肿瘤标志物CEA、CA50、CA19-9、CA72-4、CA242及HSP60联合检测在大肠癌诊断中的应用

李世龙　张宝　宋扬　张德江　张海光　韩素桂　周秀艳

作者单位: 063000河北省唐山市人民医院检验科(李世龙、宋扬、张德江、张海光、韩素桂、周秀艳) ;河北省唐山市传染病医院检验科(张宝)

肿瘤标志物CEA、CA50、CA19-9、CA72-4、CA242及HSP60联合检测在大肠癌诊断中的应用

李世龙张宝宋扬张德江张海光韩素桂周秀艳

作者单位: 063000河北省唐山市人民医院检验科(李世龙、宋扬、张德江、张海光、韩素桂、周秀艳) ;河北省唐山市传染病医院检验科(张宝)

【摘要】目的探讨不同人群肿瘤标志物CEA、CA50、CA19-9、CA72-4、CA242及HSP60含量变化情况，各项目检测及联合检测在大肠癌诊断中的临床意义。方法回顾性分析40例健康体检者、39例肠道良性病变患者(包括结、直肠炎症及息肉)、48例大肠癌患者(直肠癌25例、结肠癌23例)肿瘤标记物的含量变化情况。结果48例大肠癌患者中CEA含量增高33例(68.75%)、CA50含量增高33例(68.75%)、CA19-9含量增高44例(91.67%)、CA724含量增高14例(29.17%)、CA242含量增高34例(70.83%)、HSP60含量增高35例(72.92%)，六项肿瘤标志物联合检测增高45例(93.75%)，大肠癌肿瘤标志物含量均高于健康对照组，差异有统计学意义(P＜0.01)，良性病变组与健康对照组差异无统计学意义(P＞0.05)。结论CEA、CA50、CA19-9、CA724、CA242及HSP60六项肿瘤标志物联合对大肠癌进行检测，可进一步提高检出率，对大肠癌早期诊断及鉴别诊断有重要意义。

【关键词】大肠癌;肿瘤标志物;热休克蛋白60;联合检测

项目来源:河北省科学技术研究与发展指导计划项目(编号: 20142676)

E-mail: 51412452@ qq.com

大肠癌(colorectal cancer)包括结肠癌(colon cancer)和直肠癌(colorectal carcinoma，CRC)，是消化系统常见的恶性肿瘤，居世界肿瘤病死率第三位［1］。随着我国社会经济的发展，人民生活方式和饮食习惯的改变，大肠癌发病率呈逐年上升趋势，已跃居成为我国常见恶性肿瘤的第五位，而且大肠癌患者低龄化趋势日益显著［2］。故大肠癌的早发现、早诊断、早治疗是提高大肠癌患者治疗效果、改善预后、提高生存率的关键。大量研究结果显示，各期大肠癌患者5年生存率分别为:Ⅰ期95%以上，Ⅱ级80%，Ⅲ级50%～60%［3］。令人遗憾的是，得到早期确诊的大肠癌患者只占全部患者的5%，而60%～70%的大肠癌在被发现时已是Ⅱ级或晚期了，手术后的复发率高达30%。研究显示，及早筛检可以明显降低结肠癌、直肠癌的发病率和病死率［4］。近年来，大肠癌肿瘤标志物的检测因其简便、快速、高效、损害小等优点被广泛应用于临床诊断。本研究通过对大肠癌患者血清中的癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、癌抗原50(cancer antigen 50，CA50)、糖类抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9，CA19-9)、胃癌相关抗原72-4(gastric cancer associated antigen 72-4，CA72-4)、糖类抗原242(carbohydrate antigen 242，CA242)采用电化学发光法进行检测，联合酶联免疫法测得热休克蛋白60(heat shock protein 60，HSP60)的含量变化情况，探讨各项检测及六项联合检测对大肠癌早期诊断、鉴别诊断的价值。

