载量检测统计。3个月后两组病例病毒HPV载量均有大幅下降，观察组HPV6/11型DNA载量低于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)；观察组HPV转阴率为89.7%，明显高于对照组的68.4%，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

表2 两组患者HPV6/11型DNA载量检测结果比较(±s，×106copies/ml)

表2 两组患者HPV6/11型DNA载量检测结果比较(±s，×106copies/ml)

注：a表示与除疣后7～10 d比较，P＜0.05。

组别 治疗前 除疣后7～10 d 除疣后3个月观察组(n=46)对照组(n=35)t值P值8.7±4.48.3±4.30.4100.3418.4±4.17.9±3.70.5750.2830.6±0.2a2.2±1.3a7.2060.000

2.2 两组患者治疗效果比较 在末次治疗结束1周后对全部患者进行疗效评价，结果显示：观察组患者治疗有效率为90.0%；对照组为56.0%，两组患者治疗有效率差异有统计学意义(χ2=16.941，P＜0.05)，见表3。

表3 两组患者的临床疗效比较(例)

2.3 两组患者的TNF-α和IL-6水平比较 治疗前两组患者TNF-α和IL-6水平比较差异无统计学意义(P＞0.05)，治疗后3个月，观察组TNF-α水平高于对照组，而IL-6水平低于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表4。

表4 两组患者治疗后的TNF-α和IL-6水平比较(±s，pg/ml)

表4 两组患者治疗后的TNF-α和IL-6水平比较(±s，pg/ml)

组别观察组(n=50)对照组(n=50) TNF-α85.3±24.9105.4±26.1 IL-68.7±3.16.9±2.9t值P值3.750.0002.8040.003

2.4 两组患者的复发情况 治疗3个月后，观察组的总复发率为8.0%，对照组为30.0%，差异有统计学意义(χ2=24.641，P＜0.05)，见表5。观察组4例复发的病例继续给予2～3次ALA-PDT治疗后痊愈，对照组15例复发的患者改用ALA-PDT治疗，在2～5次治疗后痊愈。

表5 两组患者的复发情况比较(例)

2.5 两组患者不良反应发生情况 术后疼痛是两组患者常见的不良反应，给予治疗后1周均有所缓解。观察组患者不良反应发生率为16.0%，显著低于对照组的46.0%，差异有统计学意义(χ2=11.503，P＜0.05)，见表6。

表6 两组患者不良反应发生情况（例）

3 讨论

尖锐湿疣是一种男女外生殖器及肛门部位的皮肤黏膜的良性增生性疾病，其主要由HPV6/11亚型感染引起，是一种常见的性传播疾病[10-11]。采用电离子手术去除疣体治疗尖锐湿疣虽然有明确的治疗效果，但其复发率较高[2，12]。氨基酮戊酸(ALA)是一种光敏剂原卟啉Ⅸ的前提物质，在体内可被增生活跃的病毒细胞选择性的吸收，转化为较强的光敏剂(原卟啉Ⅸ等卟啉类物质)，这些物质在特定波长的光照射后可产生活性氧，从而达到靶向性杀伤疣体内病毒的目的，减少而对周围正常组织的损伤[13]。

本研究于尖锐湿疣患者治疗前后检测其病灶局部HPV6/11型DNA载量，结果显示：治疗前两组患者病毒载量差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗7～10 d后，两组患者病毒载量较治疗前均有所下降，但组间差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗3个月后，观察组病毒载量为(0.2±0.6)×106copies/ml，显著低于对照组的(1.3±2.2)×106copies/ml(P＜0.05)。观察组中有41例患者HPV DNA转阴，阴转率为89.7%；对照组有24例患者HPV DNA阴转，阴转率为68.4%，差异有统计学意义(P＜0.05)。可见ALA-PDT能够有效地降低CA患者病灶局部HPV DNA载量，防止CA复发，其机制可能与AIA-PDT治疗后感染病毒的细胞凋亡、坏死和脱落有关。

IL-6，TNF-α的水平反映了细胞的免疫水平，研究报道IL-6、TNF-α与CA的复发密切相关[14-15]。近期研究[16]发现CA患者治疗前血清TNF-α显著高于正常人组，治疗后显著下降；而IL-6水平治疗前显著低于正常人，治疗后有所升高。这一研究表明通过监测患者血清IL-6，TNF-α水平对预测CA的复发及判断治疗效果有一定的价值。治疗后3个月，观察组患者TNF-α水平高于对照组，而IL-6水平低于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，提示ALA-PDT治疗对于预防尖锐湿疣的复发优于对照组。本研究结果显示：对照组治疗有效率为56.0%，观察组有效率为90.0%，差异均有统计学意义(P＜0.05)；治疗3个月后，观察组总复发率为8.0%，显著低于对照组(30.0%)。本研究中两种治疗方法的主要不良反应为剧烈疼痛，其次为色素沉着及伤口感染，而浅表瘢痕和尿道口狭窄较少见，观察组不良反应发生率为16.0%，对照组不良反应发生率为46.0%，差异有统计学意义(P＜0.05)。这一结果说明ALA-PDT在治疗尖锐湿疣时有疗效好、不良反应轻等特点。

综上所述，ALA-PDT治疗尖锐湿疣的疗效优于传统电离子手术，ALA-PDT对HPV病毒清除率高，因此可以有效减少尖锐湿疣患者的复发率，同时ALA-PDT引起不良反应较少，是治疗尖锐湿疣的一种有效可行的方法。

[1]Fathi R,Tsoukas MM.Genital warts and other HPV infections:established and novel therapies[J].Clin Dermatol,2014,32(2):299-306.