1　资料与方法

1.1一般资料选取河北省唐山市人民医院2012年7月至2014年5月健康体检、门诊及住院的肠道疾病患者127例。其中大肠癌确诊患者48例(大肠癌组，其中直肠癌25例，结肠癌23例)，男24例，女24例;年龄39～78岁，平均年龄(60.9±9.0)岁。良性病变患者确诊39例(大肠良性病变组，其中结肠炎15例，结、直肠息肉24例)，男20例，女19例;年龄35～77岁，平均年龄(55.0±10.0)岁。健康体检者40例(健康对照组)，男28例，女12例;年龄46～70岁，平均年龄(57.2±5.12)岁。所有病例采用盲法随机抽取，剔除其他病变干扰。

1.2检测方法CEA、CA199、CA724测定使用德国COBAS-E601型罗氏发光免疫分析仪及配套试剂，正常参考范围CEA 0～5.00 ng/ml、CA19-9 0～39.00 U/ml、CA72-4 0～6.90 U/ml; CA242、CA50测定使用深圳新产业生物医学有限公司Maglumi2000 plus全自动化学发光仪及配套试剂，正常参考范围CA242 0.05～10.00 U/ml、CA50 0～25.00 U/ml，HSP60测定采用ELISA法，试剂盒(R＆D SYSTEMS，美国)，采用奥地利HT2全自动酶标分析仪测得吸光度值，根据标准曲线，将测得样本的OD值转化为浓度值(pg/ml)，参考范围0～400 pg/ml。本研究所有标本留取及测定均严格按照操作手册进行。

1.3统计学分析应用SPSS 18.0统计软件，计量资料以±s表示，均采用LSD-t检验，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1血清肿瘤标志物CEA、CA50、CA19-9、CA72-4、 CA242及HSP60的含量变化比较健康对照组、大肠良性病变组、大肠癌组血清中CEA、CA50、CA19-9、CA72-4、CA242及HSP60的含量变化，大肠癌组较健康对照组显著性升高，差异有统计学意义(P＜0.01)，大肠良性病变组较健康对照组差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1　血清中CEA、CA50、CA19-9、CA72-4、CA242及HSP60的含量比较　±s

表1　血清中CEA、CA50、CA19-9、CA72-4、CA242及HSP60的含量比较　±s

注:与健康对照组比较，*P＜0.01

组别　CEA(ng/ml)　CA50(U/ml)　CA19-9(U/ml)　CA72-4(U/ml)　CA242(U/ml)　HSP60(pg/ml)健康对照组(n=40)　1.58±1.48　9.35±6.32　11.44±8.26　2.39±1.70　5.81±5.35　183.41±89.24大肠良性病变组(n=39)　2.51±2.66　8.69±9.48　11.16±8.66　4.86±9.67　7.25±7.13　194.92±104.71大肠癌组(n=48)　59.65±91.86*　107.46±173.08*　253.45±364.92*　12.28±24.04*　78.33±81.33*　549.47±425.91*

2.2血清中CEA、CA50、CA19-9、CA72-4、CA242和HSP60联合检测对大肠癌的诊断价值六种肿瘤标记物CEA、CA50、CA19-9、CA72-4、CA242及HSP60的单项检测敏感度从29.17%～91.67%，六项联合检测比单项检测均有不同程度的提高，敏感度达93.75%，提示六项联合检测可显著提高大肠癌患者的诊断效力。见表2。

表2　血清CEA、CA50、CA19-9、CA72-4、CA242和HSP60单独和联合检测对大肠癌的诊断价值　例(%)