[2]朱 伟,曹 萍.尖锐湿疣的研究进展[J].皮肤病与性病,2014,36 (6):327-329,336.

[3]Wakeham K,Kavanagh K.The burden of HPV-associated anogenital cancers[J].Curr Oncol Rep,2014,16(9):402.

[4]周碧海.CO2激光联合斯奇康预防尖锐湿疣术后复发的疗效观察[J].海南医学,2014,25(15):2302-2303.

[5]王 星,李中兴,冯 瑞,等.经尿道选择性绿激光汽化术与电切术治疗尿道内尖锐湿疣疗效观察[J].海南医学,2012,23(8):39-40.

[6]Huang J,Zeng Q,Zuo C,et al.The combination of CO2laser vaporation and photodynamic therapy in treatment of condylomata acuminata[J].Photodiagnosis Photodyn Ther,2014,11(2):130-133.

[7]徐 楠,胡小利,覃兆伟,等.尖锐湿疣复发的防治进展[J].医学综述,2013,19(9):1604-1606.

[8]王 辉,赵学良.氨基酮戊酸光动力疗法治疗尖锐湿疣对病灶乳头瘤病毒复制的影响[J].中华皮肤科杂志,2014,47(10):739-741.

[9]葛红芬,臧运书,汤占利,等.5-氨基酮戊酸-光动力疗法治疗尖锐湿疣疗效分析[J].中华实用诊断与治疗杂志,2011,25(1):96-98.

[10]谭 娟,徐顺明,蔡海斌,等.男性尖锐湿疣皮损HPV基因芯片型别分析[J].中国皮肤性病学杂志,2012,26(3):196-199.

[11]Dochez C,Bogers JJ,Verhelst R,et al.HPV vaccines to prevent cervical cancer and genital warts:an update[J].Vaccine,2014,32(14):1595-601.

[12]McCormack PL,Joura EA.Spotlight on quadrivalent human papillomavirus(types6,11,16,18)recombinant vaccine(Gardasil(R))in the prevention of premalignant genital lesions,genital cancer,and genital warts in women[J].BioDrugs,2011,25(5):339-343.

[13]Wang HW,Zhang LL,Miao F,et al.Treatment of HPV infection-associated cervical condylomata acuminata with5-aminolevulinic acid-mediated photodynamic therapy[J].Photochem Photobiol,2012,88(3):565-569.

[14]Aydogan K,Ozakin C,Saricaoglu H,et al.Relationship between the interleukin-6-174 gene and mannose-binding lectin codon54 gene polymorphisms and condyloma acuminatum[J].J Eur Acad Dermatol Venereol,2014,28(10):1306-1312.

[15]Liu D,Zhou L,Chen X.The lymphoblastoid cell lines of recurrence condyloma acuminatum patients produce lower level of tumor necrosis factor stimulated with LPS[J].J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci,2003,23(3):317-319.

[16]王希晶,王谦可,梁凤仪,等.ALA-PDT联合CO2激光治疗尖锐湿疣疗效观察及治疗前后外周血TNF-α和IL-6变化[J].中国皮肤性病学杂志,2012,26(3):233-237.

Clinical effect of5-aminolevulinic acid photodynamic therapy in patients with condyloma acuminatum and its impact on DNA load of human papillomavirus.

LIU Xiu-ying.Department of Dermatology,Renhe Hospital of Beijing City,Beijing102600,CHINA

ObjectiveTo observe the clinical effect of5-aminolevulinic acid photodynamic therapy (ALA-PDT)in the treatment of patients with condyloma acuminatum(CA),and to detect the changes in DNA loads of human papillomavirus(HPV)type6/11 in lesions of the patients before and after ALA-PDT.MethodsOne hundred patients with CA in our hospital from March2011 to March2014 were randomly divided into observation group and control group by random number table.The observation group(n=50)was treated with ALA-PDT,and the control group(n=50)received traditional electric ion surgery.DNA load of HPV type11/6,virus negative situation,short-term clinical effect,tumor necrosis factor-α(TNF-α),interleukin-6(IL-6),recurrence,and adverse reactions were analyzed.ResultsAfter3 months of treatment,the DNA loads of HPV in the observation group was(0.2±0.6)×106copies/ml,significantly lower than(1.3±2.2)×106copies/ml in the control group(P＜0.05).After the treatment,89.7%(26/29)of the patients in the observation group and68.4%(13/19)in the control group became HPV DNA negative,with statistically significant difference between the two groups(P＜0.05).The effective rate of the observation group was90.0%,significantly higher than56.0%in the control group(P＜0.05).After3 months of treatment,TNF-αlevel of the observation group was significantly higher than that of the control group(P＜0.05),while the IL-6 level was significantly lower(P＜0.05).Recurrence rate and incidence of adverse reactions in observation group was8.0%and16.0%,respectively,which were significantly lower than30.0%and46.0%in the control group(P＜0.05).ConclusionALA-PDT can reduce HPV DNA loads in lesions of patients with CA,with lower recurrence rate and reduced incidence of adverse reactions than traditional therapy.

Condylomata acuminata;5-Aminolevulinic acid;Photochemotherapy;Human papilloma virus (HPV);DNAload

R759

A

1003—6350(2015)22—3307—04

2015-04-24)

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.22.1200

刘秀英。E-mail：lxy710311@sina.com