3　讨论

CEA是最早被发现的大肠癌肿瘤标志物，并且CEA在绝大多数恶性肿瘤中均有显著升高。其特异性不强，灵敏度不高，单独检测对肿瘤早期诊断作用不明显。CA19-9作为一种肿瘤相关抗原，有学者提取结肠癌培养细胞株SW1116制成抗消化道肿瘤的单抗［5］1116-NS19-9，CA19-9的诊断效力优于其他各项肿瘤标志物，达到了91.67%; CA19-9亦有助于临床疗效的评价、预后评估和病情的随访监测［6］，大肠癌术后血清CEA、CA19-9含量与结肠癌术后复发或转移关系紧密，血清CEA、CA19-9联合检测可用来预测结肠癌根治术后复发或转移。CA242是一种唾液酸化的糖类抗原，它是一种存在于多器官恶性肿瘤中呈粘蛋白类型的糖蛋白CanAg，即不能与LewisA型抗原反应，也不能与唾液酸化的半乳糖苷反应，是近年来应用于临床的一种较新的肿瘤标志物，主要应用于胰腺癌和结肠癌的诊断。CA50是细胞恶变时，糖基化酶被激活，造成细胞表面糖基结构改变而形成，几乎总是和CA242一起表达，但两者受不同的单克隆抗体识别。两者敏感性分别为68.75%、70.83%，结果相近，印证了这一结论。CA72-4是粘蛋白样的高分子量糖蛋白，分子量为220～400 kD，血清含量参考范围＜6 U/ml，在各种消化道肿瘤、卵巢癌中均可异常升高，其大肠癌诊断敏感性最低为29.17%，其胃癌诊断敏感性较高，需做进一步验证。HSP是一种应激蛋白，广泛存在于原核及真核细胞中，有维持细胞蛋白自身稳定及结合受体调节细胞周期等许多功能，HSP60是HSP家族的重要成员之一。最近研究发现HSP与细胞的转化和恶变关系密切，癌基因转化的细胞和人类恶性肿瘤的细胞系中HSP呈过度表达，其敏感性也是除CA19-9外最高的72.92%、其临床应用尚未普及，需要进一步临床研究加以推广，这也是本研究的目的所在。

本研究除HSP60外均采用了电化学发光法，检测结果显示，各项肿瘤标志物敏感性显著高于其他文献［7］所报道的利用酶联免疫法所测得数据，而且也与文献［7］报道有差异。有文献报道CEA、CA19-9、CA242三种肿瘤标志物由于与肿瘤细胞基因表达水平的差异而导致在临床病理分期、大肠肿瘤对肠壁侵袭程度、淋巴结转移和治疗的预后显著不同［8］。另外也提示，由于肿瘤发现越晚，肿瘤组织坏死及凋亡后溶解释放到患者血液中的肿瘤标志性蛋白就越多，所以各单项肿瘤标志物在大肠癌肿瘤的早、中、晚期的不同时期而引起单一结肠癌临床特征的不同。本研究和相关文献［9］所报道的，虽然在方法上均采用了电化学发光法，但检测的敏感度有显著差异，原因有待进一步探讨。

本研究中所有大肠癌肿瘤标志物均为非特异性的肿瘤相关抗原，其单独检测的敏感度和特异度均有一定的局限性，尤其是CA72-4的敏感度最低。结果显示多项肿瘤标志物的联合检测可显著提高大肠癌诊断的灵敏度。综上所述，血清CEA、CA50、CA19-9、CA72-4、CA242和HSP60的联合检测优于单独项目检测，显著提高了大肠癌诊断的敏感性，特异性略有下降。CEA、CA50、CA19-9、CA724、CA242及HSP60六项肿瘤标志物对大肠癌进行联合诊断，具有优异的诊断效力，是大肠癌发生、发展、分期及预测结肠癌术后复发或转移的重要指标。应用肿瘤标志物的联合检测，为大肠癌患者的早期诊断、鉴别诊断、预后转归提供有效的帮助。

参考文献

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8田华，汪和明，陈杰，等.CEA、CA199、CA242和CA724联合检测对大肠癌的诊断价值研究.现代消化及介入诊疗，2013，5: 317-318.

9赵先文，江波，韩存芝，等.大肠癌患者血清肿瘤标志物含量测定与临床研究.中华肿瘤杂志，2005，27: 286-288.

(收稿日期:2014－10－15)

通讯作者:张宝，063000河北省唐山市传染病医院;

doi:10.3969/j.issn.1002－7386.2015.07.012

【文章编号】1002－7386(2015) 07－1004－03

【文献标识码】A

【中图分类号】R 735.34